李润成，杨　宇，李　淼

（湖南农业大学动物医学院，湖南 长沙 410128）

黑山羊细颈囊尾蚴与弯曲杆菌混合感染的诊治

李润成，杨宇，李淼

（湖南农业大学动物医学院，湖南 长沙 410128）

图1　病羊肝脏上突起的肿块

1　发病情况

2014年9月湖南株洲某黑山羊养殖场羊只发病，发病主要表现为消瘦、病程长、慢性死亡，少数怀孕母羊消瘦后出现流产现象。用阿苯达唑多次驱虫仍没有明显效果。63只羊，35 d内死亡11只。

2　剖检变化

将极度消瘦的病羊处死剖开胸腹腔可见肝脏肿大，并且肝脏表面有突起的肿块（图1），切开肿块组织呈蜂窝状，此外在肝脏、肠系膜上有鸡蛋大小的囊泡粘附（图2），泡内充满透明囊液，其他脏器病变不明显。

3　实验室诊断

图2　病羊肝脏上的囊泡

3.1细菌分离培养取羊肝脏肿大部位组织接种于血琼脂平板，37℃、分别进行有氧培养和厌氧培养48 h，厌氧培养采用自封袋内放置厌氧发生袋进行。结果有氧培养的平板上没有长出任何细菌，但在厌氧培养的平板上长出了大量密密麻麻形态一致的针尖大小菌落。将培养的细菌进行涂片与革兰染色镜检，结果表明，分离细菌为革兰阴性、弯曲程度不一的杆菌。

3.2分离菌的PCR扩增与测序鉴定取分离菌作为模版，用细菌通用引物［1］进行PCR扩增，扩增结果见图3，可见从分离菌扩增出了约1 142 bp的目的条带。将扩增的PCR产物送上海铂尚生物科技有限公司进行测序（序列已登录到GenBank，登录号为KP208684）和Blast分析。结果证明分离菌为弯曲杆菌，与各弯曲菌相应基因片段同源性最高达到99%以上。

图3　分离菌16S rRNA基因PCR扩增

3.3细菌药物敏感性检测及临床治疗效果将分离菌用绵羊血琼脂培养后，刮取细菌菌落用TSB液体培养基稀释，按药敏试验要求将菌液浓度调至0.5个麦氏单位后，根据不同细菌特性选择检测药物，采用纸片法进行药物敏感性检测，药物敏感性检测细菌培养仍然按厌氧法进行。药敏检测结果见表1。由表1可见该分离菌对氟苯尼考、恩诺沙星最为敏感。建议羊场采用吡喹酮对羊群进行口服驱虫，给有明显发病表现的羊肌肉注射氟苯尼考，连用3 d。结果10 d控制了病情，没有再出现发病羊的死亡，并且羊群的精神状态较以前有了很大改善。

表1　分离菌药物敏感性检测结果

4　讨论与分析

本文对送检病羊进行了剖检以及实验室诊断，从剖检观察来看，发病羊肝脏表面以及肠系膜粘附有明显的水铃铛样囊泡，说明存在细颈囊尾蚴感染［2-3］，虽然细颈囊尾蚴主要危害幼龄羊，成年羊群常仅为带虫者。病羊的临床症状一般不甚明显，主要是慢性经过，但本文通过有氧和厌氧两种培养方法从发病羊实质脏器进行细菌分离，结果厌氧方法从肝脏分离到了大量弯曲杆菌，结合临床针对细颈囊尾蚴、弯曲杆菌联合用药取得明显效果这一结果。证明该羊群发病死亡主要原因为细颈囊尾蚴和弯曲杆菌混合感染引起，这也是该养殖场使用阿苯达唑未能取得明显效果的重要原因。细颈囊尾蚴病是寄生于犬等肉食动物小肠内的带科、泡状带绦虫的幼虫-细颈囊尾蚴，寄生在羊、猪、牛等动物的腹膜、肝脏等处引起的寄生虫病。细颈囊尾蚴在世界范围分布较广，凡养犬的地方，一般都可能有牲畜感染细颈囊尾蚴，家畜感染细颈囊尾蚴，是由于接触带有泡状带绦虫的犬的粪便中的节片或虫卵而引起，因此，减少牧区犬的养殖，或防止犬的粪便污染了牧场、饲料和饮水可减少羊群细颈囊尾蚴感染流行的严重程度。至于本文从发病羊肝脏分离到大量弯曲杆菌，尚未见到类似的报道，该菌可能为羊群感染细颈囊尾蚴后由于机体体质下降继发感染所致，同样这也可能是发病羊死亡的重要原因。

［1］Run-Cheng Li，Chao-Ting Xiao，Xing Qian，et al.Occurrence of Streptococcus dysgalactiae subsp.Equisimilis in Masked Palm Civet（Paguma larvata）［J］.Journal of Animal and Veterinary Advances，2012，11（12）：2020-2023.

［2］李繁，梁珠娴.屠宰猪细颈囊尾蚴病的调查与思考［J］.中国兽医杂志，2004，21（4）：42.

［3］张长英.乌兰县猪细颈囊尾蚴病感染情况调查［J］.中国兽医杂志，2008，44（12）：41.

S855.1+2

B

0529-6005（2016）04-0066-02

2015-01-09

李润成（1979-），男，实验师，硕士，从事动物传染病的教学与研究工作，E-mail：lixueshengqq@126.com