袁子民，刘 欢，贾天柱，王 静

（辽宁中医药大学，辽宁大连116600）

肉豆蔻及炮制品醇提取物的抗氧化作用

袁子民，刘 欢，贾天柱，王 静*

（辽宁中医药大学，辽宁大连116600）

目的 研究肉豆蔻及炮制品（麸煨、面煨）醇提物的体外抗氧化作用。方法 采用肉豆蔻及炮制品90%乙醇的提取液，测定对羟自由基（・OH）的清除率，对超氧阴离子（O2-・）的清除率。结果 肉豆蔻及其炮制品醇提液对・OH、O2-・清除能力不同，其清除能力均为肉豆蔻＞面煨肉豆蔻＞麸煨肉豆蔻。结论 肉豆蔻及其炮制品的醇提物均具有抗氧化能力，但炮制后抗氧化作用降低。

肉豆蔻；炮制品；抗氧化作用

肉豆蔻收载于《中国药典》2010年版，为肉豆蔻科植物肉豆蔻 myristica fragrans houtt.的干燥成熟种仁，具有温中行气，涩肠止泻功效。其炮制后具有减毒增效作用［1］。主要含有挥发油、脂肪油、木脂素和苯丙素等化学成分［2］，以往对肉豆蔻的抗氧化作用研究主要以挥发油为研究对象，本实验主要以肉豆蔻及炮制品的乙醇提取物为研究对象，对其炮制前后抗氧化作用进行研究，为肉豆蔻的药理作用、炮制机制及相关的提取工艺的研究提供科学依据［3-4］。

1 仪器与试药

U-3010紫外可见分光光度计（日本日立公司），SG3300H超声波清洗器（上海冠特超声仪器有限公司），AR2140型电子分析天平（上海奥豪斯公司），肉豆蔻（大连权健中药饮片有限公司提供，产地广东，批号140915）；麸煨肉豆蔻（按2010药典一部方法炮制），面煨肉豆蔻（按2005版药典一部方法炮制），乙醇（天津市大茂化学试剂厂）、硫酸亚铁（沈阳试剂一厂）、水杨酸（国药集团化学试剂有限公司）、H2O2（天津市津北精细化工有限公司）、邻苯三酚（上海源叶生物科技有限公司）、盐酸（丹东市胜利化工厂）、三（羟甲基）氨基甲烷Tris（中国医药集团上海化学试剂公司）、乙二胺四乙酸（国药集团化学试剂有限公司）等均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 肉豆蔻及其炮制品醇提液的制备 取肉豆蔻、麸煨肉豆蔻、面煨肉豆蔻粉末（过20目筛）1.0 g，精密称定，分别置具塞锥形瓶中，精密加入80 mL 90%乙醇，称定重量，超声（功率250 W，频率30 KHz）处理30 min，放冷，再称定重量，用90%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得肉豆蔻生品、麸煨品、面煨品提取液［5-6］。

2.2 抗氧化作用研究［7-14］

2.2.1 对羟自由基（・OH）清除率的测定 取2.1项下肉豆蔻及其炮制品醇提液 ，分别精密吸取50、100、150、200、250、300 μL，至5 mL量瓶中，加80%乙醇定容至刻度，即得相当于含生药0.125、0.25、0.375、0.5、0.625、0.8 mg／mL的系列样品溶液。实验采用Fenton法，依次向试管中加入蒸馏水1.0 mL，FeSO4（0.18 mmol／mL）溶液1.0 mL，水杨酸-乙醇（0.18 mmol／mL）溶液1.0 mL，H2O2（0.03%）溶液0.1 mL，震荡混合，在510 nm下，测定吸光度A0；以1 mL样品溶液代替1 mL蒸馏水，测得样品的吸光度值AS；以0.1 mL蒸馏水代替0.1 mL H2O2，测得吸光度值AI；计算清除率，结果见表1。根据量效曲线计算IC50值。

表1 肉豆蔻及其炮制品醇提液对羟自由基的清除作用

由表1可知，肉豆蔻及其炮制品醇提液对羟基自由基有一定的清除作用，且抑制率随浓度的增大而升高（P＜0.05）。肉豆蔻及其炮制品的半数抑制率（IC50）从小到大依次为肉豆蔻（0.37 mg／mL）、面煨肉豆蔻（0.47 mg／mL）、麸煨肉豆蔻（0.44 mg／mL）。结果表明肉豆蔻及其炮制品醇提液对羟基自由基清除能力不同，其顺序为肉豆蔻＞面煨肉豆蔻＞麸煨肉豆蔻。

2.2.2 对超氧阴离子（O2-・）清除率的测定 取2.1项下肉豆蔻及其炮制品醇提液，分别精密吸取50、100、150、200、250、300 μL，至5 mL量瓶中，加80%乙醇定容至刻度 ，即得相当于含生药 0.125、0.25、0.375、0.5、0.625、0.8 mg／mL的系列样品溶液。采用邻苯三酚自氧化方法，依次向试管中加入Tris-HCl（0.1 mol／L）缓冲液4.5 mL，4.2 mL蒸馏水，混匀后在25℃的恒温水浴锅中保温20 min后，立即加入在25℃的恒温水浴锅中保温的邻苯三酚（3 mmol／L）溶液0.3 mL，在325 nm下每隔0.5 min测定吸光度值A0，测定3 min。以1 mL样品溶液代替1 mL蒸馏水，测得样品的吸光度值AS，计算吸光度的平均增值，记为Ai。计算清除率 ，结果见表2。根据量效曲线计算IC50值。

表2 肉豆蔻及其炮制品醇提液对氧自由基的清除作用

由表2可知，肉豆蔻及其炮制品醇提液对氧基自由基有一定的清除作用，且抑制率随浓度的增大而升高（P＜0.05）。肉豆蔻及其炮制品的半数抑制率（IC50）从小到大依次为肉豆蔻（0.63 mg／mL）、面煨肉豆蔻（0.78 mg／mL）、麸煨肉豆蔻（0.72 mg／mL），结果表明肉豆蔻及其炮制品醇提液对氧基自由基清除能力不同，其顺序为肉豆蔻＞面煨肉豆蔻＞麸煨肉豆蔻。

3 结语

肉豆蔻及炮制品通过对羟自由基和氧自由基清除作用的研究表明，其乙醇提取物均具有抗氧化作用，可有效地清除和抑制自由基，但经炮制后的面煨炮制品、麸煨炮制品抗氧化作用减弱，可能与炮制后挥发油、木脂素类成分含量降低有关［15］，麸煨肉豆蔻与面煨肉豆蔻间无统计学意义。

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Antioxidation of ethanol extract of Nutmeg and processed products

YUAN Zimin，LIU Huan，JIA Tianzhu，WANG Jing*
（Liaoning University of TCM，Dalian 116600，Liaoning Province，China）

Objective To study antioxidant activities in vitro of ethanol extracts of Nutmeg and its processed products（roasted with flour，roasted with bran）．Methods The clearance rates of superoxide anion（O2-・）and hydroxyl radical（・OH）were determined in the 90%ethanol extracts of Nutmeg and the processed ones．Results Their scavenging abilities of・OH and O2-・were different，The scavenging ability followed as：Nutmeg＞Nutmeg roasted with wheat flour＞Nutmeg roasted with wheat bran．Conclusion The ethanol extracts of Nutmeg and the processed ones had antioxidant ability，but Nutmeg after processing reduced the antioxidant effect．

Nutmeg；processed products；antioxidation

R284.2

A

2095-6258（2015）05-0930-03

10．13463／j．cnki．cczyy．2015．05．017

2015-05-05）

国家自然科学基金项目（81274084）。

袁子民（1975-），男，博士，副教授，主要从事中药炮制工艺及质量标准研究。

*通信作者：王 静，电话-（0411）85890139，电子信箱-wjyuanmeng＠163．com