红背桂花的化学成分研究

陈兵祥1，王小玲2

(1.博兴县店子镇卫生院，山东 博兴 256500；2.山东大学第二医院，山东 济南 250033)

摘要：目的研究红背桂花枝和叶的化学成分。方法药材经95%的乙醇提取，提取物经石油醚和乙酸乙酯萃取后以硅胶、凝胶和MCI等柱色谱法及重结晶进行分离纯化，采用波谱法进行结构鉴定。结果从该植物共分离得到9个化合物，其结构鉴定为：baccatin、熊果酸、agallochin J、agallochin K、山奈酚、木犀草素、excolabdone A、β-谷甾醇和胡萝卜苷。结论前6种化合物为首次从该植物中分离获得。

关键词：红背桂花；大戟科；化学成分

作者简介：陈兵祥，男，主治医师，研究方向：中药新药与治疗学，E-mail:chenyushan2000@163.com

通讯作者：王小玲，女，主管技师，研究方向：抗肿瘤药物，Tel:13869141813,E-mail:queenxiaoling@163.com

中图分类号：R284.1文献标识码：A

Studies on chemical constituents ofExcoecariacochinchinensis

CHENBing-xiang1，WANGXiao-ling2

(1.HospitalofDianziTown,BoxingCounty,Boxing256500，China;2.TheSecond

HospitalofShandongUniversity,Jinan250033,China)

Abstract：ObjectiveTo study the chemical constituents of the leaves and small branches of Excoecaria cochinchinensis.MethodsThe plant was extracted with ethanol (95% V/V) and the extract was separated by column chromatography of silica gel,sephadex LH-20,and MCI gel.The structures were elucidated on the basis of extensive spectroscopic methods.ResultsNine compounds were obtained and were established as baccatin,ursolic acid,agallochin J,agallochin K,kaempferol,luteolin,excolabdone A,β-sitosterol and daucosterine.ConclusionCompounds 1～6 were isolated from E.cochinchinensis for the first time.

Key words:Excoecariacochinchinensis;Euphorbiaceae;Chemical constituents

红背桂花(ExcoecariacochinchinensisLour.)又称青紫木，为大戟科(Euphorbiaceae)海漆属植物。该属植物全世界约有40种，分布在非洲的热带地区、亚洲以及澳大利亚的西北部地区，在我国有6种和1个变种，主要分布在西南部、南部及台湾[1]。红背桂花为常绿灌木，高达1 m，叶互生，背面紫红或血红色。民间以其全株入药，具有通经活络、止痛的功效，用于治疗麻疹、腮腺炎、扁桃体炎、心绞痛、肾绞痛、腰肌劳损等症[2]。前人对该属植物化学成分的研究表明，其中主要含有单萜、二萜、三萜、鞣质和黄酮类化合物，以二萜类化合物最具有代表性[3]。其中一些化合物的抗HIV活性[4]和抗肿瘤活性[5]受到广大科研工作者的关注。为了更深入地研究该药用植物的化学成分，为其开发利用奠定基础，本文对其化学成分进行了系统研究，从中分离获得了9个化合物，采用一维和二维NMR、MS以及TLC比较等手段鉴定为baccatin(1)、熊果酸(2)、agallochin J(3)、agallochin K(4)、山柰酚(5)、木樨草素(6)、excolabdone A(7)、β-谷甾醇(8)和胡萝卜苷(9)。经文献检索，化合物1～6为首次从该植物分离获得。

1仪器与材料

1.1仪器X-6显微熔点测定仪(北京泰克仪器厂，温度未校正)；Nicolet Nexus 470 红外分光光度计；Bruker AM-600核磁共振分析仪；API4000三重四级杆质谱仪。

1.2材料硅胶(青岛海洋化工厂，200～300目)；Sephadex LH-20凝胶(Amersham Biosciences)；MCI树脂(三菱公司)；硅胶GF254预制硅胶薄层板(烟台江友硅胶开发有限公司)。有机溶剂购自天津化学试剂一厂，均为分析纯；水为蒸馏水。红背桂花小枝和叶子2008年8月采自云南省西双版纳，由山东大学药学院沈涛鉴定，标本保存于山东大学药学院生药学教研室。

2提取与分离

红背桂花样品(6 kg)自然阴干并粉碎，以95%乙醇冷浸提取4次，每次以20 L溶剂提取5 d。过滤、合并提取液后减压浓缩得到深黄色的粗浸膏(600 g)。将浸膏混悬于温水中(1.5 L)，然后依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取(每种溶剂1.5 L×5次)。经TLC检测，将石油醚部分和乙酸乙酯部分合并(共297 g)，用硅胶(200～300目)分离，选用石油醚-丙酮 (20∶1→1∶1)进行洗脱，共得到12个部分。石油醚-丙酮20∶1洗脱部分(10.1 g)经进一步重结晶纯化得化合物8 (512.0 mg)。石油醚-丙酮10∶1洗脱部分(6.4 g)经过硅胶柱层析(石油醚-乙酸乙酯，100∶4→100∶7)和Sephadex LH-20凝聚柱色谱(无水乙醇)得化合物1(5.9 mg)和2(7.3 mg)。石油醚-丙酮6∶1 洗脱部分(12.3 g)经过Sephadex LH-20凝聚柱色谱(无水乙醇)、MCI柱色谱(50%→100%甲醇)和硅胶柱色谱(石油醚-丙酮，25∶1～10∶1)等进行分离以及重结晶纯化，得到化合物3(8.3 mg)、4(7.6 mg)、5(10.1 mg)、6(12.9 mg)和7(3.9 mg)。石油醚-丙酮2∶1洗脱部分(16.3 g)中得化合物9(157.0 mg)。

3结构鉴定

3.1化合物1无色针状结晶(石油醚-丙酮)，mp：230～232 ℃，ESI-MS m/z 459 [M+H]+，1H-NMR(600 MHz，CDCl3)δ：2.10(1H，dd，J=12.3，4.7 Hz，H-1a)，0.93(1H，m，H-1b)，3.74(1H，m，H-2)，2.10(1H，dd，J=12.3，4.7 Hz，H-3)，6.70(1H，d，J=8.9 Hz，H-15)， 6.44(1H，d，J=8.9 Hz，H-16)，1.01(3H，s，H-23)，0.83(3H，s，H-24)，0.93(3H，s，H-25)，1.04(3H，s，H-26)，0.98(3H，s，H-27)，0.92(3H，s，H-29)，0.95(3H，s，H-30)。13C-NMR(150 MHz，CDCl3)δ：46.7(C-1)，69.3(C-2)，84.0(C-3)，39.1(C-4)，55.8(C-5)，19.2(C-6)，40.6(C-7)，43.0(C-8)，51.2(C-9)，38.9(C-10)，19.0(C-11)，49.7(C-12)，39.7(C-13)，87.4(C-14)，131.7(C-15)，135.2(C-16)，77.2(C-17)，41.0(C-18)，39.0(C-19)，30.8(C-20)，35.1(C-21)，27.5(C-22)，28.1(C-23)，16.0(C-24)，18.4(C-25)，18.0(C-26)，24.8(C-27)，32.9(C-29)，23.7(C-30)。以上数据与文献[6]报道的三萜类化合物baccatin一致。

3.2化合物2无色针状结晶(乙醇)，mp：286～288 ℃，1H-NMR(600 MHz，DMSO-d6)δ：3.00 (1H，m，H-3)，5.13(1H，br s，H-12)，2.10(1H，d，J=11.4 Hz，H-18)，0.67(3H，s，H-23)，0.74(3H，s，H-24)，0.86(3H，s，H-25)，0.89(3H，s，H-26)，1.04(3H，s，H-27)，0.90(3H，d，J=11.7 Hz，H-29)，0.81(3H，d，J=6.0 Hz，H-30)。13C-NMR(150 MHz，DMSO-d6)δ：38.6(C-1)，27.4(C-2)，77.2(C-3)，38.8(C-4)，55.2(C-5)，18.4(C-6)，33.1(C-7)，40.4(C-8)，47.2(C-9)，36.7(C-10)，23.7(C-11)，125.0(C-12)，138.6(C-13)，42.1(C-14)，27.9(C-15)，24.2(C-16)，47.4(C-17)，52.8(C-18)，38.9(C-19)，38.8(C-20)，30.6(C-21)，36.9(C-22)，28.7(C-23)，16.5(C-24)，15.7(C-25)，17.5(C-26)，23.3(C-27)，178.7(C-28)，17.3(C-29)，21.5(C-30)。以上数据与文献[7]报道的三萜类化合物熊果酸(ursolic acid)一致。

3.3化合物3无色针状结晶(乙醇)，mp：146～148 ℃，1H-NMR(600 MHz，CDCl3)δ：2.32(1H，m，H-2a)，2.81(1H，m，H-2b)，5.80(1H，d，J=6.2 Hz，H-7)，2.71 (1H，m，H-9)，4.23(1H，td，J=10.8，5.0 Hz，H-11)，3.94(1H，s，H-14)，6.50(1H，dd，J=17.6，10.6 Hz，H-15)，5.15(1H，d，J=10.6 Hz，H-16a)，5.22(1H，d，J=17.6 Hz，H-16b)，1.13(3H，s，H-17)，1.11(3H，s，H-18)，1.11(3H，s，H-19)，1.41(3H，s，H-20)。13C-NMR(150 MHz，CDCl3)δ：40.8(C-1)，35.4(C-2)，215.8(C-3)，47.9(C-4)，52.7(C-5)，24.0(C-6)，126.3(C-7)，140.0(C-8)，54.5(C-9)，36.7(C-10)，67.9(C-11)，41.0(C-12)，41.9(C-13)，80.5(C-14)，147.9(C-15)，111.4(C-16)，23.1(C-17)，26.2(C-18)，22.6(C-19)，14.8(C-20)。以上数据与文献[8]报道的二萜类化合物agallochin J一致。

3.4化合物4无色针状结晶(乙醇)，mp：156～158 ℃，1H-NMR(600 MHz，CDCl3)δ：3.42(1H，t，J=6.4 Hz，H-3)，5.84(1H，br s，H-7)，4.22(1H，td，J=10.2，5.0 Hz，H-11)，3.90(1H，s，H-14)，6.48(1H，dd，J=17.6，10.5 Hz，H-15)，5.12(1H，d，J=10.5 Hz，H-16a)，5.22(1H，d，J=17.6 Hz，H-16b)，1.10(3H，s，H-17)，1.15(3H，s，H-18)，1.15(3H，s，H-19)，1.30(3H，s，H-20)。13C-NMR(150 MHz，CDCl3)δ：40.8(C-1)，29.1(C-2)，78.4(C-3)，39.5(C-4)，50.7(C-5)，23.4(C-6)，126.9(C-7)，139.4(C-8)，55.3(C-9)，36.8(C-10)，67.5(C-11)，40.9(C-12)，41.6(C-13)，80.6(C-14)，147.8(C-15)，111.3(C-16)，22.4(C-17)，28.6(C-18)，16.7(C-19)，15.6(C-20)。以上数据与文献[8]报道的二萜类化合物agallochin K一致。

3.5化合物5黄色粉末，盐酸-镁粉反应显红色，1H-NMR(600 MHz，DMSO-d6)δ：12.37(1H，br s，5-OH)，8.11(2H，d，J=7.2 Hz，H-2′，H-6′)，6.92(2H，d，J=7.2 Hz，H-3′，H-5′)，6.21(1H，s，H-6)，6.42(1H，s，H-8)。13C-NMR(150 MHz，DMSO-d6)δ：146.7(C-2)，135.6(C-3)，175.8(C-4)，160.6(C-5)，98.1(C-6)，163.9(C-7)，93.4(C-8)，156.1(C-9)，102.9(C-10)，121.6(C-1′)，129.4(C-2′)，115.3(C-3′)，159.1(C-4′)，115.3(C-5′)，129.4(C-6′)。以上数据与文献[9]报道的黄酮类化合物山柰酚(kaempferol)一致。

3.6化合物6黄色粉末，盐酸-镁粉反应显红色，1H-NMR(600 MHz，DMSO-d6)δ：12.87(1H，br s，5-OH)，10.56(1H，br s，7-OH)，9.24(1H，s，3′-OH)，9.74(1H，s，4′-OH)，7.34(1H，s，H-2′)，6.95(1H，d，J=8.1 Hz，H-5′)，7.38(1H，d，J=8.1 Hz，H-6′)，6.64(1H，s，H-3)，6.15(1H，d，J=2.0 Hz，H-6)，6.44(1H，d，J=2.0 Hz，H-8)。13C-NMR(150 MHz，DMSO-d6)δ：164.0(C-2)，102.5(C-3)，181.4(C-4)，161.3(C-5)，98.7(C-6)，163.7(C-7)，93.7(C-8)，157.2(C-9)，103.3(C-10)，121.3(C-1′)，113.1(C-2′)，145.5(C-3′)，149.4(C-4′)，115.8(C-5′)，119.3(C-6′)。以上数据与文献[9]报道的黄酮类化合物木犀草素(luteolin)一致。

3.7化合物7无色针状结晶(乙醇)，mp：248～250 ℃，1H-NMR(600 MHz，CDCl3)δ：6.23(1H，dd，J=4.5，3.0 Hz，H-2)，6.18(1H，d，J=4.5 Hz，H-3)，2.75(1H，d，J=2.8 Hz，H-5)，5.04(1H，d，J=2.5 Hz，H-6)，2.63(1H，d，J=16.5 Hz，H-12a)，3.51(1H，d，J=16.5 Hz，H-12b)，6.31(1H，dd，J=17.3，10.7 Hz，H-14)，4.93(1H，d，J=17.3 Hz，H-15a)，5.37(1H，d，J=17.3 Hz，H-15b)，1.45(3H，s，H-16)，1.88(3H，s，H-17)，0.99(3H，s，H-18)，1.03(3H，s，H-19)，1.67(3H，s，H-20)，2.03(3H，s，OAc-2)，2.16(3H，s，OAc-3)。13C-NMR(150 MHz，CDCl3)δ：27.5(C-1)，70.4(C-2)，75.9(C-3)，43.7(C-4)，43.1(C-5)，73.8(C-6)，37.2(C-7)，81.7(C-8)，83.1(C-9)，34.5(C-10)，207.1(C-11)，50.1(C-12)，76.2(C-13)，147.9(C-14)，110.4(C-15)，31.3(C-16)，24.0(C-17)，33.1(C-18)，23.9(C-19)，20.3(C-20)，21.2(CH3-2)，170.9(CO-2)，20.9(CH3-3)，170.2(CH3CO-3)。以上数据与文献[10]报道的二萜类化合物excolabdone A一致。

3.8化合物8无色针状结晶(氯仿-甲醇)，mp:136～138 ℃，Liebermann-Burchard反应阳性，与已知对照品在TLC中交叉点样，其Rf值一致，与已知品混合后熔点不降，且其IR谱也与已知对照品完全一致，鉴定该化合物为β-谷甾醇(β-sitosterol)。

3.9化合物9白色粉末(氯仿-甲醇)，mp:308～310 ℃，Liebermann-Burchard及Molish反应均为阳性，在TLC中与已知对照品共同交叉点样，Rf值一致，其IR谱与已知品完全一致，鉴定该化合物为胡萝卜苷(daucosterine)。

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