陈光荣方 鑫

（1.安徽省芜湖市鸠江区清水街道农业综合服务中心，安徽芜湖 241060；

2.安徽省锏陵市义安区钟鸣镇畜牧兽医站，安徽锏陵 244122）

鸡场禽白血病感染的情况调查

陈光荣1方 鑫2

（1.安徽省芜湖市鸠江区清水街道农业综合服务中心，安徽芜湖 241060；

2.安徽省锏陵市义安区钟鸣镇畜牧兽医站，安徽锏陵 244122）

为了解地方散养土鸡场禽白血病的感染情况，挑选本地区两个产蛋率较低的散养土鸡场，选择34周龄散养土鸡，单独隔离，分别采集363份蛋清样品和泄殖腔棉拭子样品，对样品分别进行p27抗原检测，结果发现蛋清样品阳性率为43.8%（159/363），高于泄殖腔棉拭子36.3%（113/363）。调查表明，地方散养土鸡场已存在禽白血病感染情况。在选择检测样品方面，蛋清是一种更优的材料。

禽白血病 p27抗原

根据病毒中和试验宿主范围、囊膜糖蛋白的特性以及其他一系列标准，将禽白血病病毒划分为A到J 10个亚群，其中分离自鸡的有6个亚群（A、B、C、D、E、J）。1997年禽白血病在世界范围内大爆发，给养禽业造成了巨大的经济损失，禽白血病开始受到养禽业的高度重视并成为研究的热点。为了了解本地区散养土鸡禽白血病感染情况，我们对本地区两个产蛋率较低散养土鸡场进行了禽白血病感染情况调查。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 检测样品

从本地区两个散养土鸡场选择34周龄散养土鸡采集泄殖腔棉拭子363份、鸡蛋蛋清363份。

1.1.2 试剂盒

禽白血病病毒p27抗原检测试剂盒购自IDEXX公司。

1.1.3 试剂及溶液

PBS：0.01M，pH7.2；PBST：PBS中加0.5%Tween-20。

1.2 方法

1.2.1 样品采集与预处理

对34周龄散养土鸡分别采集母鸡蛋清和泄殖腔棉拭子。

取蛋清200ul，备用；泄殖腔棉拭子置于试管中，加入1ml灭菌 PBS（pH7.2），反复冻融3次，上清备用。

1.2.2 ELISA试剂盒检测ALV抗原

蛋清和泄殖腔棉拭子样品，采用IDEXX公司禽白血病抗原检测试剂盒进行p27抗原检测。

结果判定：阳性对照的平均值减去阴性对照的平均值必须大于0.200，阴性对照平均值必须小于或等于0.150。

被检样品中是否含有P27抗原与其A650和阳性对照的平均值的值有关，阳性对照样品已经标准化处理，显示显著的抗原水平（大约lOng/m1）。若S/P＜0.2，样品为阴性；若S/P＞O.2，样品为阳性。

2 结果与分析

从本地区两个散养土鸡场选择34周龄散养土鸡，针对同一只母鸡同时采集蛋清和泄殖腔棉拭子为试验样品，比较二者之间的符合情况。

结果发现，A鸡场鸡群泄殖腔棉拭子样品的阳性率为31.6%，蛋清样品的阳性率为43.7%。其中蛋清样品和泄殖腔棉拭子皆为阳性的有45个，38个通过泄殖腔棉拭子为阴性而蛋清为阳性，15个泄殖腔棉拭子为阳性而蛋清为阴性。

B鸡场鸡群中泄殖腔棉拭子样品的阳性率为30.6%，蛋清样品的阳性率为43.9%；其中蛋清样品和泄殖腔棉拭子皆为阳性的有41个，35个通过泄殖腔棉拭子为阴性而蛋清为阳性，12个泄殖腔棉拭子为阳性而蛋清为阴性。两组数据统计发现蛋清样品阳性率为43.8%（159/363），高于泄殖腔棉拭子36.3%（113/363）。

3 讨论

（1）本试验在选择不同样品检测p27抗原的过程中发现蛋清样品的抗原阳性率43.8%（159/363），高于泄殖腔棉拭子的阳性率36.3%（113/363），这一结果与Crittenden［1］等研究结果一致。这可能是由于检测样品来源不同及其所含ALV抗原的含量差异造成的。蛋清可直观地检测母鸡先天性排毒，肛拭在采集过程中不可避免地附带有机体的其他组织细胞，其ALV抗原有可能来自于内源性ALV和先天性感染的外源性ALV，那么，肛拭检测的阳性有可能一部分来自于内源性病毒的感染。而蛋清中ALV抗原主要来源于外源性的ALV［2］。如果鸡群中既有外源性白血病病毒的感染，又有内源性病毒的存在，那么，泄殖腔棉拭子检测的阳性结果就有可能一部分来源于内源性病毒感染。在种鸡场的净化过程中，关键是根除有传染性可引起疾病的外源性白血病病毒，同时尽量减少因误淘汰而给种鸡场带来的经济损失。在选择检测样品方面，蛋清是一种较好的材料。相对而言，肛拭中病毒的含量较少时，利用DAS-ELISA可能检测不到ALV群特异性抗原，造成肛拭比蛋清材料检出低，同时，由于人为的误差泄殖腔棉拭子有时不能真实地反映鸡ALV的感染情况，那么，作为比较理想的材料，应选择蛋清。

（2）张冰等［3］通过对带毒母鸡排毒时间的观察发现，在产蛋的前4周，蛋清中都能查到ALV群特异性抗原，而在产蛋的中后期，部分鸡产的蛋检测不到其群特异性抗原。因为先天性感染的鸡对病毒产生免疫耐受，并且感染的母鸡能在蛋中持续间歇性排毒并将病毒传给子代［4、5］。张胜斌［6］等对三黄鸡各个日龄段鸡只的p27抗原检测阳性率分布进行统计分析发现，在5周龄前p27抗原的检测阳性率0%，随着日龄的增大，阳性率也慢慢升高。在22周龄时达到第一个高峰值27.27%（也称检测敏感期），然后随即下降。到29周龄时又突然上升，一直到44周龄都维持在相对比较高的阳性率，特别是34周龄时达到第二个峰值。因此我们选择34周龄散养土鸡，采集样品进行检测。

（3）禽白血病的流行给全国的养禽业造成了巨大的损失，因而有效防控外源性ALV感染显得尤为重要。调查表明，地方散养土鸡场已存在禽白血病感染情况。迄今为止该病尚无有效的疫苗和治疗药物，只有通过检测及时淘汰污染鸡，建立净化鸡群才能减小损失。

［1］张冰，宋勤叶.种鸡场鸡白血病净化的研究［J］.中国兽医杂志，2002，38（5）：3-5.

［2］张胜斌，吴天威.地方优良鸡种禽白血病病毒感染调查及净化［J］.中国家禽，2010，32（12）：11-16.