沈明华，张焕邦，黄国发，莫重辉＊

（1.青海大学农牧学院，青海西宁810016；2.青海省湟中县动物卫生监督所，青海湟中811600）

瑞香狼毒（Stellera chamaejasme）是瑞香科狼毒属多年生草本植物，分布广泛，根系发达，吸水吸肥能力强，具有抗干旱、生长迅速、繁殖快等特点。在牧草群落中占据优势地位，与其他植物争夺营养和空间，如果误服、误用，轻者会造成人畜中毒，重者会造成死亡，直接影响到畜牧业生产的发展，是我国天然草原上主要有毒植物之一［1］。

改革开放以来，我国畜牧业生产持续稳定增长，随着社会经济的发展，人们对生态环境、草产品、畜产品等的要求也逐步提高，草地有毒植物的防除和利用受到社会各界的重视，为此政府组织广大农业、生物、医学、化学、毒理、畜牧兽医和草地科技工作者，围绕草地有毒植物及其危害开展了长期的调查研究和广泛的学术交流，在有毒植物鉴定、毒性的确证、毒素分离提取、动物中毒的流行病学、临床诊断、毒草病理、毒理机制以及预防治疗等方面取得很大成果［2－5］。在药用价值方面众多研究表明瑞香狼毒主要含有黄酮类、二萜类、香豆素类及木脂素类化学成分，具有抗肿瘤、抗惊厥、抗癫痫、抗菌、抗病毒、免疫调节及抗氧化等多种药理作用［6－9］。其干燥根可入药，作为传统藏药材，瑞香狼毒在藏医药中的应用历史悠久。近年来国内外学者对瑞香狼毒化学成分和抗肿瘤、抗艾滋病等方面的研究取得了迅速的发展，对其化学成分及药理作用方面的研究也有不少报道，但有关瑞香狼毒对绵羊血液学方面的影响尚未见报道。本试验研究了两种剂量瑞香狼毒对试验羊血液常规指标的影响，以期为瑞香狼毒的毒性效应研究及其开发利用提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 瑞香狼毒 2013年8月采于青海省湟中县土门关乡，采集瑞香狼毒花果期地上部分，阴干，粉碎备用。

1.1.2 试验动物 临床健康试验绵羊8只，雌雄兼有，选自青海省某养殖场。驱除体内外寄生虫，手术植入永久性瘤胃瘘管，待创口愈合后，随机分为2组即瑞香狼毒低剂量组和高剂量组。

1.1.3 仪器设备 MEK－8222K 型血细胞全自动分析仪（日本产）；EDTAK2抗凝管。

1.2 方法

1.2.1 染毒方法 试验前所有试验绵羊空腹称重定为初始体重，低剂量组按2.5g／kg的剂量、高剂量组按5g／kg的剂量称取瑞香狼毒干草粉，拌少量水，每天清晨空腹经瘤胃瘘管一次投服，然后使其自由采食青干草和自由饮水，每只羊每天饲喂150g精料。每天观察试验绵羊饮食、精神状态、运动情况、中毒症状及中毒症状出现的时间并详细记录。连续饲喂32d时停止投服瑞香狼毒粉，并继续观察两周。

1.2.2 检测项目与方法 试验前及试验期间每隔4d颈静脉采集抗凝血，在血细胞全自动分析仪检测白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血红蛋白（Hb）、红细胞压积（HCT）等血液常规指标。

1.2.3 数据处理 所有试验数据的统计分析采用SPSS19.0统计软件。

2 结果

2.1 临床观察结果

所有试验羊在试验期间体重明显下降，但在整个试验期间食欲正常，饮水量增加，表现出轻微的精神沉郁、垂头、喜卧、靠墙站立、眼神呆滞，行动迟缓。在试验第18天左右试验羊开始出现不同程度的腹泻症状，高剂量组试验羊比低剂量组试验羊腹泻较为严重，表现为粪便稀软不成形，粪便污染后肢被毛，试验第19天，低剂量组1只试验羊腹泻死亡，试验第23 天高剂量组1 只试验羊精神沉郁，全身发抖，最后因衰竭而死亡。在试验第32天停止投服狼毒粉后所有试验羊逐渐停止腹泻，精神好转。

2.2 体重变化

由图1可见，低剂量组试验羊在试验第8天开始体重明显降低（P＜0.05）；高剂量组试验羊在第12天开始体重明显降低（P＜0.05），且在整个试验期间体重呈下降趋势。

图1 试验羊体重变化趋势Fig.1 Weight change trend of tested sheep

2.3 血液学指标测定结果

2.3.1 RBC、Hb、HCT 的动态变化 由表1可知，各试验组试验羊血液红细胞（RBC）、红细胞压积（HCT）、血红蛋白（Hb）在整个试验期间没有明显变化（P＞0.05），组间也均无差异（P＞0.05）。

2.3.2 WBC 的动态变化 由表2可知，高剂量组白细胞（RBC）在试验第4天后明显下降（P＜0.05），第20天后又升高（P＞0.05）。

表1 各组试验羊血液红细胞、血红蛋白、红细胞压积的动态变化Table 1 Dynamic changes of red blood cells，lemoglobin and hematocrit of tested sheep in each group

3 讨论

瑞香狼毒是一种含黄酮类化合物的有毒有害植物［2］。常建军等［5］给家兔灌服瑞香狼毒中提取的粗黄酮类化合物后，家兔出现喜卧、不愿运动、精神沉郁等临床表现，试验第6天～第8天出现腹泻，其中3只家兔在试验第7天～第8天出现呼吸困难，表现为昂头张口呼吸，于试验第9天～第10天因呼吸衰竭而死亡。陈永辉等［10］报道从异地新引进的家畜在瑞香狼毒滋生的草地上放牧时，由于其对瑞香狼毒幼苗（芽）的识别能力差，常因误食而发生中毒，多为急性中毒，主要表现为呕吐、腹痛、腹泻、四肢无力、卧地不起、全身痉挛、头向后弯、心悸亢进、粪便带血，严重时虚脱或惊厥死亡。本试验中两种剂量的试验羊在试验期间体重均明显下降，表现出轻微的精神沉郁、垂头、喜卧、靠墙站立、眼神呆滞、行动迟缓等临床表现，在试验第18天左右试验羊开始出现不同程度的腹泻症状，高剂量组试验羊比低剂量组试验羊腹泻较为严重，这与资料报道绵羊瑞香狼毒中毒症状相一致，表明瑞香狼毒对家畜中枢神经系统、消化系统有强烈的刺激作用。

表2 各组试验羊血液中白细胞的动态变化Table 2 Dynamic change of white blood cells of tested sheep in each group

动物血液生理生化指标是反映动物机体状况的重要指标，是动物疾病临床诊断和治疗的重要依据。血液对于维持动物机体的正常生命活动具有极其重要的意义，血液指标能客观地反映动物机体的生理机能及代谢状况。从本试验测定结果来看，各试验组试验羊血液红细胞（RBC）、红细胞压积（HCT）、血红蛋白（Hb）在整个试验期间没有明显变化（P＞0.05），两组之间也无明显变化（P＞0.05），说明这两种剂量下瑞香狼毒对试验绵羊的造血系统尚未造成损伤，仅高剂量组白细胞（RBC）在试验第4天后 明 显 下 降（P ＜0.05），20d 后 又 升 高（P ＞0.05），说明高剂量组瑞香狼毒对试验羊白细胞初期具有一定的抑制作用。

［1］ 李 泉，李俊年，陶双伦，等.狼毒毒性、危害及防治［J］.草业科学，2009，26（4）：99－105.

［2］ 张如刚，刘晓松，哈斯苏荣，等.不同提取方法对瑞香狼毒总黄酮含量的影响［J］.黑龙江畜牧兽医，2010（1）：129－131.

［3］ 罗喜荣，黄 静，杨 军，等.荧光分光光度法测定瑞香狼毒中总黄酮的含量［J］.安徽农业科学，2012，40（17）：9260－9261.

［4］ 韩咏梅，李宏春.不同炮制方法对瑞香狼毒含量和小鼠LD50的影响［J］.中国民族医药杂志，2012（2）：35－36.

［5］ 常建军，莫重辉，代朝艳，等.狼毒有毒成分的提取与毒性试验［J］.黑龙江畜牧兽医，2002（12）：1－2.

［6］ Niwa M，Takamizawa M，Tatematsu H，et al.Piscicidal constituents of Stellera chamaejasme L［J］.Chem P harm Bull，1982，30（12）：4518－4520.

［7］ 何郁芳，谢秀娟，王美英.狼毒的药理作用和化学成分研究进展［J］.河南科技大学学报，2004，22（1）：79－80.

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［9］ 陆 军，马 帅，叶 松，等.中药狼毒提取物对MDR－TB感染小鼠细胞免疫的调节作用［J］.细胞与分子免疫学杂志，2012，28（12）：1279－1281.

［10］ 陈永辉，汪永仓.绵羊狼毒中毒后解毒药物的临床试验［J］.现代农业科技，2007（24）：156－158.