王晓飞， 李 辉，2， 刘铭佩， 焦海胜*

（1.兰州大学第二医院，甘肃兰州730030；2.兰州大学药学院，甘肃兰州730000）

锁阳化学成分的研究

王晓飞1， 李 辉1，2， 刘铭佩1， 焦海胜1*

（1.兰州大学第二医院，甘肃兰州730030；2.兰州大学药学院，甘肃兰州730000）

目的研究锁阳的化学成分。方法利用硅胶柱层析、重结晶等方法对锁阳乙酸乙酯部位进行分离纯化，然后通过1H-NMR、13H-NMR、MS等手段鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到9个化合物，经鉴定分别为十八烷酸α-单甘油酯 （1）、β-谷甾醇 （2）、正丁酸 （3）、细梗香草内酯 （4）、胡萝卜苷 （5）、原儿茶酸 （6）、儿茶素（7）、没食子酸 （8）、表儿茶素没食子酸酯 （9）。结论化合物9为首次从该属植物中分离得到，化合物1和3为首次从该植物中分离得到。

锁阳；乙酸乙酯部位；化学成分；分离鉴定

锁阳Cynomorium songaricum Rupr始载于宋朝庞安石所著的 《本草补遗》，别名不老药、地毛球，为锁阳科肉质寄生草本植物，主产于甘肃、内蒙古、新疆。其根茎入药，味甘，性温，具有补肾助阳、润肠通便等功效［1］，其化学成分主要为三萜、黄酮、生物碱和木脂素类等［2］。现代药理研究表明，锁阳具有增强男性生殖能力、抗氧化、抗病毒、抗糖尿病等作用［2］。为了充分利用锁阳资源，本实验系统研究了其乙酸乙酯部位的化学成分，结果从中分离得到9个化合物 （1-9），并通过1H-NMR、13H-NMR、MS鉴定了其结构。

1 仪器、材料与试剂

JNM-ESC400核磁共振仪 （日本电子株式会社）；SMP3高级数字式熔点测定仪（英国Stuart公司）；RE-52AA型旋转蒸发仪 （上海亚荣生化仪器厂）；SHB-Ⅲ型循环水式多用真空泵 （郑州长城科工贸有限公司）；MH-2000型电热套 （北京科伟永兴仪器有限公司）。

锁阳购自兰州安泰堂中药饮片有限公司 （批号为130826）。柱层析硅胶 （200～300目）、GF254薄层层析硅胶 （青岛海洋化工有限公司）；所用试剂均为分析纯 （天津市化学试剂一厂）。

2 提取分离

取锁阳3 kg粉碎，加入95%乙醇30 L，加热回流提取3次，每次2 h，提取液合并后减压浓缩，得到浸膏256 g。将其均匀分散于水中，石油醚萃取6次以脱脂，然后乙酸乙酯萃取6次，萃取液合并后减压浓缩，得到乙酸乙酯部位98 g。将该部位溶解，100 g硅胶 （60～80目）拌样后干法上柱，三氯甲烷-甲醇 （1∶0、99∶1、98∶2、95∶5、9∶1、8∶2、7∶3）梯度洗脱，得到169个组分。其中，组分16～19（纯三氯甲烷洗脱）合并，经硅胶柱反复层析，石油醚-乙酸乙酯 （9∶1）洗脱，重结晶纯化后得到化合物1（10 mg）；组分22～26［三氯甲烷-甲醇 （99∶1）洗脱］合并，重结晶后得到化合物2（25 mg）；组分45～50［三氯甲烷-甲醇 （98∶2）洗脱］合并，经硅胶柱反复层析，石油醚-乙酸乙酯 （8∶2）洗脱，重结晶纯化后得到化合物3（7 mg）；组分62～65［三氯甲烷-甲醇（98∶2）洗脱］合并，经硅胶柱反复层析，石油醚-乙酸乙酯 （75∶25）洗脱，重结晶纯化后得到化合物4（11 mg）；组分70～76［三氯甲烷-甲醇（95∶5）洗脱］合并，重结晶后得到化合物5（35 mg）；组分85～95［三氯甲烷-甲醇 （9∶1）洗脱］合并，经硅胶柱反复层析，三氯甲烷-甲醇（93∶7）洗脱，重结晶纯化后得到化合物6（13 mg）、7（15 mg）、8（25 mg）；组分112～116［三氯甲烷-甲醇 （8∶2）洗脱］合并，经硅胶柱反复层析，三氯甲烷-甲醇 （75∶25）洗脱，重结晶纯化后得到化合物9（17 mg）。

3 结构鉴定

化合物1：无色针状结晶 （乙酸乙酯），mp 67～69℃，ESI-MS m/z 381.0［M+Na］+。HNMR（CDC13，400 MHz）δ：4.16（2H，m，H-1），3.91（1H，m，H-2），3.66（1H，m，H-3α），3.80（1H，m，H-3β），2.33（2H，t，J=7.5 Hz，H-5），2.00（2H，m，H-6），1.59（2H，m，H-7），1.23～1.31（28H，m，H-8～20），0.86（3H，t，J=7.5 Hz，H-21）。13C-NMR（CDC13，100 MHz）δ：174.5（C-4），70.3（C-2），65.2（C-1），63.4（C-3），34.2（C-5），32.0（C-6），22.8～29.8（C-7～20），14.2（C-21）。以上数据与文献 ［3］报道基本一致，故确定化合物1为十八烷酸α-单甘油酯。

化合物2：无色针状结晶 （乙酸乙酯），mp 135～137℃。与β-谷甾醇对照品在TLC上的Rf值一致，而且混合后熔点不下降，故确定化合物2为β-谷甾醇。

化合物3：无色针状结晶 （丙酮），mp 109～111℃。1H-NMR（Acetone-d6，400 MHz）δ：4.30（1H，d，J=8.7 Hz，H-2），4.12（1H，m，H-4），3.83（1H，t，J=8.0 Hz，H-3），1.36（3H，d，J= 6.2 Hz，H-5）。13C-NMR（Acetone-d6，100 MHz）δ：173.8（C-1），79.5（C-3），76.6（C-4），74.5（C-2），17.4（C-5）。以上数据与文献 ［4］报道基本一致，故确定化合物3为全顺式-5-脱氧戊糖酸-γ-内酯，又名细梗香草内酯。

化合物4：无色针状结晶 （丙酮）。1H-NMR（Acetone-d6，400 MHz）δ：2.25（2H，t，J=7.4 Hz，H-3），1.56（2H，m，H-2），1.32（3H，s，H-1）。13C-NMR（Acetone-d6，100 MHz）δ：173.8（C-4），33.3（H-3），30.4（H-2），24.7（H-1）。以上数据与文献 ［5］报道基本一致，故确定化合物4为正丁酸。

化合物5：无色粉末 （甲醇），mp 285～286℃。与胡萝卜苷对照品在TLC上的Rf值一致，而且混合后熔点不下降，故确定化合物5为胡萝卜苷。

化合物6：无色针状结晶 （甲醇），mp 180～188℃。1H-NMR（Acetone-d6，400 MHz）δ：7.50（1H，d，J=2.0 Hz，H-2），7.44（1H，dd，J= 8.3，2.4 Hz，H-6），6.86（1H，d，J=8.3 Hz，H-5）。13C-NMR（Acetone-d6，100 MHz）δ：166.6（C-7），149.8（C-4），144.6（C-3），122.8（C-6），122.3（C-1），116.6（C-2），114.8（C-5）。以上数据与文献 ［6］报道基本一致，故确定化合物6为3，4-二羟基苯甲酸，又名原儿茶酸。

化合物7：淡黄色针状结晶 （甲醇），mp 254～256℃。1H-NMR（Acetone-d6，400 MHz）δ：6.86（1H，d，J=1.8 Hz，H-2＇），6.73（2H，m，H-5＇，6＇），5.99（1H，d，J=2.2 Hz，H-8），5.84（1H，d，J=2.2 Hz，H-6），4.52（1H，d，J=7.5 Hz，H-2），3.97（1H，m，H-3），2.87（1H，dd，J= 16.0，5.3 Hz，H-4α），2.49（1H，dd，J=16.1，8.2 Hz，H-4β）。13C-NMR（Acetone-d6，100 MHz）δ：156.9（C-5），156.4（C-7），156.1（C-9），144.9（C-3＇），144.8（C-4＇），131.3（C-1＇），119.2（C-6＇），114.8（C-2＇），114.4（C-5＇），99.8（C-10），95.3（C-6），94.6（C-8），81.9（C-2），67.5（C-3），28.0（C-2）。以上数据与文献 ［7］报道基本一致，故确定化合物7为儿茶酸。

化合物8：无色针状结晶 （甲醇），mp 239～241℃。1H-NMR（Acetone-d6，400 MHz）δ：7.11（2H，s，H-2，6）。13C-NMR（Acetone-d6，100MHz）δ：166.8（C-7），145.1（C-3，5），137.7（C-4），121.2（C-1），109.1（C-2，6）。以上数据与文献［8］报道基本一致，故确定化合物8为没食子酸。

化合物9：淡黄色胶状物质 （甲醇），ESI-MS m/z 465.1［M+Na］+，907.1［2M+Na］+。1HNMR（DMSO-d6，400 MHz）δ：6.82（1H，d，J= 1.8 Hz，H-2＇），6.78（1H，s，H-2＇＇，6＇＇），6.72（1H，dd，J=8.2，2.0 Hz，H-6＇），6.61（1H，d，J=8.2 Hz，H-5＇），5.89（1H，d，J=2.2 Hz，H-6），5.79（1H，d，J=2.2 Hz，H-5），5.32（1H，m，H-3），4.98（1H，m，H-2），2.90（1H，dd，J= 17.4，4.6 Hz，H-4β），2.64（1H，m，H-4α）。13CNMR（DMSO-d6，100 MHz）δ：165.7（C-7＇＇），157.1（C-9），157.0（C-5），156.1（C-7），145.9（C-3＇＇，5＇＇），145.3（C-5＇），145.2（C-4＇），139.1（C-4＇＇），129.3（C-1＇），119.8（C-1＇＇），118.1（C-6＇），115.6（C-2＇），114.8（C-3＇），109.2（C-2＇＇，6＇＇），97.9（C-10），96.1（C-8），94.9（C-6），77.0（C-2），68.6（C-3），25.0（C-4）。以上数据与文献 ［9］报道基本一致，故确定化合物9为表儿茶素没食子酸酯。

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Chem ical constituents from Cynomorium songaricum Rupr

WANG Xiao-fei1， LIHui1，2， LIU Ming-pei1， JIAO Hai-sheng1*

（1.Lanzhou University Second Hospital，Lanzhou 730030，China；2.College of Pharmacy，Lanzhou University，Lanzhou 730000，China）

AIMTo study the chemica1constituents from Cynomorium songaricum Rupr.METHODSSi1ica ge1co1umn and recrysta11ization were used to iso1ate and purify the ethy1acetate portion of C.songaricum.Then their structures were identified by1H-NMR，13H-NMR and MS.RESULTSNine compounds were iso1ated and identified as stearic acidα-monog1yceride（1），β-sitostero1（2），n-butyric acid（3），dapi11ip1actone（4），daucostero1（5），protocatechuic acid（6），catechin（7），ga11ic acid（8）and epicatechin ga11ate（9）.CONCLUSIONCompound9is iso1ated from this genus for the first time.Compounds1and3are first1y iso1ated from this p1ant.

Cynomorium songaricum Rupr；ethy1acetate portion；chemica1 constituents；iso1ation and identification

R284.1

A

1001-1528（2015）08-1737-03

10.3969/j.issn.1001-1528.2015.08.023

2014-12-01

中央高校基本科研业务费专项资金 （1zujbky-2013-46）；兰州大学第二医院院内中医药项目 （YJzy2013-14）

王晓飞 （1982—），男，博士，从事天然药物化学研究。Te1：（0931）8942491，E-mai1：wxf-2511@163.com

*通信作者：焦海胜 （1963—），男，教授，硕士生导师，从事药物新剂型、新技术研究工作。Te1：（0931）8942571，E-mai1：1deyjhs @sohu.com