夏富益

红细胞ABO疑难血型检测分析与处理方案

夏富益

目的 分析红细胞ABO疑难血型检测结果及产生原因,提出解决处理方案。方法 根据红细胞ABO疑难血型检测处理程序，设计针对性试验进行正确的红细胞分型。结果 共检测红细胞ABO疑难血型标本41例,由抗原所致的17例（41.46%），其中亚型15例，抗原减弱或缺失2例；由抗体所致的24例（58.54%），其中冷自身抗体13例，抗体减弱或缺失6例，同种抗体5例。结论 由抗原或抗体所致的红细胞ABO疑难血型可根据相应原因，通过设计针对性实验进行正确的鉴定或确认。

红细胞；ABO疑难血型；检测分析；处理方案

ABO血型系统是输血中最重要的血型系统,正确鉴定ABO血型是输血前血型血清学检查的重要环节，关乎受血者的用血安全。但在ABO血型血清学检测过程中,除由于新生儿自然发生的抗-A、抗-B量很少,只检测其红细胞抗原正定型外,常规检测、判断ABO血型,须正反定型相符[1],才能确保ABO血型鉴定的正确性；若出现正反定型不符,则须进入ABO疑难血型鉴定程序，查找出现ABO血型正、反不符的原因,并提出解决处理方案。本研究对41例ABO疑难血型标本检测结果及产生原因进行分析，现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 2012年1月～2014年12月广元市中心血站血型参比室收到的本血站血液检测实验室和本地区各临床医院ABO疑难血型标本共41例。献血者标本26例,男11例,女15例,年龄24～51岁。医院受血者标本15例,男6例,女9例,年龄21～73岁，其中白血病2例，支原体肺炎3例，肺气肿4例，自身免疫性溶血性贫血2例，消化道出血1例，外科手术者3例。

1.2 试剂 单克隆抗-A、抗-B、抗-AB、抗-A1、抗-H、抗球蛋白试剂（抗-IgG+C3d、单价抗-IgG）、A2红细胞、筛检红细胞、谱细胞（由上海血液生物医药有限责任公司提供）、3%～5% A1、B及O型试剂红细胞盐水悬液由本站血型室自制。

1.3 方法

1.3.1 排除人为因素与技术错误，询问、查阅病历，了解患者病史（尤其输血史、妊娠史、和家族史等）、临床诊断、药物治疗情况[2-4]；对献血者需查阅相关献血档案及以前血型检测记录。

1.3.2 严格按照“输血相容性试验标准检测流程[5]”重新抽取血液新鲜标本，确定血型定型试剂和试剂红细胞有效性，洗涤红细胞（必要时使用37℃洗涤，使用血清代替血浆），重新检测ABO正反定型。

1.3.3 如仍为ABO正反定型不符，根据检测结果查找原因，设计针对性实验增加项目分析。

1.3.4 （1）出现减弱或缺失抗原的抗原反应：I ABO亚型：①正定型增加抗-AB、抗-A1、抗-H；反定型：增加A2红细胞；②吸收放散试验阳性确认红细胞A、B抗原存在；③唾液型物质检测辅助鉴定ABO血型；④有条件可作血型基因检测和家系调查。

ⅡA、B抗原减弱：①延长反应时间（放置≥30min）；②吸收放散试验及唾液型物质检测；③既往血型调查；④血型基因检测；⑤临床追踪（一般病情缓解后血型抗原恢复）。

（2）抗体减弱或缺失：①延长反应时间，室温下孵育15～30min；②增加血清量（红细胞：血清比例1∶2或1∶3以上）；③于室温及4℃检查血清中的抗体，用A、B、O（或酶处理的A、B、O）及自身红细胞进行检查（必要时需进行冷抗体自身吸收）；④确定受血者年龄及临床诊断（如新生儿、免疫病、输血史、异型血浆输注等）。

（3）冷自身抗体：①将血清和红细胞分别在37孵育后再混合；②用37℃温盐水洗涤红细胞；③45℃热放散3min；④（抗体浓度较高时）巯基试剂(DTT)处理红细胞[6]；⑤自身吸收去除血清中的自身冷抗体。

（4）室温反应的同种抗体：①用谱细胞做抗体鉴定；②选择没有相应抗原的A、B细胞做反定型。

2 结果

通过对41例血液样本进行上述试验，发现造成ABO血型正反不符的主要原因为血型抗原减弱或缺失、冷自身抗体、抗体减弱或缺失及同种抗体。见表1～4。

表1 41例ABO血型正反不符检测结果分析（n）

表2 41例ABO血型正反不符原因统计［n（%）］

表3 抗原所致ABO血型正反不符原因统计［n（%）］

表4 抗体所致ABO血型正反不符原因统计［n（%）］

3 讨论

3.1 通常认为，ABO疑难血型是指排指除人为因素、技术操作错误外，血型试剂有效性确定的情况下，红细胞定型与血清定型出现矛盾，不能呈现ABO血型抗原和抗体的互补结果，与年龄、疾病、遗传、药物、临床治疗等诸多因素有关。主要包括多或少的抗原、抗体反应，抗原、抗体的不凝集和弱凝集结果。

3.2 在本文的41例正反定型不符样本中，因抗原所致的17例（41.46%），其中亚型15例，抗原减弱或缺失2例；因抗体所致的24例（58.54%），其中冷自身抗体13例，抗体减弱或缺失6例，同种抗体5例。其原因分类为：（1）红细胞（抗原）：包括A、B抗原亚型、血液病（如白血病、骨髓增生异常综合征）所致抗原减弱及机体含过多血型物质（如腹腔肿瘤）导致凝集强度减弱等。其中亚型主要来自成人，未患使抗原、抗体减弱疾病，有明显的血清学特征，抗原减弱或血清中出现意外抗体（抗-A1、抗-B），具有遗传基础；（2）血浆：先天性无ABO抗体；年龄（4个月内婴儿、老年人），低丙种球蛋白血症，单采血浆或血浆置换治疗及大量输液等所致抗体减弱；体内存在冷自身抗体，输注异型血浆，ABO亚型产生的抗体与室温反应性同种抗体（主要为MN、Lewis、P血型系统IgM类同种抗体）所致的抗体增多等。

3.3 ABO血型疑难鉴定通过查阅相关资料与病史分析，设计针对性实验，通常均能获得较为满意结果。对献血者的血液无论什么原因，只要明确ABO血型正反不符，需对其建立相关档案，仅供血型研究之用。对正反定型不符的受血者，其疑难血型鉴定需要一定的时间，在ABO血型难以确定（如：ABO血型系统的亚型表型，或其它生理、病理因素引起的ABO血型鉴定困难），生命体征不平稳，危及生命的急性失血的紧急情况下，须向受血者充分告知并取得其书面知情同意可首选主侧交叉配血阴性的O型红细胞与AB型血浆输注；血型确认后，若需继续输血治疗，应重新抽取受血者血液标本做交叉配血，应遵循输注与受血者ABO同型的交叉配血阴性红细胞，若交叉配血阳性则应输注O型红细胞的原则[7]，其中冷自身抗体可采用凝聚胺方法在37℃条件下配血，保温输注可有效提高受血者配血成功率[8]；产生同种抗体时，应及时记录并告知受血者，以后需输血时，即使抗筛阴性也应选择相应抗原阴性的血液输用，避免引起回忆性免疫反应导致溶血性输血反应发生的不良后果[9]。

［1］ 李勇，杨贵贞.人类红细胞血型学实用理论与实验技术[M].北京：中国科学技术出版社,1999：126-127.

［2］ 兰炯采，刘景汉，马丽红.输血前试验中值得研讨的若干问题[J].中国输血杂志，2013，26（1）：1-2.

［3］ 丁苏鄂.抗体效价与同种自身抗体的检测[A]//刘达庄.免疫血液学[M].上海：上海科学技术出版社，2002：39-217.

［4］ 兰炯采，陈静娴，武平英，等.推荐疑难配血三步分析法[J].中国输血杂志，2010，3（4）：43-44.

［5］ 临床输血规范流程协作组.输血相容性试验标准检测流程[J].中国输血杂志，2012，25（9）：815-817.

［6］ 李勇，杨贵贞.人类红细胞血型学实用理论与实验技术[M].北京：中国科学技术出版社,1999,289-290.

［7］ 中国医师协会输血科医师分会，中华医学会临床输血学分会.特殊情况紧急抢救输血推荐方案[J].中国输血杂志，2014，27（1）：1-2.

［8］ 陶翠华，张真路，王文武.高效价冷自身抗体致血型鉴定和交叉配血困难的处理方法[J].临床血液学杂志，2011，24（4）：201-203.

［9］ 孔文兵，赖福才，彭道波，等.红细胞血型不规则抗体与安全输血[J].中国输血杂志，2014，27（9）：929-930.

10.3969/j.issn.1009-4393.2015.35.050

四川 628017 广元市中心血站 (夏富益)