马铁伟　聂海涛　张　浩　纪　宇　王　震　邓凯平　王　锋

(南京农业大学,江苏省肉羊产业工程技术中心，南京210095)



杜湖杂交F1代母羊妊娠期能量和蛋白质维持需要量

马铁伟聂海涛张浩纪宇王震邓凯平王锋*

(南京农业大学,江苏省肉羊产业工程技术中心，南京210095)

本研究旨在确定杜泊羊×湖羊(杜湖)杂交F1代母羊妊娠期能量和蛋白质维持需要量，为该杂交组合肉羊饲粮配制提供较为合理的能量和蛋白质需要标准。分为饲养试验、消化代谢试验和呼吸测热试验。选取15只月龄(9月龄)、体重[(43.34±1.37) kg]相近的母羊，经同期发情、自由交配后随机分为自由采食组、70%自由采食量、50%自由采食量组，每组5只母羊。在妊娠期40、100、130 d分别采用全收粪法收集粪尿，同时进行呼吸测热试验，计算得到母羊在不同妊娠时期氮、能量的表观代谢参数，依据消化代谢试验和呼吸测热试验结果分别利用沉积氮和食入氮、产热量的对数和代谢能采食量建立异速回归方程，最终得到该杂交组合在妊娠期40、100、130 d时维持净氮、维持净能、维持代谢能需要量。结果表明：1)氮表观消化率在妊娠40、100、130 d时分别为56.16%～62.24%、60.43%～65.47%、58.79%～62.01%。2)总能表观消化率在妊娠40、100、130 d时分别为51.18%～64.25%、60.86%～66.17%、63.20%～67.36%。3)在母羊妊娠40、100、130 d时维持净氮分别为287.9、301.3、430.7 mg/(kg W0.75·d)；维持净能分别为194.01、244.59、256.08 kJ/(kg W0.75·d)；维持代谢能分别为283.18、412.26、468.56 kJ/(kg W0.75·d)。本研究最终得到了杜湖杂交F1代母羊妊娠期能量、蛋白质需要量指标,包括维持净能、维持代谢能、维持净氮。

妊娠期；杜湖杂交F1代母羊；能量；蛋白质；需要量

营养需要量标准是对动物营养和饲料科学领域科学研究成果的概括和总结，能够高度反映动物在生存和生产等生理活动状态下对营养物质的客观要求[1]。近些年来，我国肉羊产业发展很快，而合理准确的营养需要量标准对肉羊饲养有着十分重要的指导意义。早在20世纪50年代，肉羊产业较为发达的国家就已启动了营养需要量相关研究工作，其中以英国的AFRC[2]、澳大利亚的CSIRO[3-4]和美国的NRC[5-6]为代表的营养需要量评价机构针对各国肉羊生产特点分别制订了营养需要量标准，并多次更新和完善已出台的标准和指标。我国开展羊营养需要量的研究起步比较晚。1988年，杨诗兴等[7]通过试验获得湖羊羔羊吮乳期和育成期，母羊妊娠期、泌乳期以及配种公羊的能量、蛋白质需要量；1993年，张崇玉等[8]研究了青山种公羊能量、蛋白质需要量。但相关羊的营养标准研究与国外和国内其他畜种相比还有差距，而且我国地域辽阔，饲草资源丰富，羊品种繁多，完全套用国外标准缺少科学性和实用性[9]，特别是近些年来，随着我国肉羊产业规模化、集约化饲养模式发展速度不断加快，营养需要量研究领域相对滞后的问题日益凸显。湖羊主要分布于江浙等太湖流域，多胎但生长较慢，杜泊羊生长快但繁殖率低。因此，很多地方利用这一杂交组合母羊继续繁殖后代，但是杜泊羊×湖羊(杜湖)杂交母羊妊娠期营养需要量研究尚未见报道。由于缺乏相应的营养指标,只能参照国外的营养标准设计饲粮配方,从而可能会引起营养供给不足影响胎儿发育，或者过剩造成饲料资源浪费等问题[10]。本研究旨在研究确定杜湖杂交F1代母羊妊娠期的能量、蛋白质需要量，为我国肉用绵羊营养需要量参数的准确测定和饲养标准的合理制订提供基础数据。

1　材料与方法

1.1试验动物

选取健康9月龄杜湖杂交F1代母羊15只，体重(43.34±1.37) kg。

1.2试验饲粮

试验期间饲喂全混合颗粒饲料，参考NRC(2007)体成熟为0.7的妊娠母羊妊娠单羔和妊娠双羔在前期和后期营养需要的平均值配制。试验饲粮组成及营养水平见表1。

表1　试验饲粮组成及营养水平(风干基础)

1)预混料为每千克饲粮提供The premix provided the following per kg of diets：FeSO4·H2O 120 mg，MnSO4·H2O 190 mg，ZnSO4·H2O 190 mg，CuSO480 mg，Se 0.05 mg，Co 0.25 mg，I 2.5 mg，复合维生素 compound vitamin 0.2 g，2%莫能霉素 2% monensin 0.15 g，微生物制剂 microbial preparation 0.25 g。

2)代谢能为计算值，其余为实测值。ME was a calculated value and others were measured values.

1.3试验仪器及设备

羊用代谢笼、呼吸测热室、INNOVA-1412气体分析仪、FW-100饲料粉碎机、电子称、10%硫酸、自封袋、塑料桶、FOSS全自动凯氏定氮仪、TYHW-V汉显全自动量热仪。

1.4饲养管理

将选取的15只妊娠母羊，随机分为自由采食(Ad)组、70%自由采食(70%Ad)组、50%自由采食(50%Ad)组，每组5只羊，单栏饲养。每天08:00、16:00饲喂，自由饮水。每天早晨饲喂前清除Ad组食槽的剩料并称重，饲喂量根据前1天羊只的采食量进行调整，确保食槽内剩料在10%左右，根据Ad组的采食量，确定另外2个限饲组的饲喂量。

1.5消化代谢试验

将3组的15只妊娠羊分别在妊娠期40、100、130 d转至消化代谢笼进行消化代谢试验，每次消化代谢试验均设置7 d的预试期，10 d的正试期。每天记录并收集每只羊的饲喂量和剩料量。采用全收粪法收集粪尿，准确称量，每只羊取每天排粪量的10%，随后将10 d的样品混合均匀。用盛有100 mL 10% H2SO4的容器收集尿液，滤网除去杂质后用1 L量筒准确称量体积，每只羊取30 mL尿样，随后将10 d的样品混合均匀。样品收集好后放入-20 ℃冰箱中冷冻保存，以备测定。

1.6呼吸测热试验

呼吸测热试验与消化代谢试验同时进行，采用开路式呼吸系统测定气体排出量，包括甲烷、二氧化碳、一氧化碳、氨气等。在消化代谢试验的第1、3、5、7、9天将试验羊分别放入3个呼吸测热室内，每批3只羊，每组1只羊，试验羊只可以自由采食及饮水。在呼吸测热室适应1 d后，测定第2天气体排放量。羊只在进入和离开呼吸测热室时分别进行称重，2数值的平均值作为气体代谢试验的测热体重[11]。

1.7能量计算和测定方法

尿能测定用定量滤纸测定能值[12]；食入碳、粪碳：Vario EL Ⅲ元素分析仪测定，尿碳：取样0.5 mL尿液干燥后进行碳元素测定，换算为尿碳日排出量。

甲烷能(MJ/d)=甲烷日排出量(L/d)×39.54[13]；

二氧化碳碳(kg/d)=二氧化碳

日排出量(L/d)×19.6×0.273；

甲烷碳(kg/d)=甲烷日排出量(L/d)×

0.75×0.717[14]。

1.8能量和蛋白质需要量计算方法

1.8.1碳氮平衡法

动物机体主要以脂肪和蛋白质的形式沉积能量[15]。蛋白质与脂肪以碳和氮为特征，借助碳氮2种元素的食入和排出，掌握其在动物机体内的沉积和运用。通过消化代谢试验和呼吸测热试验相结合，计算出动物机体在试验期间的采食和排出的碳氮，从而计算动物机体蛋白质和脂肪的沉积量。计算方法如图1[16]所示。

图1　妊娠母羊蛋白质和脂肪沉积能量计算

1.8.2维持净氮需要量的计算

根据消化代谢试验，建立沉积氮与食入氮之间的线性回归关系：

RN=a+b×NI。

式中：RN为沉积氮；NI为食入氮；截距a即为维持净氮需要量(内源氮损失，即内源尿氮+代谢粪氮)，所得结果乘以6.25即为维持净蛋白质需要量[17]。

1.8.3维持净能需要量的计算

产热量的数值用代谢能采食量与能量沉积的差值计算得到。根据消化代谢试验和气体代谢试验，建立产热量的对数与代谢能采食量之间的线性回归关系：

lgHP=a+b×MEI。

式中：HP为产热量；MEI为代谢能采食量。当MEI=0时，HP的值即为母羊维持净能需要量。通过上述公式进行迭代运算，当HP=MEI时，MEI的值即为母羊维持代谢能需要量[18]。

1.9数据处理与统计分析

利用Excel进行初步数据统计和SPSS 19.0对试验数据进行单因素方差分析，并采用Duncan氏法进行多重比较，试验结果用平均值±标准误表示。

2　结果与分析

2.1妊娠母羊氮代谢

表2为不同饲养水平的母羊分别在妊娠40、100、130 d时氮的消化代谢变化情况。3组试验羊的食入氮、粪氮差异极显著(P<0.01)，并随着饲喂水平的降低而降低；随着饲喂量水平的降低，尿氮、吸收氮均降低，其中妊娠40 d，Ad组试验羊显

著高于70%Ad组和50%Ad组(P<0.05)，但限饲组间差异不显著(P>0.05)，妊娠100 d 3组试验羊间均差异显著(P<0.05)，妊娠130 d，Ad组显著高于70%Ad组、50%Ad组(P<0.05)；妊娠40 d，3组试验羊的氮表观消化率随着饲喂水平的降低而显著上升(P<0.05)；在妊娠100、130 d，沉积氮/食入氮、沉积氮/吸收氮随着饲喂水平的降低而降低，3组间差异不显著(P>0.05)；妊娠40、100、130 d氮表观消化率分别为56.16%～62.24%、60.43%～65.47%、58.79%～62.01%。

表2　不同饲喂水平对妊娠母羊氮代谢的影响

同行数据肩标无字母或相同小写字母表示差异不显著(P>0.05)，不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)。下表同。

In the same row, values with no letter or the same small letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05), and with different capital letter superscripts mean significant difference (P<0.01). The same as below.

2.2妊娠母羊维持净氮需要量

表3表示妊娠母羊在40、100、130 d食入氮和沉积氮的关系。母羊在妊娠40、100、130 d时维持净氮需要量分别为287.9、301.3、430.7 mg/(kg W0.75·d)，换算后最终得到其维持净蛋白质需要量分别为1.799、1.883、2.692 g/(kg W0.75·d)。

表3　妊娠母羊维持净氮需要量预测方程

2.3妊娠母羊能量消化代谢

表4为不同饲喂水平的母羊分别在妊娠40、100、130 d的能量消化代谢变化情况。食入总能、粪能、尿能、甲烷能、消化能随着饲喂水平的降低而降低，3组间在40、100、130 d食入总能和粪能间差异极显著(P<0.01)，Ad组尿能显著高于70%Ad组和50%Ad组(P<0.05)；总能表观消化率随着饲喂水平的降低有升高的趋势，妊娠40、100、130 d总能表观消化率分别为51.18%～64.25%、60.86%～66.17%、63.20%～67.36%。

表4　不同饲喂水平对妊娠母羊能量代谢的影响

表5为不同饲喂水平的母羊分别在妊娠40、100、130 d的碳消化代谢变化情况。食入碳、粪碳、二氧化碳碳均随着饲喂水平的降低而降低，3组试验羊间上述指标差异显著(P<0.05)；随着饲喂水平的降低，尿碳有所降低，妊娠100、130 d Ad组的尿碳排出量显著高于70%AD组与50%AD组(P<0.05)，2个限饲组间差异不显著(P>0.05)；在妊娠40、100 d，沉积碳随着饲喂水平的降低而降低，其中Ad组最高，50%Ad组最低。碳表观消化率随着饲喂水平的降低而升高，3组间差异显著或极显著(P<0.05或P<0.01)，妊娠40、100、130 d碳表观消化率分别为54.01%～58.26%、50.96%～71.61%、56.94%～75.06%。

2.4妊娠母羊维持能量需要量

表6为妊娠期母羊分别在40、100、130 d维持净能需要量预测方程。表7为妊娠期母羊分别在40、100、130 d维持净能需要量、维持代谢能需要量、代谢能维持利用效率。

表6　妊娠母羊维持净能需要量预测方程

表7　妊娠母羊能量需要量

3　讨　论

3.1不同饲喂水平对妊娠母羊氮代谢的影响

饲粮中蛋白质水平可以通过动物机体对氮的消化吸收得到直观的认识。因此，常用氮代谢作为研究蛋白质需要的基础。彭津津等[19]采用不同饲喂水平对无角道赛特羊×小尾寒羊(道寒)杂交F2代氮平衡影响的研究表明，粪氮、尿氮、吸收氮、沉积氮随采食氮的增加而增加。Ludden等[20]报道，随着饲粮粗蛋白质水平(13%～17%)的升高，羔羊的尿氮和沉积氮均显著上升。刘海斌等[21]认为食入氮、尿氮、可消化氮等指标均与饲粮中蛋白质水平呈正相关。本研究中，母羊粪氮、尿氮、沉积氮等指标与采食量水平呈正相关，与上述报道结果一致。本研究结果显示试验羊的粪氮、尿氮、吸收氮及沉积氮随着蛋白质摄入量的降低而降低，出现上述现象的原因很可能是由于营养限饲组试验羊蛋白质摄入量并不能满足母体及胚胎生长发育所需，从而引起氨基酸不平衡，食入氮只有满足母体自身生命活动所需，多余的蛋白质才会在机体内沉积。氮消化率随着限饲水平的升高而升高，70%Ad组和50%Ad组氮消化率均高于Ad组,引起上述变化可能是由于采食量水平的降低，加速了瘤胃的排空速度，食糜在瘤胃内停留的时间减短，与瘤胃微生物及消化酶的作用时间也随之减短，导致饲料资源在动物体内的消化率降低。本研究还发现营养限饲和妊娠影响氮的代谢，随着饲喂水平的降低，粪氮、尿氮有所减少，但是沉积氮在妊娠40、130 d时3组间差异不显著，妊娠母羊具有较强储存营养物质能力，通过调控内源氮周转机制，可以一定程度调整氮的消化及代谢，减少粪氮和尿氮排放量，有利于机体氮的沉积。

3.2妊娠母羊维持净氮需要量

母羊妊娠期蛋白质的供给既要满足妊娠产物生长发育所需，也要为母体自身泌乳做准备，过低或过高的蛋白质水平都会降低母羊的繁殖性能。国内有不少关于妊娠期蛋白质需要量的报道。潘军等[22]根据蛋白质需要量计算公式，制订出内蒙古细毛羊妊娠后期营养标准，即体重在40～70 kg，日增重在172 g情况下，蛋白质需要量为145.92～225.72 g/(d·只)；高艳霞[23]研究小尾寒羊妊娠前期和妊娠后期瘤胃降解蛋白质和非降解蛋白质每日适宜量分别为5.93、1.88 g/kg W0.75和5.55、2.37 g/kg W0.75；赵广永等[24]利用多种方法求平均值得到妊娠期青山羊维持粗蛋白质需要量为4.62 g/kg W0.75，换算为可消化粗蛋白质其推荐值为3.53 g/kg W0.75。本研究根据消化代谢试验，利用食入氮和沉积氮之间建立线性回归关系，推算得出妊娠40、100、130 d维持净氮需要量分别为287.9、301.3、430.7 mg/(kg W0.75·d)。AFRC[2]推荐妊娠母羊维持净氮需要量为350 mg/(kg W0.75·d)，该值在本研究结果的范围之内。王鹏[25]报道了道寒杂交公羔20～35 kg生长期维持净氮需要量为270.5 mg/(kg W0.75·d)，本研究结果[287.9～430.7 mg/(kg W0.75·d)]高于其研究值，可能由于品种、性别、妊娠等因素导致。聂海涛等[26]通过比较屠宰法得到4～6月龄杜湖杂交F1代母羔维持净氮需要量为261 mg/(kg W0.75·d)，本研究结果高于其研究值，造成差异的原因是母羊妊娠使得乳腺不断发育和胎儿快速增长，动物体内的营养物质周转加快，蛋白质维持需要量不断提高。楼灿等[27]研究杜泊羊×小尾寒羊(杜寒)杂交母羊妊娠期40、100、130 d维持净氮需要量分别为303.7、323.4、496.2 mg/(kg W0.75·d)，与本研究妊娠40、100 d结果相近；张少丰[28]研究萨福克羊×阿勒泰羊(萨阿)杂交母羊妊娠期维持净氮需要量为415～733 mg/(kg W0.75·d)，高于本研究结果，可能是由于杂交品种不同特性造成的差异；杨维仁等[29]根据蛋白质采食量(Y)和蛋白质沉积量(X)建立回归关系：Y=0.98X+3.46(r=0.90，P<0.01)，得到蛋白质维持需要量为3.46 g/kg W0.75，比本研究妊娠后期的蛋白质维持需要量高21%，造成差异一方面可能由于品种及选育年龄差异导致，另一方面可能由于环境因素(温度和活动范围)的影响，羊只活动量减少，造成维持需要一定程度的降低。维持净氮需要量随妊娠期延长而不断增加，因此妊娠期饲粮的配制将随着妊娠阶段的不同而进行适时调整，进而促进繁殖母羊生产性能的提高。

3.3妊娠母羊维持代谢能需要量

维持代谢能需要量是动物机体沉积能为零时所需要饲粮供给的代谢能量。由于动物品种、试验方法、试验环境等因素，维持代谢能需要量也有所不同。反刍动物妊娠期维持代谢能需要量研究在国内外都取得了很大的进展。Modyanov[30]测定了母羊不同妊娠时期的维持代谢能需要量，发现妊娠前期能量代谢的强度与空怀期母羊并无差别。Rattray等[31]研究了空怀母羊维持代谢能需要量为404.59～520.49 kJ/(kg W0.75·d)。本研究中，妊娠40、100、130 d维持代谢能需要量分别为283.18、412.26、468.56 kJ/(kg W0.75·d)，结果表明随妊娠期延长，妊娠强度不断增加，所需维持代谢能不断提高。杨诗兴[32]对中温区空怀母羊的能量代谢进行研究，测得维持代谢能需要量为273 kJ/(kg W0.75·d)，与本研究妊娠40 d结果接近，这也印证了妊娠前期、空怀期母羊的代谢强度并没有显著差别。楼灿[33]采用碳平衡法测得杜寒杂交母羊妊娠40、100、130 d维持代谢能需要量分别为331.61、427.07、498.16 kJ/(kg W0.75·d)，稍高于本研究结果，可能是品种和年龄造成的差异。杨在宾等[34]系统研究了青山羊妊娠前期、妊娠后期维持代谢能需要量分别为408.47、480.70 kJ/(kg W0.75·d)。柴巍中[35]通过呼吸面具测热法结合消化代谢试验研究了湖羊妊娠0～60 d、61～90 d、91～120 d、121～147 d维持代谢能需要量分别为432.58、437.52、461.70、458.40 kJ/(kg W0.75·d)，本研究结果妊娠前期维持代谢能需要量低于上述研究报道，后期与其接近，造成差异原因可能是所处环境与杂交品种特异性，造成维持代谢能在妊娠早期偏低。

3.4妊娠母羊维持净能需要量和维持代谢能效率

维持净能需要量是动物进行一切生命活动的基础代谢。本研究中，杜湖杂交F1代母羊在妊娠期40、100、130 d维持净能需要量分别为194.01、244.59、256.08 kJ/(kg W0.75·d)。结果表明随着妊娠期延长，维持净能需要量逐渐增加，这可能是由于妊娠强度的不断增大使动物机体需要更多的能量来满足机体的基础代谢。代谢能维持利用效率(维持净能需要量/维持代谢能需要量)表示代谢能的维持利用效率，且受品种、生理状态、环境、研究方法等因素影响。本研究中，在妊娠40、100、130 d代谢能维持利用效率为别为0.685、0.593、0.547，表明随着妊娠期延长，代谢能维持利用效率逐渐降低，这可能和胎儿在妊娠后期的快速发育以及母体自身的营养储备有关，造成代谢能转化净能效率降低。本研究同样采用碳氮平衡法，比楼灿[33]以杜寒杂交羊为研究对象所得到的妊娠40、100、130 d的数值(0.619、0.577、0.527)分别高出10.66%、2.77%、3.79%，排除方法学的影响，这些差异极可能是由于品种、胎数以及饲养环境不同所引起。

4　结　论

① 不同饲喂水平影响杜湖杂交F1代母羊妊娠期营养物质消化率，随着饲喂水平的降低，碳、氮、总能表观消化率逐渐升高。

② 杜湖杂交F1代母羊妊娠40、100、130 d维持净蛋白质分别为1.799、1.883、2.692 g/(kg W0.75·d)。

③ 杜湖杂交F1代母羊在妊娠40、100、130 d维持净能需要量分别为194.01、244.59、252.55 kJ/(kg W0.75·d)；维持代谢能需要量分别为283.18、412.26、468.56 kJ/(kg W0.75·d)。

致谢：

感谢中国农业科学院饲料研究所楼灿硕士在试验思路及设计上的悉心指导。

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*Corresponding author, professor, E-mail: caeet@njau.edu.cn

(责任编辑王智航)

Energy and Protein Requirements for Maintenance of Doper Sheep andHuSheep Hybrid F1 Ewes during Pregnancy

MA TieweiNIE HaitaoZHANG HaoJI YuWANG ZhenDENG KaipingWANG Feng*

(Nanjing Agricultural University, Jiangsu Engineering Technology Research Center of Mutton Sheep & Goat Industry,Nanjing 210095, China)

The aim of this study was to determine the energy and protein requirements for maintenance of Dorper andHuhybrid F1 ewes during pregnancy and to provide data for formulating diet for the mutton sheep. The experiment consisted of feeding experiment, digestion metabolism experiment and respirometary experiment. Fifteen sheep with body weight of (43.34±1.37) kg at the age of nine months were used. After the treatments of synchronization of estrus and free mating, the sheep were assigned randomly into three groups with five ewes in each group, which were ad libitum (Ad) group, 70% Ad group and 50% Ad group. Feces and urine were collected using total feces collection method on 40, 100 and 130 days of pregnancy; meanwhile, respirometary experiment was conducted, and metabolic parameters of nitrogen and energy at different periods of pregnancy were calculated; finally the requirements of net nitrogen, net energy and metabolic energy for maintenance of the cross combination during pregnancy were calculated by establishing the allometric regressions respectively between nitrogen intake and nitrogen retention, the logarithm of heat production and metabolizable energy intake according to the results of digestion metabolism experiment and respirometary experiment. The results showed as follows: 1) the apparent digestibility of nitrogen on 40, 100 and 130 days of pregnancy were 56.16% to 62.24%, 60.43% to 65.47% and 58.79% to 62.01%, respectively. 2) The apparent digestibility of gross energy on 40, 100 and 130 days of pregnancy were 51.18% to 64.25%, 60.86% to 66.17%, and 63.20%～67.36%, respectively. 3) Requirements of net nitrogen, net energy and metabolic energy for maintenance of this breed on 40, 100 and 130 days of pregnancy were 287.9, 301.3 and 430.7 mg/(kg W0.75·d), 194.01, 244.59 and 256.08 kJ/(kg W0.75·d), and 283.18, 412.26 and 468.56 kJ/(kg W0.75·d), respectively. The research defines the energy and protein requirement parameters for Dorper sheep andHusheep hybrid F1 ewes during pregnancy, including net energy, metabolizable energy and net nitrogen for maintenance.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2016, 28(9)：2943-2952]

pregnant period; Dorper sheep andHusheep hybrid F1 ewe; energy; protein; requirement

10.3969/j.issn.1006-267x.2016.09.034

2016-03-01

国家现代肉羊产业体系项目(CARS-39)

马铁伟(1990—)，河北廊坊人，男，硕士研究生，从事反刍动物营养研究。E-mail： 641900119@qq.com

王锋，教授，博士生导师，E-mail： caeet@njau.edu.cn

S826

A

1006-267X(2016)09-2943-10