关飞　尤永君　安俊峰

摘 要：酸化剂具有调节动物肠道的pH值，激活消化酶，改善营养物质的消化和吸收，以及增强机体免疫力等作用。本文就三种酸化剂产品对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和黄曲霉菌的最小杀菌浓度进行了试验观察，试验结果表明：三种酸化剂产品在一定浓度内对三种病原微生物都具有杀灭作用，具有替代某些抗生素的潜能。

关键词：酸化剂；细菌；霉菌；最小杀菌浓度

Abstract：Acidifier can regulate animal intestinal pH， activate digestive enzyme， improve digestion and absorption of nutrients and enhance the body immunity. In this paper， the author have observed experimentally the minimum bactericidal concentration of three acidifier products on escherichia coli， staphylococcus aureus and aspergillus flavus. The results showed that： three kinds of acidifier products have killed three kinds of pathogenic microorganisms within a certain concentration range， having some potential alternativ eantibiotics.

Keywords： acidifier； bacteria； mold； minimum bactericidal concentration.

隨着人们对食品安全日益重视，动物性食品的抗生素药物残留问题亟待解决，国内外正寻求能够替代抗生素的饲料添加剂。目前，在畜牧生产中应用酸化剂已得到了迅速的发展，经研究报道平[1-6]酸化剂对调节动物肠道pH值，提高动物机体内消化酶的活性，提高饲料利用率，改善肠道正常菌群，杀灭或抑制有害菌的生长繁殖，促进动物生长等方面有重要作用。

本文就酸化剂的杀菌、抑菌作用做了相关实验，旨在说明酸化剂对某些有害菌具有杀灭和抑制作用，为酸化剂在生产实际的应用提供一定理论依据。

1 实验材料

A酸化剂：维乐欣（主要成分：乙酸、甲酸、丙酸、丁酸、柠檬酸、苹果酸、乳酸及其盐，批号：津饲预字[2010]009924号）；B酸化剂（主要成分：甲酸、乙酸、甲酸胺）、C酸化剂（主要成分：丙酸、苹果酸、甲酸、富马酸）为普通酸化剂，无批号；pH测定仪（TP210精密便携式pH计，购自北京时代新维测控设备有限公司），大肠杆菌标准株、金黄色葡萄球菌标准（购自广东环凯微生物科技有限公司）、黄曲霉菌分离株；灭菌琼脂培养基、普通自来水、灭菌蒸馏水、灭菌肉体培养基、灭菌孟加拉红培养基。由于在临床养殖过程中A酸化剂维乐欣建议使用浓度有0.05%、0.1%、0.2%三种，所以在做抑菌试验的时候将三种酸化剂分别稀释成0.05%、0.1%、0.2%三个浓度梯度，以便观察其抑菌效果。

2 实验方法与步骤

2.1 不同时间不同浓度的pH测定

1）将A，B，C号三种酸化剂产品分别以相应量加入到自来水中分别配制成0.3%、0.2%和0.1%比例浓度。

2）配好后各种比例浓度在室温下于0 h、6 h、24 h分别测定pH值。

2.2 三种酸化剂对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的最小杀菌浓度（MBC）的测定

1）将三种过滤后的酸化剂用灭菌后的培养基按梯度稀释配成终浓度为0.05%、0.1%、0.2%的固体培养基，倒好平皿。

2）复苏大肠杆菌，金黄色葡菌球液，使菌液浓度为105 CFU/mL。

3）分别将1 μL大肠杆菌，金黄色葡菌球菌液加入配制好的不同浓度的培养皿上。每一个样品同时做一个重复实验。

4）37 ℃，过夜培养。观察，拍照并记录结果。

2.3三种酸化剂对黄曲霉菌的最小杀菌浓度值得测定

1）用灭菌肉汤培养基将三种酸化剂按梯度稀释配成终浓度为0.05%、0.1%、0.2%的溶液，并分装入试管，9.5 mL/管。

2）同时用灭菌蒸馏水将三种酸化剂按梯度稀释配成终浓度为0.05%、0.1%、0.2%的溶液，并分装入试管，9.5 mL/管。

3）复苏霉菌，使菌液浓度为107 CFU/mL。

4）分别将500 μL菌液加入配制好的不同浓度的试管中。每一个样品同时做一个重复实验。

5）37℃，130 r/min摇菌，培养48 h。

6）从每一个实验管里取100 μL均匀地涂在孟加拉红培养基上。每一个样品做一个重复实验。

7）37℃，培养48～72 h，每隔24 h观察菌落生长状况。

3 实验结果

3.1不同时间不同浓度酸化剂的pH测定值

本文分别对三种酸化剂产品原液及0.3%、0.2%、0.1%四个浓度在不同时间的pH值进行测定，并分析各种酸化剂在不同浓度不同时间点的pH稳定性，具体数据见下表1：

A酸化剂原液pH 3.23；B酸化剂原液pH 2.99；C酸化剂原液pH 3.35；实验结果可以看出各种酸化剂在不同浓度不同时间点的pH稳定性较好，说明酸化剂的缓冲体系良好。

3.2三种酸化剂对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌的最小杀菌浓度（MBC）的测定

3.2.1 大肠杆菌组

從大肠杆菌抑菌试验结果（表2）可以得出：三种酸化剂对大肠杆菌均具有抑制杀灭作用，A酸化剂（维乐欣）和B酸化剂对大肠杆菌的MBC值为0.1%，C酸化剂对大肠杆菌的MBC值为0.2%。

3.2.2 金黄色葡萄球菌组

从金黄色葡萄球菌抑菌试验结果（表3）可以得出：三种酸化剂对葡萄球菌均具有抑制杀灭作用，A酸化剂（维乐欣）和B酸化剂对金黄色葡萄球菌的MBC值为0.1%；C酸化剂对金黄色葡萄球菌的MBC值为0.2%。

3.3 三种酸化剂对黄曲霉菌的最小杀菌浓度（MBC）的测定

3.3.1 用肉汤培养基作为稀释液

用营养肉汤做稀释液的实验中（表4），A、C酸化剂对霉菌的抑菌浓度为0.2%；B酸化剂对霉菌的抑菌浓度>0.2%。

3.3.2 用水为稀释液

用蒸馏水做稀释液的实验中（表5），A酸化剂对霉菌的抑菌浓度为0.1%；B、C酸化剂对霉菌的抑菌浓度为0.2%。

用营养肉汤做稀释液比用蒸馏水做稀释液，能给霉菌的生长提供更多的营养，但不论是用营养肉汤或是水为稀释液时，对霉菌的抑制效果方面A酸化剂优于其它两种酸化剂。

通过以上实验和实验结果表明复合酸化剂对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、黄曲霉菌在一定浓度下是有杀灭和抑制作用的，这也和之前报道[7-9]过的酸化剂具有杀灭有害菌或抑制有害菌生长繁殖的作用是相符的。A酸化剂（维乐欣）抑菌杀菌作用优于其它两种酸化剂，可能是由于维乐欣中有机酸的配比更加合理，有机酸分子进入细胞内发挥强大的抗菌作用。但酸化剂应用到临床养殖上到底对养殖水平起多大作用，能产生多大的效益还需进一步地研究确认。

（编辑：狄慧）

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