徐建辉　何燕武　陈海明

38kD-lgG和TSPOT-TB联合检测在结核病诊断中的应用

徐建辉何燕武陈海明

目的 探讨抗结核抗体（38kD-lgG）和结核感染T细胞斑点试验（TSPOT-TB）联合检测在结核病临床诊断中的价值。方法 采用上述两种方法单项或联合检测疑结核患者114例，其中结核患者72例，非结核患者42例，对检测结果进行比较分析。结果 TSPOT-TB及38kD-IgG试验单项检测结核菌阳性（菌阳）结核患者的敏感性分别为90.63%和78.13%，二者差异有统计学意义（P＜0.05），联合检测敏感性为96.88%。TSPOT-TB及38kD-IgG试验单项检测结核菌阴性（菌阴）结核患者的敏感性分别为80.00%和77.50%，联合检测敏感性为95.00%，联合检测与两种单项检测比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。对照组中，TSPOT-TB及38kD-IgG试验特异性分别为90.48%和78.57%，联合检测特异性为66.67%。TSPOT-TB试验对3种肺外结核的检测敏感性显著高于38kD-IgG试验（P＜0.05）。结论 对于菌阳患者，TSPOT-TB试验敏感性较高。对于菌阴患者，联合检测敏感性较高。38kD-lgG和TSPOT-TB联合检测可提高结核病的诊断敏感性。

结核病 抗结核抗体 结核感染T细胞斑点试验

结核病是一种慢性传染病，近几年环境污染日益严重，结核病发病率逐年升高［1］。我国是结核病高发国家［2］，由于病因复杂，确诊相对较为困难。临床调查显示，结核感染T细胞斑点试验（TSPOT-TB）较抗结核抗体（38kD-lgG）试验具有更高的特异性和敏感性［3，4］。本文通过对结核病患者及健康对照组进行38kD-lgG检测和TSPOT-TB斑点试验，探讨两种方法单项或联合检测在结核病诊断中的应用价值。

1　临床资料

1.1一般资料 选择本院2012年1月至2014年1月收治的114例疑患结核患者，行涂片检测、胸部X线或CT、结核菌素试验及实验室生化检查，检测过程参照中华医学会结核病学分会颁布的《肺结核诊断和治疗指南》［5］。最终确诊非结核病患者42例，其中男27例，女15例；平均年龄（45.3±17.4）岁。确诊结核病患者72例，男47例，女25例；平均年龄（49.3±20.5）岁。其中，结核性胸膜炎患者27例、结核性腹膜炎患者20例、结核性脑膜炎患者25例。结核菌阴性（菌阴）患者40例，结核菌阳性（菌阳）患者32例。排除合并有心脑血管、造血系统及肝、肾等内脏器官严重疾病患者，无免疫抑制剂用药史及放化疗治疗史。患者及其家属均已签署知情同意书。

1.2方法 （1）结核抗体检查：真空采血管采集患者静脉血约5ml，迅速混匀，在最短时间内用玻璃棒剥离纤维蛋白，保证血标本无浑浊沉淀，以免吸入而导致反应膜孔堵塞。利用斑点免疫金渗滤试验（DIGFA）原理测定检测血清标本中的38kD-lgG（试剂盒由潍坊市康华生物技术有限公司提供）。（2）结核感染T细胞斑点试验：真空采血管采集患者静脉血约5ml，密度梯度离心分离出外周血单个核细胞，保证血标本无浑浊沉淀，采用上海复星科技有限公司提供的TSPOTTB试剂盒对结核菌致敏T细胞进行检测。随后显微镜观察并记录阴性斑点的数量，同时检测并记录结合特异性抗原致敏的效应T淋巴细胞的数量。

1.3统计学方法 采用SPSS13.0统计软件。计量资料以（x±s）表示，组间比较采用t检验，计数资料采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

2　结果

2.138kD-lgG和TSPOT-TB对菌阳和菌阴结核患者检测结果比较 对菌阳结核患者，TSPOT-TB方法的检测阳性率显著高于38kD-lgG（χ2=4.217，P＜0.05）。联合检测阳性率显著高于38kD-lgG（χ2=5.113，P＜0.05），而与TSPOT-TB比较，差异无统计学意义（χ2=1.247，P＞0.05）。对菌阴结核患者，联合检测阳性率显著高于单项检测（χ2=4.927、3.816，P＜0.05）。对照组中，38kD-lgG和TSPOT-TB的特异性分别为78.57%和90.48%，TSPOT-TB的特异性显著高于38kD-lgG（χ2=3.912，P＜0.05）。见表1。

表1　38kD-lgG和TSPOT-TB对菌阳结核和菌阴结核患者检测结果比较（n）

2.238kD-lgG和TSPOT-TB对3种肺外结核的检测结果比较 对结核性脑膜炎患者，TSPOT-TB的阳性率显著高于38kD-lgG（χ2=3.858，P＜0.05），联合检测阳性率显著高于单项检测（χ2=6.179、4.029，P＜0.05）。对结核性腹膜炎患者，TSPOT-TB的阳性率显著高于38kD-lgG（χ2=4.227，P＜0.05），联合检测阳性率显著高于单项检测（χ2=5.445、3.997，P＜0.05）。对结核性胸膜炎患者，TSPOT-TB的阳性率显著高于38kD-lgG（χ2=4.568，P＜0.05），联合检测阳性率显著高于38kD-lgG（χ2=6.002，P＜0.05）。见表2。

表2　38kD-lgG和TSPOT-TB对结核性脑膜炎、结核性腹膜炎和结核性胸膜炎检测结果比较（n）

3　讨论

目前全国关于结核病的治疗原则是“早期、联合、适量、规律和全程”，早期诊断对于控制疾病的发展与传播具有十分重要的作用。38kD-lgG试验能够通过检测人体血液中的结核分枝杆菌抗体，判断患者体内是否存在结核分枝杆菌［6，7］。本文结果显示，38kD-lgG试验对非结核组的检测阳性率达21.43%，证实38kD-lgG试验具有较高的交叉反应存在，会导致假阳性反应。TSPOT-TB试验是利用酶联免疫斑点法探测结核感染者的特异性T细胞诊断结核的一种新方法［8］，该法特异性好，灵敏度高，在结核病临床诊断中的应用越来越广泛。本文中TSPOT-TB试验对菌阳患者和菌阴患者的检测敏感性达90.63%和80.00%，对非结核组为9.52%，此结果接近国外文献报道［9，10］。38kD-lgG试验联合TSPOT-TB试验对菌阴患者的检测敏感性达95.00%，原因可能是由于患者的免疫状态不同，通过联合检测的互补作用提高了结核病患者的诊断率［11，12］。对25例结核性脑膜炎、20例结核性腹膜炎和27例结核性胸膜炎的检测结果说明TSPOT-TB试验对这3种肺外结核的检测敏感性显著高于38kD-lgG试验。对结核性胸膜炎患者，TSPOT-TB试验的检测敏感性接近联合检测，说明TSPOT-TB试验在结核性胸膜炎的诊断中具有较高的应用价值，而在结核性脑膜炎和结核性腹膜炎检测中应优先采用联合检测法［13］。

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3 赵静，蒋彩花，汪运山，等.抗结核抗体及结核感染 T 细胞斑点试验在结核病诊断中的应用.中国防痨杂志，2011，31（1）：19～21.

4 王立红，付秀华，张桂芝，等.结核感染T细胞斑点试验在结核病诊断中的应用价值.国际检验医学杂志，中国防痨杂志，2013，35（12）：992～996.

5 中华医学会结核病学分会.肺结核诊断和治疗指南.中华结核和呼吸杂志，2001，24（2）：70～74.

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12 孙海柏，张立，刘佳庆，等.结核分枝杆菌T细胞斑点实验在肺结核诊断中的应用.山东医药，2013，53（43）：75～77.

Objective To evaluate the application value of tuberculosis antibody and enzyme linked immune-spot assay used for Clinical diagnosis of tuberculosis. Methods The two methods were used individually and in combination respectively to 72 active tuberculosis patients and 42 non-tuberculosis in control group. Results For smear positive TB，the sensitivity of TSPOT-TB（90.63%）was significantly higher than that of 38kD-lgG test（78.13%）（P＜0.05），and was epual to the sensitivity of 96.88% of combined detection；for bacteriological negative TB，the sensitivity of combined detection（95%）was significantly higher than that of 85% and 77.50% by TSPOT-TB and 38kD-lgG（P＜0.05）；42 non-tuberculosis control，the sensitivity were 78.57% and 90.48% respectively，the sensitivity of combined detection was 66.67%；the detection sensitivity of extra pulmonary TB by TSPOT-TB were significantly higher than those of 38kD-lgG，and was equal to the sensitivity of combined detection. Conclusion TSPOT-TB test in smear positive patients and tuberculous pleurisy and meningitis in patients with higher sensitivity，in the non tuberculosis population specifi city is good；in the differential diagnosis of smear negative patients，38kD-lgG and TSPOT-TB test and application will improve the greater sensitivity.

Tuberculosis 38kD-lgG TSPOT-TB Diagnosis

315700 浙江省象山县疾病预防控制中心检验科