马羚+周兵冰+马逾英+蒋运斌

[摘要]目的探讨武当玉兰（砧木）+望春花（接穗）嫁接辛夷的抗炎镇痛药理活性。方法观察嫁接辛夷与武当玉兰（砧木）、望春花（接穗）对二甲苯致小鼠耳廓肿胀及醋酸致小鼠扭体的影响。结果（1）抗炎试验：望春花具有明显的抗炎作用，武当玉兰+望春花嫁接品种显示出了一定的抗炎趋势，而武当玉兰则未表现出抗炎作用。（2）镇痛试验：三种辛夷均显示出镇痛作用，其镇痛作用的强度依次为望春花>嫁接品种>武当玉兰。结论武当玉兰（砧木）+望春花（接穗）辛夷显示了一定的抗炎镇痛效果，其作用强度优于武当玉兰，为其临床应用及川辛夷基地品质改良提供实验依据。

[关键词]武当玉兰；望春花；嫁接；抗炎；镇痛

辛夷（magnoliae flos）是一种常用中药，具散风寒、通鼻窍等功效。用于风寒头痛、鼻塞、鼻渊、鼻流浊等症，为治疗鼻疾之要药。辛夷除供药用外，尚出口作为高级香料的生产原料。市场需求量大。《中国药典》2015版记载辛夷的来源为木兰科植物望春花Magnolia biondii Pamp、玉兰M、denudate Desr.、武当玉兰M.sprengeri Pamp.的干燥花蕾。四川北川县的川辛夷基地，为品种改良以武当玉兰为砧木，嫁接望春花的枝条，栽培出了嫁接品种。其嫁接品种能否等同辛夷入药亟待研究。根据现有报道本实验选取镇痛、抗炎药理作用着重探讨嫁接品种、望春花、武当玉兰的药理作用强弱程度及差异，为嫁接品种的临床应用提供实验依据。

1材料与方法

1.1材料来源

药材样品来源见表1，并均经成都中医药大学马逾英教授鉴定。

1.2药物制备

照《中国药典》2015年版一部挥发油测定法甲法（附录XD）提取挥发油。分别称取三种辛夷药材各75g，加10倍量的蒸馏水浸泡1h，加热至沸，并保持微沸1.5h，停止加热，放置片刻，收集挥发油；另滤过收集水提液，药渣再加8倍量水，煎煮两次，每次30min，合并3次水煎液，减压浓缩至300mL，即得水提液。见表2。

分别于水提液中加入挥发油，以相当于挥发油体积40%的吐温80助溶，混匀，备用。（样品液每1mL含0.25g原生药材）。

1.3阳性药物

贝诺酯片（扑炎痛，地奥集团成都药业股份有限公司，060215）。二甲苯（分析纯，成都科龙化工试剂厂）、醋酸（分析纯，成都科龙化工试剂厂）。

1.4动物

昆明种小鼠，全雄，160只，川实动管第11号。

1.5二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验

取健康雄性小鼠80只，按照体重随机分为8组，分别为空白对照组，阳性药对照组，嫁接品种高、低剂量组（5g/kg、2.5g/kg），武当玉兰高、低剂量组（5g/kg、2.5g/kg），望春花高、低剂量组（5g/kg、2.5g/kg）；每组动物按0.2mL/10g体重连续灌胃给药5d，空白对照组给予等体积蒸馏水，每日一次，末次给药前禁食18h，末次给药30min后，将20μL二甲苯涂于小鼠左耳廓两面致炎，右耳不涂为对照，致炎4h后脱颈处死小鼠，用直径12mm的打孔器取下左右耳片精密称量，右耳与左耳质量之差即为肿胀度。计算肿胀抑制百分率。计算公式：

1.6醋酸扭体法试验

取健康雄性小鼠80只，按体重随机分为8组，组别同上。每组动物按0.2mL/10g体重连续灌胃给药7d，空白对照组给予等体积蒸馏水，每日一次，末次给药前禁食18h，末次给药30min后，每只鼠腹腔注射0.6%醋酸溶液0.2mL，记录随后30min内小鼠扭体次数，计算各药抑制率。计算公式：

1.7统计学处理

采用统计软件SPSS16.0，各组数据均以（x±s）表示，进行方差齐性检验，方差齐性用单因素方差分析中的LSD法进行组间比较；方差不齐性用单因素方差分析中的Tamhane'sT2法进行组间比较。P<0.05为差异具有统计学意义。

2结果

2.1对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响

望春花高低剂量组对二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀均有显著的抑制作用（P<0.05），高剂量组的活性最强抑制率为25%；武当玉兰+望春花辛夷组与空白组比较无显著性差异，但显示出了一定的抑制趋势抑制率为15%。从组间比较看，武当玉兰与望春花比较有显著性差异（P<0.05），表明武当玉兰未显示出抗炎药理作用，见表3。

2.2对醋酸所致小鼠疼痛的影响

望春花的高剂量组、嫁接品种高、低剂量组、武当玉兰高剂量组均能够减少醋酸所致小鼠扭体次数，与空白对照组比较差异有统计学意义（P<0.05）。以望春花的高剂量组为最高抑制率为52%。其次是嫁接品种的抑制率为45%。其作用强度依次为望春花>嫁接品种>武当玉兰，见表4。

3讨论

本实验结果显示，在抗炎试验中，与空白对照组比较，仅望春花对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的抑制作用有统计学意义（P<0.05），组间比较看，望春花与武当玉兰低剂量组有显著性差异（P<0.05）。镇痛试验中，与空白对照组比较，除武当玉兰低剂量组、望春花低剂量组对醋酸致小鼠疼痛的影响无统计学意义外，其余各组有显著的镇痛作用（P<0.05）。望春花的抗炎作用有统计学意义，嫁接品种有抗炎趋势，而武当玉兰几无抗炎作用，可能与挥发油的含量有关；在镇痛试验中，三种辛夷都有镇痛的药理作用，以望春花和武当玉兰+望春花辛夷为好，其次是武当玉兰。

辛夷不仅是大宗常用中药，也具有较高的经济价值，现在改进栽培技术提高产量的报道较多，但品质评价鲜见报道。四川省北川县是辛夷的种植基地，其主流品种是武当玉兰，为品种改良尝试，培育了嫁接品种。本文根据其功效及现有文献报道，注重探讨了武当玉兰、望春花、嫁接辛夷三者的药效差异。武当玉兰+望春花辛夷其挥发油含量较武当玉兰高了2倍。显示了明显的镇痛作用，也表现出了抗炎药理作用趋势，且作用强度均优于武当玉兰，本试验为其临床应用提供依据，为川辛夷基地的品种改良提供参考。