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犍为姜黄不同采收期姜黄素类成分差异探析

2014-04-26宋玉丹王书林

亚太传统医药 2014年18期
关键词:采收期甲氧基姜黄

宋玉丹,王书林,余 弦

(成都中药大学 峨眉学院,四川 峨眉山 614201)



犍为姜黄不同采收期姜黄素类成分差异探析

宋玉丹,王书林*,余 弦

(成都中药大学 峨眉学院,四川 峨眉山 614201)

目的:通过实验的方法确定犍为姜黄的最佳采收期。方法:采用HPLC法,使用流动相为乙腈-0.3%磷酸水溶液(40∶60)测定不同采收期犍为姜黄中姜黄素类成分(姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素)的含量。结果与结论:12月份所采的姜黄中所含姜黄素类成分最高,确定12月份为姜黄的最佳采收期。

犍为姜黄; HPLC;姜黄素类成分;采收期;含量

姜黄是一味广泛应用的中药, 2010年版中国药典收载,姜黄为姜科植物姜黄(CurcumalongaL.)的地下根茎部分[1],又名黄姜、宝鼎香等。姜黄味辛、苦,性温,据本草上记载,姜黄能行气破瘀、通经止痛,主治胸腹胀痛、肩臂痹痛、月经不调、闭经、跌打损伤等。近年来研究表明,姜黄能够逆转肿瘤细胞的耐药性,有效增强放射线对肿瘤的作用,所以其对肝癌、肺癌、结肠癌、宫颈癌、卵巢癌、乳腺癌有一定的抑制作用,而主要起作用的是姜黄中姜黄素类成分。姜黄素类是以醇溶性二苯基庚烃类化合物姜黄素、去甲氧基姜黄素和双去甲氧基姜黄素等三种组分为主的混合物,而姜黄素类成分的含量也是评价姜黄质量的重要指标。四川犍为是姜黄的道地产区,有几百年的种植历史,当地的药农只是根据自己的经验,在姜黄地上部分枯萎后将其采收,本研究通过HPLC方法确定姜黄的最佳采收期,以确保其质量。

1 实验部分

1.1 试剂与仪器

姜黄素对照品(纯度≥99%):去甲氧基姜黄素对照品(纯度≥99%):双去甲氧姜黄素对照品,购于成都贝斯特试剂有限公司。水为UP级纯水,乙腈为色谱纯;姜黄药材采集于犍为县新民镇,经四川省食品药品学校王书林教授鉴定为姜科植物姜黄。

Waters2695高效液相色谱仪,Waters2996紫外检测器(天津市瑞谱电子仪器公司),超声波清洗仪,高速中药粉碎机(HX-500A,浙江省永康市溪岸五金药具厂),数显鼓风干燥箱(GZX-9140MBE,上海博迅实业有限公司医疗设备厂)。

1.2 实验方法

1.2.1 色谱条件 Aglilent Bxtend C18(5μm,4.6mm×150mm)色谱柱;柱温:25℃;流速:0.8mLmin;进样量:10μL;流动相:乙腈-0.3%磷酸水溶液(40∶60);检测波长:254nm,在此条件下姜黄素类成分能够很好地分开。

1.2.2 对照品溶液制备 取姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1mL含10μL的溶液,即得。

1.2.3 供试品溶液制备 将5个不同采收期所采集的姜黄药材于60℃烘箱中干燥,粉碎,过5号筛,精密称定过筛后的细粉约0.2g,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇10mL,称定重量,超声30min(20℃,70Hz),放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,离心,精密量取上清液1mL,置10mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。

1.2.4 线性关系考察 将姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素对照品分别用甲醇稀释成0.01、0.02、0.04、0.06、0.08(mgmL),按上述色谱条件,进样10μL,测定其峰面积。以峰面积积分值为纵坐标,浓度为横坐标,进行回归处理,得其三种对照品的回归方程分别为Y=1 585.7X-428.6,R2=0.999 1;Y=2 018.4X-257.3,R2=0.999 3;Y=1 320.3X-568.1,R2=0.999 8,结果表明,姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素在10~80μg/mL范围内线性关系良好。

1.2.5 稳定性考察 取姜黄素类化合物对照品溶液,按上述色谱条件,分别在0、2、4、6、8、10h,进样10μL,测得其峰面积,三种对照品溶液测得的RSD分别为1.12%、1.05%、0.98%(n=5),结果表明,三种物质在10h内稳定。

1.2.6 精密度考察 精密吸取姜黄素类化合物对照品溶液,按上述色谱条件,重复进样5次,进样量为10μL,测定其峰面积积分值,RSD分别为0.98%、1.04%、1.12%,表明精密度良好。

1.2.7 重现性考察 取同一批姜黄样品,按“1.2.2”的方法制备供试品溶液5份,按上述色谱条件测定,观察各色谱峰保留时间的一致性,姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素各色谱峰保留时间的RSD均小于2%,说明提取方法和检测方法重现性良好。

1.2.8 不同采收期含量测定 将不同采收期所制得的供试品溶液按上述色谱条件进样,所得色谱如图1-图4所示,按外标一点法由各峰面积计算得出不同采收期样品中姜黄素类成分的含量。见表1、图5。

图1 姜黄素对照品色谱

图2 去甲氧基姜黄素对照品色谱

图3 双去甲氧基姜黄素对照品色谱

图4 姜黄样品色谱(1:双去甲氧基姜黄

样品编号姜黄素含量(mg/g)去甲氧基姜黄含量(mg/g)双去甲氧基姜黄素量(mg/g)总含量(mg/g)采集时间13.771.410.926.112013.10.2224.331.821.267.442013.11.1534.612.221.398.192013.12.2540.770.760.382.892014.01.0451.610.560.422.592014.02.11

图5 姜黄素类成分总含量变化趋势

由图5可知姜黄素类成分在12月下旬达最大值,所以姜黄的最佳采收期为12月下旬。

2 讨论

根据实验所得数据,姜黄最佳采收期为12月下旬,而当地药农的采收时间一般为冬至过后,这与实验所得最佳采收期12月下旬时间无较大差异,而次年采收的姜黄质量并没有当年12月下旬采收的质量好。此实验让药农更清楚采收的期限,保证姜黄的质量。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].一部.北京:化学工业出版社,2010.

(责任编辑:魏 晓)

Difference Analysis of Curcumin Content of Jianwei Turmeric at Different Harvest Time

Song Yudan,Wang Shulin,Yu Xian

(Sichan Food and Durg School,E’meishan 614201,China)

Objective:determining the optimal harvest time of jianwei Curcuma.Methods:Using HPLC to determine the content of Ingredients like curcumin (curcumin, Demethoxycurcumin, Bisdemethoxycurcumin) of the different harvest time of jianwei Curcuma, determining the optimal harvest time of jianwei Curcuma.Results and Conclusion:The highest curcumin turmeric ingredients contained therein adopted in December, determining that the December is the best harvest time ofCurcumalongaL.

Jianwei Curcuma;HPLC;Ingredients Like Curcumin;Harvest Time;Content

2014-05-04

乐山市2013年重点科技计划项目(13SZD141)

宋玉丹(1989-),女,成都中药大学峨眉学院硕士研究生,研究方向为中药品种、质量与资源开发。

王书林(1951-),男,成都中药大学峨眉学院教授、博士生导师,研究方向为中药品种、质量与资源开发。E-mailwslgap@163.com。

R284

A

1673-2197(2014)18-0006-02

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