金昌市金川区小反刍兽疫免疫效果检测与分析

2016-11-24李晓霞杨开山车小蛟张登基

中国草食动物科学 2016年5期

关键词：金昌市兽疫甘肃省

李晓霞，杨开山，车小蛟，张登基

（1.甘肃省金昌市金川区动物疫病预防控制中心，金昌 737100；2.甘肃省动物疫病预防控制中心，兰州 730046）

金昌市金川区小反刍兽疫免疫效果检测与分析

李晓霞1，杨开山1，车小蛟2，张登基2

（1.甘肃省金昌市金川区动物疫病预防控制中心，金昌 737100；2.甘肃省动物疫病预防控制中心，兰州 730046）

为掌握甘肃省金昌市金川区小反刍兽疫的实际免疫效果，为科学防控小反刍兽疫疫情提供可靠依据，对金川区宁远堡和双湾免疫规模羊场（户）和散养户羊进行免疫注射小反刍兽疫活疫苗，分别于免疫后21 d和1年，采用C-ELISA对采集的羊只血清样品进行抗体水平检测。结果显示：免疫后21 d和1年后免疫抗体平均合格率分别为94.53%和79.20%，表明金川区的小反刍兽疫免疫羊在免疫后21 d和1年后免疫合格率均可达到国家规定的70%的标准。

小反刍兽疫；C-ELISA；免疫效果；抗体检测

小反刍兽疫（peste des petits ruminants，PPR）是由小反刍兽疫病毒（peste des petits ruminants virus，PPRV）引起的绵羊、山羊等小反刍动物急性、热性、高度接触性传染病，临床上以发热、口炎、腹泻、肺炎为特征［1］，山羊和绵羊易感，山羊发病率和病死率均较高，严重爆发时，本病的发病率高达100%，羔羊感染时病死率可达100%。PPR主要通过直接接触传染，患病动物的排泄物和分泌物是主要传染源，尤其是感染后带毒的羊更为危险。该病常呈现地方流行性，当易感动物增多时，可造成爆发流行［2］。

该病作为一种重大跨国界动物传播疫病，世界动物卫生组织（OIE）将其列为A类动物疫病，我国将其列为一类动物疫病。该病自1942年在非洲西部的象牙海岸首次报道以来，10年内小反刍兽疫几乎遍及了从撒哈拉沙漠到赤道的所有国家。该病于1987年在印度首发，然后蔓延到印度许多地区，此后一直严重危胁我国畜牧经济和动物卫生安全。我国在2007年首次在西藏自治区阿里日土县和革吉县发现该病以来，先后在新疆、甘肃、贵州、湖南以及黑龙江等21个省、自治区、直辖市发生，给当地养羊业造成了巨大经济损失。目前，小反刍兽疫尚无有效治疗措施，注射疫苗是目前预防该病最有效的方法［3-5］。甘肃省自古浪县发生小反刍兽疫疫情以来，全省对14个市州重点区域的羊只进行免疫接种，构建免疫屏障。为监测甘肃省金昌市金川区羊注射小反刍兽疫疫苗后抗体应答水平，评估防控效果，为今后制定防控措施提供科学依据，本研究特开展了免疫效果检测与分析。

1 材料与方法

1.1 疫苗和检测试剂

小反刍兽疫活疫苗由新疆天康畜牧生物技术股份有限公司生产，批号为2014015；检测试剂为中国动物卫生与流行病学中心（青岛）提供的小反刍兽疫阻断ELISA抗体检测试剂盒，批号为201428，201517。

1.2 被检血清

2015年4月和2016年4月分别采集金昌市金川区宁远堡乡和双湾乡小反刍兽疫活疫苗免疫后21 d和1年的规模羊场（户）和散养户羊血样896份和572份，离心分离血清，编号，-20℃保存待检。

1.3 仪器

单道移液器、多道移液器、生化培养箱、洗板机（COLUMBUS）、酶标仪（TecanSunrise）、普通离心机、一次性移液器吸头等。

1.4 检测方法

向酶标板阳性对照孔加入阳性血清50 μL；阴性对照孔加入阴性血清50 μL；酶标单抗对照孔加入稀释液50μL；样品孔每孔加入稀释液25μL，加入待检血清25μL。37℃生化培养箱孵育60 min。弃去反应孔的液体，用洗涤液洗4次，每次每孔加洗涤液300 μL。每孔加入酶标单抗50 μL，37℃孵育30 min，用洗涤液洗4次。每孔加入底物溶液50 μL，室温避光作用10～15 min。最后，每孔加入终止液50 μL，终止反应。用酶标仪在450 nm波长下测定各孔OD450值，计算阻断率。

1.5 判定标准

阳性对照阻断率（PB）＞60，阴性对照阻断率（PB）＜40，则试验结果有效，否则，应重新进行试验。待检样品阻断率（PB）＞50，判为阳性；待检样品阻断率（PB）≤50，判为阴性。

2 结果

对在金昌市金川区宁远堡和双湾分别于免疫后21 d和免疫后1年采集的羊血清样品进行小反刍兽疫免疫抗体检测，免疫抗体合格血清分别为847份和453份，平均合格率分别为94.53%和79.20%，详见表1、表2。

表1 2015年金川区小反刍兽疫抗体检测结果（免疫后21 d）

表2 2016年金川区小反刍兽疫抗体检测结果（免疫后1年）

3 讨论

小反刍兽疫又称羊瘟，是由小反刍兽疫病毒引起的山羊和绵羊的急性、接触性病毒传染病，临床上以高热、口炎、眼和鼻分泌物、腹泻与肺炎为主要特征，该病严重威胁畜牧业的发展，特别是养羊业的发展和食品安全。据农业部兽医局公布的疫情数据显示，自2013年以来，我国新疆、甘肃、内蒙古等20多个省、市、自治区先后爆发该病，在新发疫点内，易感羊群的发病率和死亡率均很高，该病已造成巨大的经济损失，严重影响我国养羊业的发展，目前小反刍兽疫的防控形势非常严峻［6-7］。

2014年1月22日，甘肃省武威市古浪县发生一起羊小反刍兽疫疫情，古浪县黄花滩乡黄花滩村部分养殖户饲养的羊出现疑似小反刍兽疫症状，发病羊951只，死亡133只。2014年1月24日，经国家外来动物疫病研究中心确诊，该起疫情为小反刍兽疫疫情［8］。

为切实做好小反刍兽疫消灭工作，有效保障养羊业稳定健康发展，甘肃省金昌市金川区对羊只进行了PPR疫苗强制性免疫，并在免疫接种21 d和1年后，分别采集血样896份和572份进行抗体检测。结果表明，免疫后21 d和免疫后1年的免疫抗体合格血清分别为847份和453份，平均合格率分别为94.53%和79.20%，本次使用新疆天康畜牧生物技术股份有限公司的PPR活疫苗对本辖区内的各种健康羊只进行免疫接种，接种后未见PPR新病例和不良接种反应，表明PPR活疫苗的副作用小，安全可靠。

免疫后21 d，免疫羊群的整体合格率达到94%以上，免疫后1年整体合格率保持在将近80%，整体免疫效果超过了农业部兽医局提出抗体合格率不低于70%的要求。从数据上来看，金川区小反刍兽疫免疫效果整体较好，在预防和控制PPR的流行中发挥了重要作用。由此可见，本研究采取的防控措施是有效的。

当前，对小反刍兽疫尚无有效的治疗措施，疫苗免疫是最为有效的手段之一。在防疫工作中，要严格按照本地区动物疫病流行情况制定科学有效的免疫方案，切实做好小反刍兽疫的免疫工作，及时开展抗体检测，认真做好补免工作，确保有效保护。大量研究表明，许多野生偶蹄动物亦是小反刍兽疫疫病的带毒者和易感动物，因此，应严密监控易感野生动物的活动，加大在野生小反刍兽群的迁移路线周围及野生小反刍兽群活动区域羊只的监测和免疫，防止带毒野生动物向家养畜传播，做好相关工作。虽然疫苗免疫可以有效预防和控制小反刍兽疫，但PPR疫苗存在毒力返祖的风险，这些都不利于我国PPR长期防控，其他流行该病的国家的实践也证明了这一点，因此，不能盲目采取大规模强制免疫该病，要严格区分疫区和非疫区，对疫区采取严格的处置措施。一旦确诊，应迅速采取严格的封锁、扑杀、隔离检疫等措施，对病死畜尸体进行无害化处理，彻底对污染区进行清洁消毒［9-11］。

［1］骆学农，郑亚东，才学鹏.小反刍兽疫的研究进展［J］.中国兽医科学，2007，37（11）：994-999.

［2］陈发喜，孙爱红，蔡扩军，等.小反刍兽疫研究概况［J］.草食家畜，2014（5）：54-59.

［3］翁善钢.小反刍兽疫的流行、诊断与防控［J］.中国草食动物科学，2012，32（6）：48-51.

［4］李佳，何宗霖，白正辉，等.新疆阿克苏地区羊小反刍兽疫免疫效果检测与分析［J］.草食家畜，2015（4）：49-51.

［5］祁巧芬.小反刍兽疫免疫效果监测报告［J］.当代畜牧，2015（6）：29-18.

［6］何利昆，段亚良，谷志大.辽宁省小反刍兽疫疫苗临床免疫效果跟踪试验及抗体水平动态观察［J］.现代畜牧兽医，2014（8）：14-18.

［7］李彦芳，玉苏甫，温倩木，等.小反刍兽疫疫苗免疫效果评价［J］.中国畜牧业，2014（12）：62-63.

［8］韩庆彦，李勇生，孟林明，等.绵羊小反刍兽疫的诊断［J］.中国草食动物科学，2014，34（3）：45-47.

［9］王凡，智晓莹，董金杰，等.小反刍兽疫疫苗研究进展［J］.中国草食动物科学，2014，34（3）：58-61.

［10］谷修萍，杨翠红，高代宏.小反刍兽疫流行特点及其防控策略［J］.中国畜牧兽医文摘，2014（12）：87.

［11］石永杰.浅析小反刍兽疫的诊断与防控［J］.河南畜牧兽医，2014，35（9）：25-26.

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