陈科力,李 芳,刘义梅,靳李娜,崔瑞勤

(湖北中医药大学 药学院, 武汉 430065)

木瓜为蔷薇科植物贴梗海棠Chaenomelesspeciosa(Sweet) Nakai 的干燥近成熟的果实，味酸性温，归肝、脾经，具有舒筋活络、健脾开胃、祛风除湿等功效，主要用于治疗湿痹拘挛、腰膝关节酸重疼痛、吐泻转筋、脚气水肿等[1].木瓜长期以来一直作为传统中药使用，也是一种可食用的中药品种，含有黄酮类、有机酸类、多糖类、萜类、皂苷类等多种化学成分[2-5]，其中主要成分熊果酸和齐墩果酸具有显著的抗炎和抗氧化作用，具有较好的保健功效.木瓜是药食两用的品种，但对木瓜重金属残留的测定研究尚未见文献报道，本文参照中国药典2010年版附录重金属测定法及相关方法[1]，对产于湖北长阳榔坪镇资丘木瓜基地的皱皮木瓜药材进行了3种重金属的含量测定，旨在了解资丘木瓜药材的安全性，为其质量控制提供科学依据.

1 仪器、试药与材料

1.1 仪器

原子分光光度计(AA-7003W北京东西分析仪器有限公司)，铜、铅、镉空心阴极灯(北京东西分析仪器有限公司)，电子分析天平(德国赛多利斯Sartorius BP61S电子天平)，电子万用炉(北京市永光明医疗仪器厂)，马弗炉(天津市泰斯特仪器有限公司).

1.2 试剂

铜、铅、镉单元素标准溶液(1000μg /mL)，购于阿拉丁(aladdin)试剂公司，批号分别为1313090、8329073、1301021.硝酸(GR)，高氯酸(GR)，超纯水.

1.3 样品

资丘木瓜药材样品2013年7月采自湖北长阳县榔坪镇的3个产区(关口垭、燕子崖、渠安头)，每区取样2份.

2 实验方法与结果

2.1 样品预处理

将采集的木瓜样品用双蒸水洗净，置沸水中烫至外皮灰白色，对半纵剖晒干，然后将样品粉碎，于65℃烘12h，备用.

2.2 消解方法

取供试品粗粉1g，精密称定，置凯氏烧瓶(250mL)中，加硝酸-高氯酸(4:1)混合溶液10mL，混匀，瓶口加一小漏斗，浸泡过夜(约10h).置电炉上加热消解，保持微沸，持续加热至溶液澄明后升高温度至冒浓烟，直至白烟散尽，消解液呈无色透明，放冷，转入25mL量瓶中，用2%硝酸溶液适量洗涤容器，洗液合并于量瓶中，并稀释至刻度，摇匀即得.以相应试剂同法同时制备空白溶液.

2.3 测定方法

采用火焰原子吸收法测定样品中铜，采用石墨炉原子吸收法测定样品中的铅和镉，具体操作参照《中华人民共和国药典》2010年版一部附录ⅨB，经试验选择的最佳测定条件见表1、表2.

表1 原子吸收法测定铜、铅、镉的最佳测定条件

表2 石墨炉升温程序 Tab.2 Temperature program of graphite furnace

2.4 方法学考察

2.4.1 线性关系考察

精密量取铜、铅、镉、汞、砷标准储备液适量，用2%硝酸溶液分别配制成每1mL含铜0.0、0.1、0.5、1.0、2.0、3.0 μg的溶液，含铅0.0、0.1、0.5、1.0、1.5、2.0 ng的溶液，含镉0.0、0.1、0.5、0.8、1.0、2.0 ng的溶液，在最佳测定条件下，按照各自测定方法测定吸光度A.以浓度C为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线.计算回归方程，结果见表3.

表3 铜、铅和镉的线性回归方程Tab.3 Linear regression equation of Cu Pb and Cd

2.4.2 检测限确定

对消化处理的空白溶液分别测定11次，按空白信号标准偏差(S)的3倍计算检测限.结果铜的检测限0.0006μg/mL，铅的检测限为0.0030ng/mL，镉的检测限为0.0024 ng/mL.

2.4.3 精密度试验

取线性关系考察项下的铜标准溶液(1.0μg/mL)、铅标准溶液(1.0ng/mL)、镉标准溶液(0.8ng/mL)，分别在各自最佳条件下测定吸光度，各测5次，求5次测定结果的相对标准偏差(RSD)，结果铜、铅、镉的精密度的RSD分别为0.7%、2.4%、2.2%(n=5).

2.4.4 稳定性试验

按2.4.1项下的方法分别制备铜标准溶液(1.0μg/mL)、铅标准溶液(1.0ng/mL)、镉标准溶液(0.8ng/mL)，分别在各自最佳条件下的0h、2h、4h、8h、10h时测定吸光度，计算相对标准偏差(RSD).结果铜、铅、镉的RSD分别为0.5%、2.2%、2.3%(n=5).

2.4.5 重现性试验

取同一批样(关口垭村)，平行制备5份供试品溶液，依照各自方法在各自最佳条件下测定吸光度，结果铜、铅、镉的RSD分别为2.7%、2.9%、1.2%(n=5).

2.4.6 加样回收试验

精密量取已知铜含量的同一批样品供试液(关口垭村)适量，分别精密加入含等量的铜标准液6份，按供试品溶液测定方法测定.同法对关口垭村木瓜分别加含等量铅、镉标准液各6份，按各自方法测定.结果见表4.

表4 铜、铅、镉加样回收试验结果(n=6)

2.5 样品含量测定

按上述规定的方法制备各样品供试液，按2.3项下的方法测定，每个样品各取2份，测定5次，取平均值作为测定结果.结果见表5.

表5 3批木瓜中重金属含量

3 讨论

本文参照药典法及相关方法建立了资丘木瓜3种重金属的原子吸收分光光度测定法，确定了检测限.方法学考察表明，测定铜和铅、镉的标准曲线的线性相关系数r分别大于0.999和0.990；回收率为100%～105%；测定变异系数RSD分别为2.7%、2.9%、1.2%(n=5)；该选定的方法具有较好的稳定性和精密度.在选择消解方法时，由于干法消解得到的供试品溶液有残渣，并且同一样品测定5次结果的RSD值为9.09%，偏差太大不符合要求，所以本文采用湿法用于木瓜的消解.

产于湖北宜昌的榔坪镇的资丘木瓜是我国著名的药食两用道地药材，依据《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》的规定：重金属总量≤20.0mg/kg,其中Cu≤20.0 mg/kg，Pb≤5.0mg/kg，Cd≤0.3mg/kg.由本文测定结果(表5)可知，采自宜昌资丘木瓜种植基地的3批资丘木瓜样品(关口垭村、燕子岩村、渠安头村)，其3种重金属的含量均符合此规定.

参 考 文 献

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[S].北京，化学工业出版社,2010:57,附录48-50.

[2] 吴 虹,魏 伟,吴成义.木瓜化学成分及药理活性的研究[J].安徽中医学院学报,2004,23(2):62.

[3] 严睿文,张秀真,陈 勤.宣木瓜中齐墩果酸的分离提取及含量测定[J].现代科学仪器.2008(05):83-85.

[4] 韩立敏.木瓜有效成分的研究[J].安徽农业科学.2009,37(23):10969-10970.

[5] 吕美红,谢晓梅,查孝柱,等.反相高效液相色谱法测定木瓜药材及饮片齐墩果酸和熊果酸含量[J].安徽中医学院学报,2010, 29(3):72.