陈玉军 黄佩杰

肝硬化自发性细菌性腹膜炎患者前炎症细胞因子的改变

陈玉军 黄佩杰

目的 探讨肝硬化自发性细菌性腹膜炎(SBP)患者和肝硬化伴无菌性腹水(SA)患者体内前炎症细胞因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α) 、白细胞介素-6(IL-6)的水平及改变的临床意义。方法 采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测 188例肝炎肝硬化腹水患者［其中肝硬化伴有自发性细菌性腹膜炎(SBP组)78例, 肝硬化伴有无菌性腹水(SA组)110例］腹水、血液标本中TNF-α、IL-6水平, 同时应用鲎试剂三肽显色基质偶氮法检测标本内毒素(LPS)水平。同期20例健康体检者作为健康对照组,并对三组LPS、TNF-α、IL-6水平进行比较。结果 SBP组、SA组血浆LPS、TNF-α、IL-6浓度均显著高于健康对照组(P＜0.001)； SBP组腹水LPS、TNF-α、IL-6浓度均显著高于SA组(P＜0.001)；肝硬化腹水患者血浆内毒素与TNF-α、IL-6水平呈正相关(P＜0.05)。结论 肝炎肝硬化腹水患者存在内毒素血症, 肝炎肝硬化腹水患者TNF-α、IL-6水平升高与体内内毒素水平升高有关。

肝硬化；腹水；内毒素；肿瘤坏死因子-α；白细胞介素-6

细胞因子(cytokine, CK)水平对肝硬化患者病情预后起非常重要的作用［1-3］。本研究对肝硬化伴有SBP患者和肝硬化伴SA患者TNF-α、IL-6及与LPS的关系进行了试验性探讨,现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 188例肝炎肝硬化腹水患者, 均为2012年1月～2013年5月本院住院患者, 男104例, 女84例, 平均年龄(50.6±2.5)岁。其中肝硬化伴有自发性细菌性腹膜炎(spontaneous bacterial peritonitis , SBP)78例(SBP组), 肝硬化伴有无菌性腹水(sterile ascitic fluid , SA)110例(SA组)。其中肝硬化诊断标准按《2000年西安传染病与寄生虫病会议修订的诊断标准》［4］。其中肝硬化伴自发性细菌性腹膜炎、肝硬化伴无菌性腹水诊断标准按2000年欧洲肝病年会共识文件制定的标准［5］。选取同期20例健康体检者作为健康对照组。三组一般资料比较, 差异无统计学意义(P＞0.05), 具有可比性。

1.2 生物化学数据的测定 标本的收集及检测操作步骤严格按试剂盒说明进行。所有入选者于入院当日及1周后2次保留血浆标本, -85℃冷藏保存待测。所用检测法及试剂为：TNF-α、IL-6测定采用双抗体夹心ELISA, 试剂盒为双抗体夹心酶联免疫吸附法试剂盒(美国R&D公司) 。LPS测定采用鲎试剂三肽显色基质偶氮法, 试剂盒为显色基质偶氮法鲎试剂盒(上海市医学化验所)。

1.3 统计学方法 采用SPSS18.0统计学软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差( x-±s)表示, 两组间比较采用t检验, 多组间比较采用方差分析；计数资料以率(%)表示, 采用χ2检验；相关性采用Pearson相关分析。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

SBP组、SA组血浆中TNF-α、IL-6、LPS浓度均显著高于健康对照组(P＜0.001)；且SBP组显著高于SA组(P＜0.001)； SBP组腹水LPS、TNF-α、IL-6浓度均显著高于SA组(P＜0.001)。肝硬化腹水患者血浆LPS与TNF-α、IL-6水平呈正相关(P＜0.05)。见表1。

表1 三组血浆、腹水中LPS、TNF-α、IL-6水平的变化( x-±s)

3 讨论

细胞因子参与机体免疫反应进程, 明显影响疾病的转归。TNF-α、IL-6作为非常重要的前炎症细胞因子, 在推动疾病发生发展中起重要作用, 具体机制可能与其可触发细胞因子网络的级联反应, 并与其他炎症介质：如氧自由基、白三烯(LTs)、一氧化氮(NO)、血小板激活因子(PAF)等共同作用有关［6］。

本研究结果表明, 肝炎肝硬化腹水患者中：SBP患者血浆和腹水中TNF-α、IL-6水平最高, 高于SA患者；SA患者又高于健康人。与此前大多数文献报道符合［7-9］。

Tiggelman等［10］体外实验研究证明：血浆内毒素升高可导致血浆TNF-α、IL-6升高。Claudio等［2］研究证明：TNF-α、IL-6在肝硬化腹水严重并发症形成过程中起主要作用。Bradham等［9］研究表明：TNF-α、IL-6在慢性肝病患者中显著升高, TNF-α、IL-6升高可导致感染性休克等重症并发症, 显著影响患者的预后。肝硬化腹水患者血浆及腹水中TNF-α、IL-6水平显著升高的原因, 目前研究认为与内毒素血症激活免疫细胞和肝脏功能下降对CK清除能力下降有关。监测肝炎肝硬化患者血浆和腹水TNF-α、IL-6水平, 有助于早期发现高危肝硬化腹水患者, 改善患者治疗及预后。

本研究结果显示患者血浆及腹水内毒素水平与血浆及腹水TNF-α、IL-6水平呈正相关, 与以上研究相符。尽可能地早期防治肝硬化腹水患者内毒素血症可能明显影响肝硬化腹水患者转归。

［1］ Lichtman SM.Bacterial translocation in humans.J Pediatr Gastroenterl Nutr, 2001, 33(1):1-10.

［2］ Claudio RR, Fatima G, Fernando D, et al.Expression of proinflammatory cytkines and their inhibitors during the course of spontaneous bacterial peritonitis.Dig Dis Sci, 2001, 46(8):1668-1676.

［3］ 赵龙凤, 李红, 韩德五.肠源性内毒素血症与肝脏.世界华人消化杂志, 2000, 8(10):1145-1149.

［4］ 中华医学会传染病与寄生虫病学分会, 肝病学分会.病毒性肝炎防治方案.肝脏, 2000, 5(4):257-263.

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［6］ Such J, Frances R, Perez-Mateo M.Nitric oxide in patients with cirrhosis and bacterial infections.Metab Brain Dis , 2002, 17(4): 303-309.

［7］ 王锦辉, 陈旻湖, 孙光裕, 等.肝硬化患者小肠细菌过度生长与内毒素血症.中华内科杂志, 2002, 41(7):459-461.

［8］ 王雷, 任成山.内毒素与慢性肝病的关系研究进展.中华肝脏病杂志, 2003, 11(4):60-62.

［9］ Bradham CA, Plipe J, Manns MP, et al.Mechanisms of hepatic toxicity.TNF-α induced liver injury.Am J Physiol, 1998, 275(3Pt1):G387-G392.

［10］ Tiggelman AM, Boers W, Linthorst C, et al.Interleukin-6 production by liver fibroblasts in cuture.Evidence for a regulatory role of LPS, IL-1beta and TNF alpha.J Hepatol, 1995, 23(3):295-306.

Changes of pro-inflammatory cytokines in hepatic sclerosis complicated with spontaneous bacterial peritonitis patients

CHEN Yu-jun, HUNAG Pei-jie.Department of Gastroenterology, Henan Anyang City People’s Hosptial, Anyang 455000, China

Objective To investigate clinical significance of level changes of pro-inflammatory cytokines tumor necrosis factor-α (TNF-α) and interleukin-6 (IL-6) in hepatic sclerosis complicated with spontaneous bacterial peritonitis (SBP) patients and hepatic sclerosis complicated with sterile ascites (SA) patients.Methods Double antibody enzyme-linked immune sorbent assays (ELISA) was applied to detect levels of ascites, TNF-α and IL-6 in blood samples of 188 hepatic sclerosis patients.Among them there were 78 cases of hepatic sclerosis complicated with spontaneous bacterial peritonitis (SBP group) and 110 cases of hepatic sclerosis complicated with sterile ascites (SA group).Tachypleus amebocyte lysate tripeptide chromogenic substrate azo method was applied to detect endotoxin (LPS) levels.There were another healthy people at the same period as health control group.Comparisons were made on LPS, TNF-α, and IL-6 levels in the three groups.Results SBP group and SA group both had obviously higher levels of plasma LPS, TNF-α and IL-6 than the health control group (P＜0.001).SBP group had much higher levels of ascites LPS, TNF-α and IL-6 than SA group (P＜0.001).Plasma LPS in hepatic sclerosis ascites patients had positive correlation with TNF-α and IL-6 (P＜0.05).Conclusion Endotoxemia exists in hepatitis cirrhotic ascites patients.Increased TNF-α and IL-6 are related with increased endotoxin in hepatitis cirrhotic ascites patients.

Hepatic sclerosis; Ascites; Endotoxin; Tumor necrosis factor-α; Interleukin-6

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.24.010

2015-03-25］

455000 河南省安阳市人民医院消化内科