张晓晔

(内蒙古自治区中医医院，内蒙古 呼和浩特 010020)

HPLC法测定蒙药材沙旋覆花中绿原酸的含量△

张晓晔

(内蒙古自治区中医医院，内蒙古 呼和浩特 010020)

目的：建立蒙药材沙旋覆花中绿原酸的HPLC测定方法。方法：采用HPLC法测定，流动相为乙腈-水-磷酸(65：440：1)，流速1.0mL·min-1，检测波长为328nm，柱温为30℃。结果：绿原酸在0.62～9.92μg范围内呈良好的线性关系，r=0.999；101.21%，RSD为1.22%(n=6)。沙旋覆花绿原酸含量，花0.11%、叶0.12%、茎枝0.043%、根0.009%，地上部位绿原酸平均含量为0.091%。结论： 沙旋覆花绿原酸测定方法简便、可靠、重现性好，可作为药材质量评价指标。

HPLC法；沙叶旋覆 花；绿原酸

沙旋覆花Inula sasoloides(Turcz.)Ostenf.蒙药名额勒森-阿拉坦度苏拉，蒙医主要用于清热解毒，燥黄水，多以复方使用[1]。沙旋覆花主要含有倍半萜内酯化、旋覆花素，花含槲皮素、异槲皮素、咖啡酸、绿原酸、菊糖及甾醇等多种成分[2]。有关沙旋覆花有效成分含量测定未见报道。本文采用HPLC方法对该药材中的绿原酸含量进行研究，为沙旋覆花质量分析、评价与控制提供新的依据。

1 仪器与试剂

1.1 仪器：1100型高效液相色谱仪 (美国安捷伦公司)，SPD-2A紫外检测器(岛津)，TJ-912型色谱分析平台(太极计算机公司)，IN-180型柱温箱(上海英泰科技研究所)，SH6150D超生波清洗器(上海昆山)，电子天平(梅特勒)

1.2 试药：绿原酸 对照品(111521-200303)由中国药品生物制品检定所提供；甲醇为色谱纯；其他均为分析纯试剂；水为纯化水；沙旋覆花于2014年5～6月采自内蒙古大青山坝口子。

2 实验方法与结果

2.1 色谱条件：Kromasi -C18柱(200mm×4.6mm,5μm)；流动相：乙腈-水-磷酸(65：440：1)；流速：1mL·min-1；温度：30℃；检测波长：350nm nm；进样量10μL。在此条件下待测组分可达到基线分离。样品中绿原酸 与其它组分有较好的分离，见图1。

2.2 对照品溶液的制备：精密称取绿原酸 对照品适量，加甲醇制成0.62mg·mL-1的溶液，即得。

2.3 供试品溶液的制备：取本品,粉碎，过筛，精密称定50mg，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇10mL，称质量，超声处理40min ，放冷，称重，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液备用，即得。

2.4 线性关系考察：精密吸取对照品溶液1、2、4、8、12、16μL,注入高效液相色谱仪，测定峰面积；以峰面积为纵坐标(Y)，进样量为横坐标(X)做线性回归, 回归方程为Y = 1150398 X +97436，r=0.999。结果表明，绿原酸 在0.62～9.92μg范围内呈良好的线性关系。

2.5 稳定性实验：取同一份供试品溶液，分别在0，2，4，8，12h进样测定，以绿原酸 峰面积值计算RSD为0.31%。结果表明，供试品溶液在12h内稳定。

2.6 精密度实验：吸取同一批供试品溶液，在上述色谱条件下重覆 进样6次，测得绿原酸 峰面积RSD为0.41%。

2.7 重复性实验：取同批药材叶子按2.3项下平行制备6份样品溶液，并按2.1项下测定，绿原酸 的平均含量为0.12%， RSD=0.44%。

2.8 加样回收率实验：取同批药材叶子已知含量的样品6份，每份取约30mg，精密称定，分别精密加入绿原酸对照品溶液6.0 μL(3.72 μg)，按2.3项下制备样品溶液，同法操作，测定含量，计算回收率。绿原酸平均回收率为101.21%，RSD为1.22%

3 样品测定

按2.3 项下方法制备供试品溶液，按拟定的色谱条件测定沙旋覆花绿原酸含量，结果，花0.11%、叶0.12%、茎枝0.043%、根0.009%，地上部位绿原酸平均含量为0.091%。

4 讨论

沙旋覆花是国内传统民族医习用药材[2]，主要以野生状态下采集与使用，多以花卉入药。由于该药材在我国大部分地区均由生长，目前也无有效成分含量测定方法。本文根据文献资料沙旋覆花含绿原酸[1]，本文对其测量方法与不同药用部位中绿原酸含量进行了研究。表明，沙旋覆花绿原酸含量可以作为药材质量评价指标之一，同时沙旋覆花不同药用部位绿原酸含量差异较大，叶子含绿原酸最多。

[1]内蒙古卫生局.内蒙古中草药[M].呼和浩特：内蒙古人民出版社,1972﹕176 -177.

[2]张馨予，王喆星，单俊杰.旋覆花属植物化学成分及生物活性的研究进展[J].国际药学研究杂志，2008,35(6)：433-440.

2016年7月10日收稿

国家自然科学基金(编号：81260659)；内蒙古自然科学基金(编号：2014MS0860)

张晓晔，副主任药师，研究方向:临床药学。

R291.2

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1006-6810(2016)11-0054-02