张蕾　邢绍芝　张婷婷　赵磊磊

【摘要】 目的 研究分析甲胎蛋白对PTEN活性产生抑制引起肝癌细胞耐受ATRA发生凋亡。方法 选取2012年11月～2013年11月期间本院诊治36例肝癌患者， 将患者术后肝癌细胞制成标本。结果 人体肝癌HepG2与Bel 7402细胞均存在PTEN表达， 经160 μmol/L的ATRA处理24 h后可加强这些细胞的PTEN的表达。Co-IP技术实验得知甲胎蛋白可与PTEN相结合， 最终对ATRA产生影响。结论 肝癌细胞中表达的甲胎蛋白可与PTEN相结合， 最终发现AFP为肝癌细胞耐受ATRA的重要因子。

【关键词】 甲胎蛋白；PTEN活性；肝癌细胞；ATRA

肝癌是人类健康最大的威胁疾病中的一种， 因为受到病毒性肝炎、环境等有关因素的影响， 导致肝癌发病的机率逐渐升高。因为肝癌细胞会出现再生、转移， 同时癌细胞对药物存在一定的耐受， 从而增加了治疗难度。因此， 充分掌握肝癌耐药因子的机制， 对临床肝癌的治疗十分重要。甲胎蛋白（简称AFP）是肝癌细胞合成的具有很高特异性的蛋白质之一， 绝大多数肝癌患者在发病期会产生AFP基因高表达的特点， 并且AFP是肝癌诊断的金标准。有资料指出， 肝癌细胞产生的AFP能加强肿瘤细胞增殖与诱导肿瘤细胞的双重作用。PTEN则是将3-磷酸肌醇（简称PIP3）水解成2-磷酸肌醇（简称PIP2）的磷酸酶， 同时可以避免3-磷酸肌醇激酶（简称PI3K）磷酸化蛋白激酶B（简称PKB/AKT）， 导致PI3K/AKT信号传导被中断， 可见是一种非常关键的抑癌基因。AFP的生物学性质可能还存在对ATRA抗凋亡产生诱导作用， 但是肝癌细胞合成的AFP在机体中肝癌细胞耐受凋亡过程具体发挥的作用报道较少， 现本次研究进一步探讨AFP在人体肝癌细胞中对PTEN活性产生的影响， 总结如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取2012年11月～2013年11月期间本院诊治36例肝癌患者， 并在患者术后肝癌组织中提取HLE、HepG2、Bel 7402细胞加以培养。实验蛋白质材料：ser 473多克隆抗体、兔抗人AKT/PKB多克隆抗体、小鼠抗人AFP 单克隆抗体均源自PS公司。Β-Actin单克隆抗体及鲁米诺试剂源自SC公司。兔抗人PTEN多克隆抗体由美国实验室视觉公司生产。二抗是羊抗兔多克隆抗体、辣根过氧化物酶连接的羊抗鼠。FITC标记的羊抗兔与TRITC标记的羊抗小鼠二抗由美国杰克逊IR公司生产。RNA干扰试剂盒， 即癌/ GFP / Neo si-RNA表达载体试剂盒由上海吉玛公司提供。Ly294002及ATRA由Sigma提供。pcDNA3.1载体源自广州泰盛公司。

1. 2 方法 应用Western blotting法对全反式维甲酸（简称ATRA）进行分析并处理人体肝癌HepG2、Bel 7402细胞24 h后， PTEN表达产生变化的情况[2]。通过免疫共沉淀（简称Co-IP）技术分析PTEN与AFP之间相互作用。应用激光共聚焦显微镜监测PTEN与AFP在细胞内的共定位情况。通过RNA干扰（即指RNAi）技术对AFP的表达产生抑制作用， 然后采用ATRA处理24 h后， 检测细胞中PTEN表达发生变化的情况， 同时研究蛋白激酶B（简称AKT）的磷酸化程度。再利用pcDNA3.1质粒、人体afp基因连接组成表达AFP的载体（简称pcDNA3.1-afp）， 最后转染成不表达AFP的人体肝癌HLE细胞。

1. 3 统计学方法 运用统计学软件SPSS16.0对组间试验研究数据加以统计学分析， 应用t法对组间计量资料进行检验， 应用χ2检验对组间计数资料进行检验。如若对比差异P<0.05， 则充分表明组间差异有统计学意义。

2 结果

人体肝癌HepG2、Bel 7402细胞均存在PTEN的表达， 通过160 μmol/L浓度的ATRT处理24 h后可加强这些肝癌细胞内PTEN的表达。经Co-IP技术实验可知AFP可与PTEN相结合。采用共聚焦纤维镜监测发现PTEN与AFP之间共定位在细胞浆。在干扰AFP表达以后， 发现PTEN表达显著升高， 表达前后具有统计学差异。而抑制AFP表达以后，ATRA可明显增强Bel 7402细胞中PTEN的表达， 同时可以使AKT磷酸化受到抑制。当转染pcDNA3.1-afp载体以后， 肝癌HLE细胞中存在AFP表达， 同时能和PTEN相结合， 由此可知pcDNA3.1-afp载体可以促进AKT磷酸化（即为p-AKT）， 从而对抗ATRA使HLE细胞增殖受到抑制。详见表1、图1～3。

3 讨论

肝癌细胞中出现AFP高表达的现象， 可能与癌细胞在体内过度的生殖、转移以及侵袭存在很大关系。有资料指出使AFP表达被抑制， 可以诱导肝癌细胞逐渐凋亡。AFP同细胞中的部分信息物质相互结合， 进而对凋亡信息的传导产生影响。其中， AKT、PTEN以及AFP表达的检测， 能分析出AFP与AKT磷酸化、PTEN功能之间的关系[3， 4]。本次研究得出人体肝癌HepG2、Bel 7402细胞、HLE内均存在PTEN表达。但HepG2、Bel 7402细胞高表达AFP， HLE细胞则不表达AFP。AKT为肝癌细胞传递、生长信号的重要因子， 在癌细胞生长期间起到中心信息物质的作用， 所以AKT活化程度说明癌细胞生长旺盛。本次研究得出， 人体内肝癌Bel 7402细胞由于受到ATRA作用， 以至于PTEN表达明显提高， 由此得知PTEN基因可以在肝癌细胞内有效被激活。通过免疫共沉淀技术发现肝癌细胞产生的AFP能够与PTEN相互结合， 组合成复合体。进一步表明PTEN与AFP之间具有相互作用的可能。利用共聚焦纤维镜监测Bel 7402细胞内的PTEN、AFP可见， 其多分布在细胞浆内， 仅有一小部分PTEN蛋白分布在细胞核中， 由此表明PTEN蛋白与AFP在细胞浆内能够出现共定位现象。

AFP可通过下面两种途径对PTEN磷酸化作用造成抑制[5， 6]：①AFP可抑制PTEN表达， 以利于降低PTEN水解生成PIP3。②AFP能够与PTEN相互结合， 利用两者之间的互相作用， 对PTEN磷酸酶活性产生抑制， 使AFP能够最快速度的使PI3K/AKT信号被激活。可见AFP对PI3K/AKT信号激活的过程， 考虑是AFP强化癌细胞生殖、转移以及侵袭的主要机制[7]。AFP的生物学性质能够对信息分子样产生调节作用。因为PTEN正常表达情况下， 可以增强癌细胞对药物的敏感性， 可见靶向干扰AFP表达能有效诱导肝癌细胞凋亡， 并且抑制AFP强化癌细胞生长的新的有效策略。

参考文献

[1] 朱明月，符史干，李孟森，等.甲胎蛋白抑制 PTEN 活性导致肝癌细胞耐受 ATRA 诱导的凋亡.生物化学与生物物理进展， 2011， 38（3）：227-238.

[2] 米登海.PTEN与VEGF在原发性肝细胞癌中的表达及相互作用.华中科技大学， 2010，12（20）：132-133.

[3] 王丽.抑癌基因PTEN在肝癌组织中的表达及HCV核心蛋白对PTEN作用的研究.第四军医大学， 2010，12（10）：455-456.

[4] 姚悦萍，王娟华，陆忠华，等.血清甲胎蛋白异质体对肝细胞癌的诊断意义.实用肝脏病杂志， 2011，23（4）：541-542.

[5] 陈伟.抑癌基因PTEN、p27在肝细胞性肝癌组织中的表达及临床相关性研究.安徽医科大学， 2010，23（13）：557-559.

[6] 沈慧.原发性肝癌中PTEN蛋白表达及其与HBV感染的关系.山西医科大学， 2010，22（11）：821-825.

[7] 秦敏. PTEN、p-Akt在白藜芦醇抑制人肝癌细胞增殖与促进其凋亡中的作用.河北医科大学， 2010，14（10）：451-453.

【摘要】 目的 研究分析甲胎蛋白对PTEN活性产生抑制引起肝癌细胞耐受ATRA发生凋亡。方法 选取2012年11月～2013年11月期间本院诊治36例肝癌患者， 将患者术后肝癌细胞制成标本。结果 人体肝癌HepG2与Bel 7402细胞均存在PTEN表达， 经160 μmol/L的ATRA处理24 h后可加强这些细胞的PTEN的表达。Co-IP技术实验得知甲胎蛋白可与PTEN相结合， 最终对ATRA产生影响。结论 肝癌细胞中表达的甲胎蛋白可与PTEN相结合， 最终发现AFP为肝癌细胞耐受ATRA的重要因子。

【关键词】 甲胎蛋白；PTEN活性；肝癌细胞；ATRA

肝癌是人类健康最大的威胁疾病中的一种， 因为受到病毒性肝炎、环境等有关因素的影响， 导致肝癌发病的机率逐渐升高。因为肝癌细胞会出现再生、转移， 同时癌细胞对药物存在一定的耐受， 从而增加了治疗难度。因此， 充分掌握肝癌耐药因子的机制， 对临床肝癌的治疗十分重要。甲胎蛋白（简称AFP）是肝癌细胞合成的具有很高特异性的蛋白质之一， 绝大多数肝癌患者在发病期会产生AFP基因高表达的特点， 并且AFP是肝癌诊断的金标准。有资料指出， 肝癌细胞产生的AFP能加强肿瘤细胞增殖与诱导肿瘤细胞的双重作用。PTEN则是将3-磷酸肌醇（简称PIP3）水解成2-磷酸肌醇（简称PIP2）的磷酸酶， 同时可以避免3-磷酸肌醇激酶（简称PI3K）磷酸化蛋白激酶B（简称PKB/AKT）， 导致PI3K/AKT信号传导被中断， 可见是一种非常关键的抑癌基因。AFP的生物学性质可能还存在对ATRA抗凋亡产生诱导作用， 但是肝癌细胞合成的AFP在机体中肝癌细胞耐受凋亡过程具体发挥的作用报道较少， 现本次研究进一步探讨AFP在人体肝癌细胞中对PTEN活性产生的影响， 总结如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取2012年11月～2013年11月期间本院诊治36例肝癌患者， 并在患者术后肝癌组织中提取HLE、HepG2、Bel 7402细胞加以培养。实验蛋白质材料：ser 473多克隆抗体、兔抗人AKT/PKB多克隆抗体、小鼠抗人AFP 单克隆抗体均源自PS公司。Β-Actin单克隆抗体及鲁米诺试剂源自SC公司。兔抗人PTEN多克隆抗体由美国实验室视觉公司生产。二抗是羊抗兔多克隆抗体、辣根过氧化物酶连接的羊抗鼠。FITC标记的羊抗兔与TRITC标记的羊抗小鼠二抗由美国杰克逊IR公司生产。RNA干扰试剂盒， 即癌/ GFP / Neo si-RNA表达载体试剂盒由上海吉玛公司提供。Ly294002及ATRA由Sigma提供。pcDNA3.1载体源自广州泰盛公司。

1. 2 方法 应用Western blotting法对全反式维甲酸（简称ATRA）进行分析并处理人体肝癌HepG2、Bel 7402细胞24 h后， PTEN表达产生变化的情况[2]。通过免疫共沉淀（简称Co-IP）技术分析PTEN与AFP之间相互作用。应用激光共聚焦显微镜监测PTEN与AFP在细胞内的共定位情况。通过RNA干扰（即指RNAi）技术对AFP的表达产生抑制作用， 然后采用ATRA处理24 h后， 检测细胞中PTEN表达发生变化的情况， 同时研究蛋白激酶B（简称AKT）的磷酸化程度。再利用pcDNA3.1质粒、人体afp基因连接组成表达AFP的载体（简称pcDNA3.1-afp）， 最后转染成不表达AFP的人体肝癌HLE细胞。

1. 3 统计学方法 运用统计学软件SPSS16.0对组间试验研究数据加以统计学分析， 应用t法对组间计量资料进行检验， 应用χ2检验对组间计数资料进行检验。如若对比差异P<0.05， 则充分表明组间差异有统计学意义。

2 结果

人体肝癌HepG2、Bel 7402细胞均存在PTEN的表达， 通过160 μmol/L浓度的ATRT处理24 h后可加强这些肝癌细胞内PTEN的表达。经Co-IP技术实验可知AFP可与PTEN相结合。采用共聚焦纤维镜监测发现PTEN与AFP之间共定位在细胞浆。在干扰AFP表达以后， 发现PTEN表达显著升高， 表达前后具有统计学差异。而抑制AFP表达以后，ATRA可明显增强Bel 7402细胞中PTEN的表达， 同时可以使AKT磷酸化受到抑制。当转染pcDNA3.1-afp载体以后， 肝癌HLE细胞中存在AFP表达， 同时能和PTEN相结合， 由此可知pcDNA3.1-afp载体可以促进AKT磷酸化（即为p-AKT）， 从而对抗ATRA使HLE细胞增殖受到抑制。详见表1、图1～3。

3 讨论

肝癌细胞中出现AFP高表达的现象， 可能与癌细胞在体内过度的生殖、转移以及侵袭存在很大关系。有资料指出使AFP表达被抑制， 可以诱导肝癌细胞逐渐凋亡。AFP同细胞中的部分信息物质相互结合， 进而对凋亡信息的传导产生影响。其中， AKT、PTEN以及AFP表达的检测， 能分析出AFP与AKT磷酸化、PTEN功能之间的关系[3， 4]。本次研究得出人体肝癌HepG2、Bel 7402细胞、HLE内均存在PTEN表达。但HepG2、Bel 7402细胞高表达AFP， HLE细胞则不表达AFP。AKT为肝癌细胞传递、生长信号的重要因子， 在癌细胞生长期间起到中心信息物质的作用， 所以AKT活化程度说明癌细胞生长旺盛。本次研究得出， 人体内肝癌Bel 7402细胞由于受到ATRA作用， 以至于PTEN表达明显提高， 由此得知PTEN基因可以在肝癌细胞内有效被激活。通过免疫共沉淀技术发现肝癌细胞产生的AFP能够与PTEN相互结合， 组合成复合体。进一步表明PTEN与AFP之间具有相互作用的可能。利用共聚焦纤维镜监测Bel 7402细胞内的PTEN、AFP可见， 其多分布在细胞浆内， 仅有一小部分PTEN蛋白分布在细胞核中， 由此表明PTEN蛋白与AFP在细胞浆内能够出现共定位现象。

AFP可通过下面两种途径对PTEN磷酸化作用造成抑制[5， 6]：①AFP可抑制PTEN表达， 以利于降低PTEN水解生成PIP3。②AFP能够与PTEN相互结合， 利用两者之间的互相作用， 对PTEN磷酸酶活性产生抑制， 使AFP能够最快速度的使PI3K/AKT信号被激活。可见AFP对PI3K/AKT信号激活的过程， 考虑是AFP强化癌细胞生殖、转移以及侵袭的主要机制[7]。AFP的生物学性质能够对信息分子样产生调节作用。因为PTEN正常表达情况下， 可以增强癌细胞对药物的敏感性， 可见靶向干扰AFP表达能有效诱导肝癌细胞凋亡， 并且抑制AFP强化癌细胞生长的新的有效策略。

参考文献

[1] 朱明月，符史干，李孟森，等.甲胎蛋白抑制 PTEN 活性导致肝癌细胞耐受 ATRA 诱导的凋亡.生物化学与生物物理进展， 2011， 38（3）：227-238.

[2] 米登海.PTEN与VEGF在原发性肝细胞癌中的表达及相互作用.华中科技大学， 2010，12（20）：132-133.

[3] 王丽.抑癌基因PTEN在肝癌组织中的表达及HCV核心蛋白对PTEN作用的研究.第四军医大学， 2010，12（10）：455-456.

[4] 姚悦萍，王娟华，陆忠华，等.血清甲胎蛋白异质体对肝细胞癌的诊断意义.实用肝脏病杂志， 2011，23（4）：541-542.

[5] 陈伟.抑癌基因PTEN、p27在肝细胞性肝癌组织中的表达及临床相关性研究.安徽医科大学， 2010，23（13）：557-559.

[6] 沈慧.原发性肝癌中PTEN蛋白表达及其与HBV感染的关系.山西医科大学， 2010，22（11）：821-825.

[7] 秦敏. PTEN、p-Akt在白藜芦醇抑制人肝癌细胞增殖与促进其凋亡中的作用.河北医科大学， 2010，14（10）：451-453.

【摘要】 目的 研究分析甲胎蛋白对PTEN活性产生抑制引起肝癌细胞耐受ATRA发生凋亡。方法 选取2012年11月～2013年11月期间本院诊治36例肝癌患者， 将患者术后肝癌细胞制成标本。结果 人体肝癌HepG2与Bel 7402细胞均存在PTEN表达， 经160 μmol/L的ATRA处理24 h后可加强这些细胞的PTEN的表达。Co-IP技术实验得知甲胎蛋白可与PTEN相结合， 最终对ATRA产生影响。结论 肝癌细胞中表达的甲胎蛋白可与PTEN相结合， 最终发现AFP为肝癌细胞耐受ATRA的重要因子。

【关键词】 甲胎蛋白；PTEN活性；肝癌细胞；ATRA

肝癌是人类健康最大的威胁疾病中的一种， 因为受到病毒性肝炎、环境等有关因素的影响， 导致肝癌发病的机率逐渐升高。因为肝癌细胞会出现再生、转移， 同时癌细胞对药物存在一定的耐受， 从而增加了治疗难度。因此， 充分掌握肝癌耐药因子的机制， 对临床肝癌的治疗十分重要。甲胎蛋白（简称AFP）是肝癌细胞合成的具有很高特异性的蛋白质之一， 绝大多数肝癌患者在发病期会产生AFP基因高表达的特点， 并且AFP是肝癌诊断的金标准。有资料指出， 肝癌细胞产生的AFP能加强肿瘤细胞增殖与诱导肿瘤细胞的双重作用。PTEN则是将3-磷酸肌醇（简称PIP3）水解成2-磷酸肌醇（简称PIP2）的磷酸酶， 同时可以避免3-磷酸肌醇激酶（简称PI3K）磷酸化蛋白激酶B（简称PKB/AKT）， 导致PI3K/AKT信号传导被中断， 可见是一种非常关键的抑癌基因。AFP的生物学性质可能还存在对ATRA抗凋亡产生诱导作用， 但是肝癌细胞合成的AFP在机体中肝癌细胞耐受凋亡过程具体发挥的作用报道较少， 现本次研究进一步探讨AFP在人体肝癌细胞中对PTEN活性产生的影响， 总结如下。

1 资料与方法

1. 1 一般资料 选取2012年11月～2013年11月期间本院诊治36例肝癌患者， 并在患者术后肝癌组织中提取HLE、HepG2、Bel 7402细胞加以培养。实验蛋白质材料：ser 473多克隆抗体、兔抗人AKT/PKB多克隆抗体、小鼠抗人AFP 单克隆抗体均源自PS公司。Β-Actin单克隆抗体及鲁米诺试剂源自SC公司。兔抗人PTEN多克隆抗体由美国实验室视觉公司生产。二抗是羊抗兔多克隆抗体、辣根过氧化物酶连接的羊抗鼠。FITC标记的羊抗兔与TRITC标记的羊抗小鼠二抗由美国杰克逊IR公司生产。RNA干扰试剂盒， 即癌/ GFP / Neo si-RNA表达载体试剂盒由上海吉玛公司提供。Ly294002及ATRA由Sigma提供。pcDNA3.1载体源自广州泰盛公司。

1. 2 方法 应用Western blotting法对全反式维甲酸（简称ATRA）进行分析并处理人体肝癌HepG2、Bel 7402细胞24 h后， PTEN表达产生变化的情况[2]。通过免疫共沉淀（简称Co-IP）技术分析PTEN与AFP之间相互作用。应用激光共聚焦显微镜监测PTEN与AFP在细胞内的共定位情况。通过RNA干扰（即指RNAi）技术对AFP的表达产生抑制作用， 然后采用ATRA处理24 h后， 检测细胞中PTEN表达发生变化的情况， 同时研究蛋白激酶B（简称AKT）的磷酸化程度。再利用pcDNA3.1质粒、人体afp基因连接组成表达AFP的载体（简称pcDNA3.1-afp）， 最后转染成不表达AFP的人体肝癌HLE细胞。

1. 3 统计学方法 运用统计学软件SPSS16.0对组间试验研究数据加以统计学分析， 应用t法对组间计量资料进行检验， 应用χ2检验对组间计数资料进行检验。如若对比差异P<0.05， 则充分表明组间差异有统计学意义。

2 结果

人体肝癌HepG2、Bel 7402细胞均存在PTEN的表达， 通过160 μmol/L浓度的ATRT处理24 h后可加强这些肝癌细胞内PTEN的表达。经Co-IP技术实验可知AFP可与PTEN相结合。采用共聚焦纤维镜监测发现PTEN与AFP之间共定位在细胞浆。在干扰AFP表达以后， 发现PTEN表达显著升高， 表达前后具有统计学差异。而抑制AFP表达以后，ATRA可明显增强Bel 7402细胞中PTEN的表达， 同时可以使AKT磷酸化受到抑制。当转染pcDNA3.1-afp载体以后， 肝癌HLE细胞中存在AFP表达， 同时能和PTEN相结合， 由此可知pcDNA3.1-afp载体可以促进AKT磷酸化（即为p-AKT）， 从而对抗ATRA使HLE细胞增殖受到抑制。详见表1、图1～3。

3 讨论

肝癌细胞中出现AFP高表达的现象， 可能与癌细胞在体内过度的生殖、转移以及侵袭存在很大关系。有资料指出使AFP表达被抑制， 可以诱导肝癌细胞逐渐凋亡。AFP同细胞中的部分信息物质相互结合， 进而对凋亡信息的传导产生影响。其中， AKT、PTEN以及AFP表达的检测， 能分析出AFP与AKT磷酸化、PTEN功能之间的关系[3， 4]。本次研究得出人体肝癌HepG2、Bel 7402细胞、HLE内均存在PTEN表达。但HepG2、Bel 7402细胞高表达AFP， HLE细胞则不表达AFP。AKT为肝癌细胞传递、生长信号的重要因子， 在癌细胞生长期间起到中心信息物质的作用， 所以AKT活化程度说明癌细胞生长旺盛。本次研究得出， 人体内肝癌Bel 7402细胞由于受到ATRA作用， 以至于PTEN表达明显提高， 由此得知PTEN基因可以在肝癌细胞内有效被激活。通过免疫共沉淀技术发现肝癌细胞产生的AFP能够与PTEN相互结合， 组合成复合体。进一步表明PTEN与AFP之间具有相互作用的可能。利用共聚焦纤维镜监测Bel 7402细胞内的PTEN、AFP可见， 其多分布在细胞浆内， 仅有一小部分PTEN蛋白分布在细胞核中， 由此表明PTEN蛋白与AFP在细胞浆内能够出现共定位现象。

AFP可通过下面两种途径对PTEN磷酸化作用造成抑制[5， 6]：①AFP可抑制PTEN表达， 以利于降低PTEN水解生成PIP3。②AFP能够与PTEN相互结合， 利用两者之间的互相作用， 对PTEN磷酸酶活性产生抑制， 使AFP能够最快速度的使PI3K/AKT信号被激活。可见AFP对PI3K/AKT信号激活的过程， 考虑是AFP强化癌细胞生殖、转移以及侵袭的主要机制[7]。AFP的生物学性质能够对信息分子样产生调节作用。因为PTEN正常表达情况下， 可以增强癌细胞对药物的敏感性， 可见靶向干扰AFP表达能有效诱导肝癌细胞凋亡， 并且抑制AFP强化癌细胞生长的新的有效策略。

参考文献

[1] 朱明月，符史干，李孟森，等.甲胎蛋白抑制 PTEN 活性导致肝癌细胞耐受 ATRA 诱导的凋亡.生物化学与生物物理进展， 2011， 38（3）：227-238.

[2] 米登海.PTEN与VEGF在原发性肝细胞癌中的表达及相互作用.华中科技大学， 2010，12（20）：132-133.

[3] 王丽.抑癌基因PTEN在肝癌组织中的表达及HCV核心蛋白对PTEN作用的研究.第四军医大学， 2010，12（10）：455-456.

[4] 姚悦萍，王娟华，陆忠华，等.血清甲胎蛋白异质体对肝细胞癌的诊断意义.实用肝脏病杂志， 2011，23（4）：541-542.

[5] 陈伟.抑癌基因PTEN、p27在肝细胞性肝癌组织中的表达及临床相关性研究.安徽医科大学， 2010，23（13）：557-559.

[6] 沈慧.原发性肝癌中PTEN蛋白表达及其与HBV感染的关系.山西医科大学， 2010，22（11）：821-825.

[7] 秦敏. PTEN、p-Akt在白藜芦醇抑制人肝癌细胞增殖与促进其凋亡中的作用.河北医科大学， 2010，14（10）：451-453.