钱晓琴，林建潮，王社梁（绍兴第二医院，浙江 绍兴　312000）

T细胞亚群检测在恶性肿瘤患者辅助诊断中的价值研究

钱晓琴，林建潮，王社梁
（绍兴第二医院，浙江 绍兴312000）

目的研究恶性肿瘤患者机体细胞免疫功能的状况，为肿瘤治疗提供参考。方法用流式细胞仪分别对消化系统肿瘤（n=130）、血液系统肿瘤（n=88）、肺癌患者（n=108）及健康对照组（n=79）进行外周血T细胞亚群检测，各组间进行比较。结果肺癌、消化系统肿瘤及血液系统肿瘤患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均明显低于健康对照组（P＜0.05），CD8+、NK均明显高于健康对照组（P＜0.05）；各类肿瘤组间比较，血液系统肿瘤组的CD4+、CD8+、CD4+/CD8+与肺癌组和消化系统肿瘤组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论恶性肿瘤患者机体存在免疫抑制，其机体的细胞免疫功能下降，及时检测肿瘤患者机体的T细胞亚群，对临床肿瘤治疗及预后判断有积极的指导意义。

恶性肿瘤；T细胞亚群；NK细胞；流式细胞术

恶性肿瘤患者的机体免疫力较低，而T细胞介导的细胞免疫是肿瘤免疫的主要方面，其数量和功能异常可使肿瘤细胞逃避免疫监视［1］。因此，检测外周血T细胞亚群的数量、比例与功能，可以判断机体的免疫水平，对临床认识疾病的发病机制、观察疾病的发生发展、以及判断疗效及预后有重要意义。本文通过2015年1～12月期间326例恶性肿瘤患者的T细胞亚群检测，对各种恶性肿瘤患者机体的细胞免疫功能水平做一评估。

1　资料与方法

1.1一般资料326例患者均经组织活检或术后病理检测确诊，按国际抗癌联盟（UICC）的TNM分期。其中男209例，女117例，年龄22～92岁，平均（62.8±12.06）岁；其中肺癌108例（Ⅰ～Ⅱ期48例，Ⅲ～Ⅳ期60例），消化系统肿瘤130例（食道癌17例、胃癌42例、胰腺癌29例、结直肠癌42例）（Ⅰ～Ⅱ期58例，Ⅲ～Ⅳ期72例），血液系统肿瘤88例（MDS 27例、白血病28例、恶性淋巴瘤33例）。健康对照组79例，为本院健康体检者，男40例，女39例，年龄23～80岁，平均（51.02±15.96）岁。不同肿瘤组与健康对照组的年龄、性别比较见表1。各组性别比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；与健康对照组比较，肿瘤患者普遍年龄偏高，差异有统计学意义（P＜0.05）。

表1　健康对照组与各系统肿瘤组之间性别、年龄分布情况

1.2仪器与方法使用美国BD公司生产的FACS Calibur流式细胞仪进行CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/ CD8+、NK等T细胞亚群检测，所有试剂均为配套试剂，稀释液是BECKMAN COULTER血球稀释液。方法：（1）取100μL EDTA抗凝的新鲜全血倒入试管；（2）试管中加入10μL标记抗体，混匀；（3）暗处置放15分钟后加10倍稀释的溶血素1000μL，混匀；（4）暗处置放10分钟，800r/min离心5分钟；（5）弃上清液，加2.0mL BECKMAN COULTER血球稀释液，混匀，800r/min离心5分钟；（6）弃上清液，加200μL血球稀释液，混匀；（7）进行流式细胞仪分析。

1.3统计学处理用SPSS 17.0统计学软件分析，两组间比较采用t检验。

2　结果

2.1各系统肿瘤组与健康对照组比较肺癌、消化系统肿瘤及血液系统肿瘤患者CD3+、CD4+、CD4+/ CD8+均明显低于健康对照组（P＜0.05），CD8+、NK均明显高于健康对照组（P＜0.05），见表2。

2.2各系统肿瘤组之间比较血液系统肿瘤组的CD4+、CD8+、CD4+/CD8+与肺癌组和消化系统肿瘤组比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；各组CD3+NK比较，差异无统计学意义（P＞0.05）；肺癌组与消化系统肿瘤组各项比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表2。

表2　健康对照组与各系统肿瘤组之间T细胞亚群比较（±s，%）

表2　健康对照组与各系统肿瘤组之间T细胞亚群比较（±s，%）

与健康对照组比较*P＜0.05；与肺癌组比较▲P＜0.05；与消化系统肿瘤组比较△P＜0.05

组别　n　CD3+　CD4+　CD8+　CD4+/CD8+　NK（%）健康对照组　79　69.00±6.89　44.33±4.98　29.13±5.54　1.59±0.45　15.77±7.09肺癌组　108　62.91±12.25*　34.98±11.10*　38.74±11.55*　1.03±0.56*　23.64±11.78*消化系统肿瘤组　130　65.27±12.39*　34.58±9.69*　37.72±10.75*　1.04±0.52*　24.03±11.56*血液系统肿瘤组　88　64.73±16.26*　28.03±10.16*▲△　43.16±14.63*▲△　0.75±0.41*▲△　22.04±11.96*

3　讨论

肿瘤是由机体自身细胞在机体内外致癌因素（如物理因素、化学因素、病毒等）作用下发生畸变而成的。肿瘤细胞不仅在生物学特征方面与机体正常细胞不同，而且在免疫调节功能方面也与正常细胞有着明显差异。目前，随着医学对肿瘤发生、发展的逐步深入了解，越来越多的免疫检测用于疾病的治疗及预后的判断，使用最多是T细胞亚群的检测。

机体抗肿瘤免疫以细胞免疫为主，而淋巴细胞在机体免疫系统扮演着重要的角色，它是机体参与免疫调节和执行细胞免疫功能的免疫活性细胞，主要分T细胞、B细胞和NK细胞三大类。CD3+代表成熟T细胞，反映机体免疫功能，按其表面标志和功能不同分为CD4+、CD8+两大亚群。CD4+主要分布在辅助细胞诱导亚群（Th）和抑制细胞诱导亚群（Ti），这两类细胞分泌许多细胞因子（如IL-2、γ-IFN等），对Th1和Th2细胞起免疫调节作用，IL-2能够保证T细胞的存活和增殖，增强活化的T细胞产生γ-IFN和β-IFN等细胞因子及诱导或促进NK细胞，共同发挥抗肿瘤作用；CD8+主要分布在T抑制细胞（Ts）和杀伤性T细胞［2］，主要作为效应细胞特异性杀伤靶细胞，同时具有维持抗肿瘤免疫记忆功能。正常情况下，T细胞数量、比例处于相对平衡状态，功能稳定。当机体内T细胞的数量、比例发生异常改变，就会出现免疫调节紊乱，使宿主免疫功能低下，此时肿瘤细胞就可以逃避宿主的免疫监视，易发生肿瘤。而恶性肿瘤形成的过程中肿瘤细胞又会产生一些免疫抑制因子抑制淋巴细胞分化增殖，使得淋巴细胞表面CD4+抗原减少，CD8+细胞反应性增多，而增多的CD8+可能是以Ts为主［3］，这反过来又对CD4+细胞产生抑制作用，使得CD4+/CD8+比值下降，就会使免疫处于抑制状态，无法识别变异的肿瘤细胞［4］。本文研究结果显示，肺癌患者、消化系统肿瘤患者、血液系统肿瘤患者的细胞免疫功能均不同程度地发生异常，CD3+、CD4+、CD4+/CD8+值均下降，CD8+值增高，说明肿瘤患者的细胞免疫功能确实处于抑制状态。

NK细胞属于效应细胞，是机体抗肿瘤免疫的第一道防线，在早期就能迅速杀灭肿瘤细胞，起到抗肿瘤、抗感染的作用，但其活性可被肿瘤细胞分泌的抑制因子所抑制，从而降低了机体对肿瘤的抵抗力［5］。本文结果表明，与健康对照组相比，NK细胞在恶性肿瘤患者（包括肺癌组、消化系统肿瘤组、血液系统肿瘤组）出现不同程度的增高，与文献报道［2］存在差异，可能与患者机体状况及病例数不同有关，应做进一步研究。

本文通过比较各组恶性肿瘤发现，肺癌患者与消化系统肿瘤患者 CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、CD8+、NK水平无统计学差异，而血液系统肿瘤患者与肺癌、消化系统恶性肿瘤相比，其CD4+、CD4+/CD8+更低，而 CD8+更高，由此可见，血液系统肿瘤患者的细胞免疫功能比肺癌、消化系统恶性肿瘤更差，在治疗及预后方面表现更不乐观。

综上所述，机体的细胞免疫功能与肿瘤的发生发展密切相关，几乎所有的恶性肿瘤患者其体内的细胞免疫均处于免疫抑制状态，通过检测外周血T细胞亚群有助于指导临床治疗及预后评价。

［1］齐红，石虹，刘玉侠，等.253例恶性肿瘤患者外周血T细胞亚群的检测及其临床意义分析.中国实验诊断学，2009，13（11）：1589

［2］陈晓琳，戴勇，李富荣，等.恶性肿瘤患者T细胞亚群及NK细胞功能研究及临床意义.中国现代医学杂志，2002，12（2）：41

［3］刘长安，孙武，邵玉霞，等.大肠癌患者外周T细胞亚群和NK细胞活性检测的临床意义.实用癌症杂志，2001，16（5）：476

［4］Steppich BA，Moog P，Matissek C，et al.Ctyokine porifles andTcellfunctioninacutecoronarysyndormes. Atheorsclerosis，2007，190（2）：443

［5］ 朱彤宇，陈诵芬，尹格平，等.妇科癌症患者免疫功能的监测及临床意义.实用医药杂志，2003，20（5）：359