文/张梦瑶

一、引言

生物是一门由实验支撑的科学，其中大量的科学知识都是来自于实验。教材中的生物实验诚然有着无法超越的优点，但是我们在学习的过程中可以不断的探索创新，对课本中的实验进行适当的完善与优化，更加简易的达到学习目标。

二、本实验的作用与意义

在高中生物学习中“绿叶中色素的提取与分离”是其中重要的内容之一。光合作用的知识点是高中生物学习过程中不得不重视的难点与重点［1］。叶绿体是开展光合作用的重要场合，熟练做好叶绿体中色素的提取与离析的实验能够更加深刻的理解光合色素的种类、颜色以及作用，提升自我对光合作用的理解。

三、“绿叶中色素的提取和分离”的实验完善

(一)实验材料与装置的完善

1.实验植物的完善

实验材料由原来的菠菜叶改变成为空心菜。选择空心菜的原因包括其颜色浓绿，叶片较薄，含水量不多，褐变反应不明显，色素含量高，经过研磨后滤液十分浓稠，并且其是一种常见的绿色植物，在进行实验的时候取材比较方便。

图1

2.滤纸纸条的完善

将已经切好并且完成干燥完成的滤纸条进行进一步处理，滤纸条的长度与宽度分别为8cm与1.5cn。在滤纸条的一端剪去两个角，并且在距离该处的1.5cm处，使用毛笔画出一条细线。如图1所示。

3.层析装置的完善

图2

在教材中是使用试管作为层析的装置。虽然试管的口径减小，能够有效减少层析液的发挥，但是由于试管内部空间较小，十分容易导致滤纸条贴壁，从而使得实验失败。现使用层析装置为简易层析瓶。首先，选择100ml的烧杯一个;其次，选择一圆形滤纸，使用小刀在滤纸上刻出间隔均匀的多个缺口，缺口主要用于固定滤纸条;然后，使用透明胶将制作好的滤纸条固定在烧杯口上，当做简易的盖子;最后，在缺口中插入滤纸条。如图2所示。

(二)实验方法的完善

1.研磨方法的完善

基于描画滤液细线的滤液用量不多，因此可以将5g左右的绿叶增加为8g，10ml的无水乙醇降低使用至5ml，以提升色素浓度。为了降低研磨石二氧化硅对色素的吸附，因此可以选择使用白细河沙来进行替代［2］。白细河沙的粉末相对于二氧化硅更加粗大，不易吸附色素。基于降低叶绿素水解酶活性，让绿色能够充分释放色素以及避免无水乙醇挥发的目的，可以使用绿色冷藏、分次研磨、分次加入的方式。使用空心菜叶在进行研磨前冷藏5－6分钟，然后再使用7克空心菜叶再研钵中剪碎。加入CACO31/2药匙，细河沙1/2药匙，快速研磨至泥状，然后在研磨后的叶泥中加入5ml的无水乙醇，再次快速研磨至糊状，让色素能够充分在无水乙醇中溶解，最后将研磨液进行过滤，过得浓绿色的滤液。

2.画线方法的完善

在距离纸条尖端1cm的地方先使用铅笔画一条横线，然后使用新毛笔尖端蘸取少量的滤液，沿着铅笔线痕迹均匀的画出一条滤液线。在滤液线干了之后重复上述步骤3－5次。毛笔画线的用具简易易取，并且可以重复使用，其笔杆较长，可以伸入容器内蘸取滤液，十分便捷［3］。毛笔所画细线平直细长，十分容易晾干，在相同时间里可以重复多次画，以避免画线所吸收色素不足的情况，以使得滤液线能够有足够的色素。使用毛笔多次反复描画亦不会损害滤纸，对于层析分离有一定的好处。

(三)实验步骤的完善

提取绿叶中的色素:选择5g空心菜叶，去除主叶脉，剪碎后放入研钵进行研磨，加入CACO31/2药匙，细河沙1/2药匙，快速研磨至泥状，然后在研磨后的叶泥中加入5ml的无水乙醇，再次研磨后进行过滤，获得滤液。

分离绿叶中的色素:将干燥的定性滤纸按照图1的方式的处理。然后使用毛笔吸取商量的滤液沿着铅笔线均匀多次的画出细线。每次画完后要等待滤液干了之后再重复画，以避免滤液扩散导致滤液线太宽，影响实验结果。将层析液导入建议层析装置中，将画好线的滤纸条插入层析液当中。在10min之后，将滤纸条取出并风干，仔细观察色素以及其颜色，做好实验记录。

四、实验效果

通过实验证明空心菜叶肉质饱满，叶肉组织发达，选择其作为绿叶中色素的提取与分离十分合适，满足实验材料经济优质的原则。低温冷藏绿色后能够降低酶的活性。而使用细河沙来替代二氧化硅分次研磨，严格控制好CaCO3以及细河沙的用量能够有效降低对色素的吸附。放弃使用试管而自制建议层析装置能够同时防止多个滤纸条，并且可以固定位置。简易盖子还能够有效避免层析液的挥发，避免在操作实验的过程中由于错误操作而污染层析液。使用毛笔来画线能够使得滤纸条吸收的叶绿素更加均匀，色素分离快且平整，能够有助于在更短的时间时间内正确认识绿叶色素的种类与含量。

［1］苏晶晶，韩琳，陈德来.“绿叶中色素的提取和分离”实验材料的选择［J］.中学生物教学，2015，(08):63.

［2］郑华.分层导学，打造高效生物实验课堂——以“绿叶中色素的提取和分离”实验为例［J］.新课程 (中学)，2015，(03):82－83.

［3］张姝.谈科学过程技能在高中生物探究性实验教学中的培养——以“绿叶中色素的提取和分离”为例［J］.山东教育学院学报，2010，(02):83－85.