李瑶瑶，董文鹏，陆 华，童 光，王晓武，马 涛，张卫达

血清Leptin、SFRP5、RBP4与冠心病的相关性分析

李瑶瑶1，2，董文鹏2，陆 华2，童 光2，王晓武2，马 涛2，张卫达1，2

目的 探讨血清中瘦素（Leptin）、分泌型卷曲相关蛋白5（SFRP5）和视黄醇结合单核蛋白4（RBP4）表达水平与冠状动脉粥样硬化性心脏病（CAD）的关系。方法 选取71例怀疑为CAD的患者，根据心电图、冠脉造影等分为CAD组和非CAD组，收集患者临床资料，并用ELISA法分别测定血清Leptin、SFRP5、RBP4的表达水平，将Leptin、SFRP5、RBP4表达水平与CAD患者临床资料进行相关性分析。结果 CAD组血清SFRP5水平明显低于非CAD组（P＜0.05），Gensini积分与血清SFRP5水平呈负相关性（r=-0.20，P=0.01）；CAD组Leptin水平高于非CAD组，差异有统计学意义（P＜0.05），血清RBP4水平在CAD组和非CAD之间差异无统计学意义。结论 Leptin、SFRP5表达水平的变化可能是CAD发生、发展的机制之一，可以作为预防、评估和治疗CAD的一个新靶点。

冠状动脉粥样硬化性心脏病；脂肪细胞分泌因子；瘦素；分泌型卷曲相关蛋白5

脂肪细胞不仅能够储存能量，而且能够合成和分泌多种细胞因子，这些细胞因子统称为脂肪细胞分泌因子，包括瘦素（Leptin）、脂联素、抵抗素、内膜素等。既往研究［1-4］表明，脂肪细胞分泌因子与代谢紊乱或动脉粥样硬化（atherosclerotic，AS）相关。分泌型卷曲相关蛋白5（secreted frizzled-related protein 5，SFRP5）、视黄醇结合单核蛋白4（retinol binding protein，RBP4）和Leptin均为脂肪细胞分泌因子，但SFRP5、RBP4和Leptin与中国冠状动脉粥样硬化性心脏病（coronary atherosclerotic heart disease，CAD）患者的相关性目前尚较少研究。该研究拟选取CAD患者血清标本，检测SFRP5、RBP4和Leptin的表达水平，并分析其与CAD的相关性，旨在为CAD的发病机制和临床治疗提供依据。

1 材料与方法

1.1 病例资料 收集2014年5月～2015年5月在广州军区广州总医院心脏中心71例行冠状动脉造影患者（年龄39～80岁）的临床资料，排除既往有冠脉干预手段或冠脉旁路移植手术。此外，慢性透析、急性冠脉综合征、近期心肌梗死（4周内）、炎性疾病如胶原性疾病、严重感染性疾病和恶性疾病等也排除。根据患者临床表现、心电图及冠状动脉造影等临床症状把受试者分成两组：心电图检查结果阳性、冠状动脉计算机断层成像血管造影主要血管狭窄≥50%者为病例组（CAD组）（53例）；对照组（非CAD组）为冠状动脉造影/冠状动脉计算机断层成像血管造影的检查结果为无病变或轻微病变者（18例）。

1.2 冠脉造影的评分 冠脉造影结果由至少两位高年资心内科医师评估并报告。使用两套评估标准：①根据左主干、左前降支、左回旋支、右冠狭窄≥50%的病变血管的数目得分为0～3，若左主干狭窄≥50%，记录为多支血管病变；②Gensini评分：首先根据冠脉狭窄程度确定基本评分，狭窄ø＜25%记1分，≥25%～＜50%记2分，≥50%～＜75%记4分，≥75%～＜90%记8分，≥90%～＜99%记16分，99%～100%记32分，再根据不同冠脉分支确定相应的系数，分别为：左主干（LM）病变×5；左前降支（LAD）：近段×2.5，中段×1.5，远段×1；对角支：D1×1，D2×0.5；左回旋支（LCX）：近段×2.5，钝缘支×1，远段×1，后降支×1，后侧支× 0.5；右冠状动脉（RCA）：近、中、远和后降支均×1，每处病变的积分为狭窄程度乘以病变部位系数。

1.3 ELISA法 采集患者清晨空腹静脉血4 ml，离心取上清液以Eppendorf管分装为4管，置-80℃超低温冰箱中保存待测，该研究中SFRP5、RBP4、Leptin试剂盒均购自美国RayBio公司，并严格按照试剂盒说明书进行操作，

1.4 统计学处理 采用SPSS 20.0软件进行分析，计量资料以±s表示，两组之间差异比较使用t检验或Manne Whitney U检验。计数资料用频率表示，组间比较使用χ2检验；采用单因素或者多因素logistic回归分析评价各变量与合并CAD之间的相关性。

2 结果

2.1 两组基线资料比较 CAD组和非CAD组在年龄、性别、高血压、血脂异常、糖尿病、吸烟状态、药物等差异均无统计学意义（表1）。CAD组血清SFRP5的水平低于非CAD组；CAD组Leptin水平高于非CAD组；两组间RBP4水平差异无统计学意义（表1）。多支血管病变［37例，（23.3±14.8）ng/ ml］中SFRP5水平明显低于单支血管病变［16例，（30.6±17.7）ng/ml］，Leptin水平在多支血管病变中明显高于单支血管病变［（27.6±13.7）pg/ml vs（18.8±10.1）pg/ml］，RBP4水平与血管病变数量无显著相关性（P＞0.05）。Gensini积分可反映CAD的严重程度，与血清SFRP5水平呈负相关性，与Leptin呈正相关性（r=-0.20，P=0.01；r= 0.26，P＜0.01）。

2.2 疾病状态或使用药物状态下的SFRP5、RBP4、Leptin水平 血清SFRP5水平在年龄、高血压、糖尿病、血脂异常、吸烟史等差异没有统计学意义，但在性别间差异有统计学意义，男性SFRP5水平低于女性（t=2.775，P＜0.05）；血清Leptin水平在年龄＞65岁组中高于年龄≤65岁组，差异有统计学意义（t=-2.532，P=0.02），Leptin水平在性别间差异也有统计学意义，女性Leptin水平高于男性（t=2.087，P=0.01），在高血压、糖尿病、血脂异常、吸烟和使用药物方面差异没有统计学意义（表2）；血清RBP4水平在年龄、性别、高血压、糖尿病、血脂异常和药物方面差异均无统计学意义。见表2。

2.3 相关危险因素的Logistics回归分析 低血清SFRP5、高血清Leptin水平均是CAD的独立危险因子（P＜0.05），见表3。在使用药物方面，血清SFRP5水平和使用利尿剂相关，差异有统计学意义（P=0.03），但与血管紧张素转换酶抑制剂/血管紧张素受体阻断剂（ACEI/ARBS）、胰岛素或他汀类降脂等药物差异无统计学意义。

3 讨论

3.1 Leptin与CAD的关系 既往实验研究［5-6］显示，抑制Leptin表达能够抑制小鼠动脉粥样硬化的发展，而促进Leptin表达则增加小鼠动脉粥样硬化的几率。本研究显示CAD患者的Leptin水平高于非CAD患者，表明Leptin水平升高与CAD相关。此外，Leptin水平在多支血管病变中的水平高于单支血管病变，表明Leptin水平一定程度上反映了CAD的严重程度，其水平升高促进了CAD的发生发展。本研究显示，Leptin水平在男、女间存在显著差异，女性Leptin水平高于男性，表明女性可能比男性有更高的CAD发生风险。但先前的研究［7］表明，Leptin的浓度与性别不存在相关关系。因此，Leptin与性别之间是否存在相关性，仍需进一步大样本量研究。

表1 CAD组和非CAD组基线资料比较

表2 冠脉造影时的疾病状态或药物下的SFRP5、RBP4、Leptin水平±s）

表2 冠脉造影时的疾病状态或药物下的SFRP5、RBP4、Leptin水平±s）

*P＜0.05

项目SFRP5（ng/ml）是否t值RBP4（mg/ml）是否t值Leptin（pg/ml）是否t值年龄（＞65岁）29.4±18.024.9±14.2-1.36311.4±3.211.5±3.10.93425.4±13.717.5±11.1-2.532*男性23.8±13.436.5±19.72.775*11.2±2.912.6±3.51.59818.3±12.127.9±11.92.087*高血压25.0±14.129.3±18.20.86511.6±3.311.2±2.6-0.41121.8±12.617.3±12.3-1.643糖尿病24.8±15.226.9±15.90.51611.7±2.711.4±3.2-0.37423.4±13.219.6±12.5-1.229血脂异常20.5±12.127.6±16.10.97511.2±3.911.5±2.90.34920.3±13.420.3±12.60.165吸烟史23.7±12.830.7±18.71.99811.3±3.011.7±3.30.49017.9±11.424.0±13.71.916 ACEI/ARBs23.7±14.825.1±15.30.94711.8±2.511.6±3.0-0.04318.7±11.221.9±12.5-1.087他汀类26.1±15.325.0±12.31.06311.1±3.311.3±2.6-0.24222.5±12.624.2±11.3-0.245利尿药29.8±16.521.5±14.21.51711.5±2.812.0±3.1-0.24720.6±12.718.2±11.2-1.097

表3 与CAD相关危险因素的Logistics回归分析

3.2 SFRP5与CAD的关系 Bhatt et al［8］发现在小鼠和人的动脉粥样硬化斑块中均检测到Wnt5a高表达。SFRP5-2005年研究者利用基因芯片鉴定出的一种新的脂肪细胞分泌因子，动物实验研究［9-10］表明，SFRP5可通过抑制Wnt5a阻断巨噬细胞或脂肪细胞产生炎症介质。此外，本研究显示，SFRP5水平与CAD病变严重程度呈负相关性，CAD患者血清SFRP5水平低于非CAD患者，多支血管病变的血浆SFRP5水平低于单支血管病变。Miyoshi et al［11］检测185例受试者（128例CAD、57例非CAD）的SFRP5水平，发现CAD组血清SFRP5水平高于非CAD组，而且血清SFRP5水平和超敏C反应蛋白（hs-CRP）水平呈负相关性，这支持SFRP5有抗炎作用，本研究与既往研究结果相符，本研究显示SFRP5水平在性别间差异有统计学意义，男性血清SFRP5水平低于女性（P＜0.01），但既往研究［11］显示男、女差异无统计学意义。尽管SFRP5水平可能会被肥胖影响，但在本研究中，CAD组和非CAD组的体质指数之间差异无统计学意义，多因素Logistics回归分析表明血清SFRP5水平和CAD独立相关。此外，本研究显示SFRP5水平和药物之间的关系，使用利尿剂可能会增加SFRP5水平，但其影响机制尚未完全清楚。

3.3 RBP4与CAD的关系 既往研究［12-13］表明，RBP4可能通过干扰糖、脂质代谢，从而促进炎症的发生，并在进一步的研究中证实，RBP4水平升高可能和胰岛素抵抗、肥胖、动脉粥样硬化相关。但关于RBP4在颈动脉和冠状动脉粥样硬化中的作用仍无明确结论［14-15］。本研究显示RBP4水平在CAD组和非CAD组间差异无统计学意义，说明RBP4水平的变化与CAD的发生、发展无关。此外，RBP4水平与CAD的其它危险因素如吸烟、血脂异常等差异也无统计学意义，表明RBP4不影响CAD危险因子的作用。

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Correlation analysis between serum Leptin，
SFRP5 and RBP4 levels and coronary heart disease

Li Yaoyao1，2，Dong Wenpeng2，Lu Hua2，et al
（1Faculty of Graduate Studies，Southern Medical University，Guangzhou 510515；2Dept of Cardiovascular Surgery，General Hospital of Guangzhou Military Command，Guangzhou 510010）

Objective To investigate the relationship between serum Leptin，SFRP5 and RBP4 expression levels and coronary atherosclerotic heart disease（CAD）.Methods 71 patients suspected for CAD were included in the study and were divided into CAD and non-CAD group according to electrocardiogram and coronary angiography results.Serum Leptin，SFRP5 and RBP4 levels were examined using ELISA.Correlations of Leptin，SFRP5 and RBP4 expression levels and patients dermography such as CAD were analysed.Results Serum SFRP5 level in CAD group was significantly lower than in non-CAD group（P＜0.05）.Serum SFRP5 level was negatively correlated with Gensini score（r=-0.20，P=0.01）.In CAD group，serum Leptin level increased significantly compared with non-CAD group（P＜0.05）.There was no significant difference for serum RBP4 levels between CAD and non-CAD group.Conclusion The expression levels of Leptin，SFRP5 may be one of the mechanisms of initiation，development of CAD，which can be used as a new target for the prevention，assessment and treatment of CAD.

coronary artery disease；adipokines；Leptin；secreted frizzled-related protein 5

R 541.4

A

1000-1492（2016）08-1160-04

时间：2016-6-22 14：44：58

http：//www.cnki.net/kcms/detail/34.1065.R.20160622.1444.038.html

2016-05-29 接收

国家自然科学基金青年基金项目（编号：81500183、81200633）

1南方医科大学研究生学院，广州 510515

2广州军区广州总医院心血管外科，广州 510000

李瑶瑶，女，硕士研究生；

张卫达，男，主任医师，博士生导师，责任作者，E-mail：18819140974@163.com