程金涛等

[摘要] 目的 探讨血清内皮素（ET）、一氧化氮（NO）在视网膜中央静脉阻塞（CRVO）发病中的作用。 方法 采用放免分析法检测30例CRVO患者和30例健康人及28例无并发症的高血压患者血清ET-1、NO浓度，由专人测定并进行统计学分析。 结果 CRVO组血清中ET-1的浓度与正常对照组和高血压对照组相比明显增高（P<0.01），缺血组与非缺血组比较ET-1浓度显著增高（F值=4.029，P<0.01）；CRVO组血清中NO浓度与正常对照组和高血压对照组相比明显降低，缺血组与非缺血组比较NO浓度显著降低（F值=5.012，P<0.01）。 结论 CRVO患者血清中存在ET浓度的增高和NO浓度的降低，ET和NO参与了CRVO的发病过程，两者在CRVO的发生与发展过程中起重要作用。ET和NO可能反映CRVO患者视网膜缺血的程度。

[关键词] 内皮素；一氧化氮；视网膜中央静脉阻塞

[中图分类号] R774.1 [文献标识码] B [文章编号] 1673-9701（2015）04-0058-03

[Abstract] Objective To clarify the possible involvement of endothelin-1 （ET-1） and nitric oxide（NO） in the pathogenesis of central retinal vein occlusion （CRVO）. Methods ET-1 and NO plasma concentrations were determined by radio immunoassays in a double blind fashion in a group of 30 patients selected with CRVO， in 30 healthy cases and in 28 patients with uncomplicated essential hypertension in the same age range， the data were analyzed statisticly. Results The concentration of ET-1 plasma levels of CRVO patients increased significantly compared with both normal subjects and hypertensive patients（P<0.01）. The higher concentration of circulating ET-1 were found in patients with CRVO of the ischaemic type（F=4.029， P<0.01）. The NO plasma levels of CRVO patients decreased significantly compared with both normal subjects and hypertensive patients. The lower concentration of circulating NO were found in patients with CRVO of the ischaemic type （F=5.012，P<0.01）. Conclusion These findings raise the possibility that the increase of circulating ET-1 levels and the decrease of circulating NO levels in patients with CRVO， ET and NO may be markers of the occlusive event， there by suggesting that ET-1 and NO homeostasis may be relevant to CRVO pathogenesis and retinal ischaemic manifestations.

[Key words] Endothelin-1； Nitric oxide； Central retinal vein occlusion

内皮素（endothelin，ET）是血管内皮细胞分泌的缩血管肽，一氧化氮（nitric oxide，NO）也是来自于内皮细胞的舒血管因子，ET与NO在视网膜自动血管调节系统中起关键作用，维持视网膜血流的稳定 [1，2]。视网膜中央静脉阻塞（central retinal vein occlusion，CRVO）是眼科常见的可致盲视网膜血管性疾患，血管硬化、内皮损伤及血流动力学的改变在该病发病过程中起重要作用[3-5]。ET与NO在心血管疾病方面的研究曾被报道[10]，但是它们在视网膜中央静脉阻塞发病机制中起到何种作用，目前尚不明确，为探讨ET、NO与CRVO的关系，我们选取2012年6月～2013年6月间30例CRVO患者，测定血清中ET及NO浓度，探讨CRVO病变程度与ET、NO的关系。

1资料与方法

1.1临床资料

选择2012年6月～2013年6月在我院眼科门诊就诊的CRVO患者共30例，根据视力、眼底及眼底荧光造影结果分为缺血组与非缺血组，缺血组14例，男8例，女6例；年龄（53±7.9）岁，合并高血压者9例占64.29%；非缺血组16例，男10例，女6例；年龄（52.2±8.1）岁，合并高血压者12例占75.00%。正常对照组30例，男21例，女9例，年龄（49.2±9.3）岁，来自于我院体检中心健康查体者，无眼部异常，无高血压、糖尿病及其他系统疾病。高血压对照组来自于我院内科门诊确诊的原发性高血压患者28例，无高血压并发症，男19例，女9例，年龄（51.3±11.2）岁。

1.2方法

清晨空腹肘静脉取血5 mL，留取标本，置于含10%依地酸二钠30 μl和抑肽酶40 μl的试管内混匀，于2 h内离心分离血清，放置-20℃低温保存。ET-1与NO测定：采用放免分析技术测定，试剂盒由中国原子能科学研究院提供，批内变异<10%。

1.3 统计学方法

采用SPSS for windows 13.0统计学软件对数据进行分析处理，计量资料近似正态分布，以均数±标准差（x±s）表示，组间分析采用单因素方差分析及两两比较用Dunnet t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 CRVO组与对照组血清ET-1、NO浓度比较

从表1可以看出CRVO组血清中ET-1浓度与正常对照组、高血压对照组比较明显增高（单因素方差分析F值=4.693，P<0.01），有高度统计学意义。CRVO组血清中NO的浓度与正常对照组和高血压对照组比较明显降低（F值=4.352，P<0.01），有高度统计学意义。

CRVO组与正常对照组、高血压对照组间ET-1浓度两两比较：CRVO组与正常对照组比较有显著性差异（Dunnet t值=3.22，P<0.01）；CRVO组与高血压对照组比较亦有显著性差异（Dunnet t值=2.78，P<0.01）；高血压对照组与正常对照组比较无显著性差异（Dunnet t值=0.89，P>0.05）。三组间NO浓度两两比较：CRVO组与正常对照组比较有显著性差异（Dunnet t值=3.58，P<0.01）；CRVO组与高血压对照组比较亦有显著性差异（Dunnet t值=3.01，P<0.01）；高血压对照组与正常对照组比较无显著性差异（Dunnet t值=1.02，P>0.05）。

2.2 CRVO患者缺血组、非缺血组血清ET-1、NO浓度比较

从表2可以看出缺血组ET-1浓度与非缺血组比较显著增高（t值=4.029，P<0.01），缺血组NO的浓度与非缺血组比较显著降低（t值=5.012，P<0.01）。

3 讨论

视网膜中央静脉阻塞的发生常为多因素致病，既有血管的异常也有血液成份的改变或血流动力学异常，这些异常造成视网膜血管内皮细胞损伤，从而引起由此分泌的血管活性物质大量释放[3，6，7]。视网膜血管内皮细胞是视网膜血管的半透膜血管屏障，还具有很重要的内分泌作用，它可以合成释放血管活性物质，如内皮舒张因子（NO、前列腺素等）和内皮缩血管因子（ET等），目前认为生理状态下NO和ET在视网膜血管的管径和血流量受体液调节系统中起关键作用[8，9]。

内皮素有三种同源异构体，ET-1是其中收缩血管作用最强的因子[10]，我们选择它做代表研究内皮素在CRVO病变中的作用。NO是一种在细胞间和细胞内起神经递质作用的内源性反应气体[11]。

我们选取在眼科门诊就诊的视网膜中央静脉阻塞患者作为实验观察组，根据视力、眼底检查及眼底荧光造影结果，将观察组患者进一步分为视网膜缺血组与非缺血组，选取同年龄段的健康查体者与单纯性高血压患者作为对照组，排除高血压作为一种因素对实验结果的影响，检测ET-1、NO在CRVO患者血清中的变化。三组患者年龄、性别等组成差异均无统计学意义。为保证结果真实可靠，减少误差，采集标本混合编号后由专门的化验室工作人员进行检验，保证检查结果的可靠性，检验结果使用专用的统计学软件进行统计分析，检验用的试剂盒均由有正规厂家生产，质量可靠。

本次研究表明CRVO组ET-1浓度与正常对照组和高血压对照组比较，单因素方差分析差异有高度统计学意义（F值=4.693，P<0.01）；三组间两两比较用Dunnet t检验：CRVO组ET-1浓度明显高于正常对照组和高血压对照组，差异有统计学意义；正常对照组和高血压对照组ET-1浓度无差异，说明在CRVO患者血清内皮素显著升高，而在健康人及无并发症的单纯高血压患者体内，内皮素无明显升高。CRVO组NO浓度与正常对照组和高血压对照组比较，单因素方差分析差异有统计学意义（F值=4.352，P<0.01）；三组间两两比较用Dunnet t检验：CRVO组NO浓度明显低于正常对照组和高血压对照组，差异有统计学意义，高血压对照组与正常对照组NO浓度比较差异无统计学意义，说明视网膜中央静脉阻塞的患者血清中ET-1浓度增高和NO浓度降低，单独的高血压没有引起血清中ET-1、NO浓度的改变，可能是早期的血压增高还没有引起视网膜内皮细胞的损害，血清中的ET-1、NO浓度与健康人无差别。

CRVO两组间ET-1、NO浓度差异有统计学意义，缺血组的ET-1浓度明显增高和NO浓度明显降低，说明视网膜中央静脉阻塞造成内皮细胞的损伤，内皮细胞分泌的ET增加而NO减少，视网膜缺血对两者影响更大，两者分泌失衡进一步引起视网膜血管功能紊乱，加重病情，影响预后。

由于条件的限制我们未能从CRVO患者玻璃体和视网膜中检测到ET-1、NO的浓度改变，本研究检测到CRVO患者血清中ET-1浓度增高和NO浓度降低，缺血性CRVO患者两者浓度的改变更明显，而单纯的高血压患者血清中ET-1、NO的浓度与健康人无差异，说明ET和NO参与了CRVO的发病过程，两者在CRVO的发生与发展过程中起重要作用。

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（收稿日期：2014-02-19）