章步文，冯云飞

Graves病患者血清IL-3、IL-2及sIL-2R的表达研究

章步文，冯云飞

目的探讨Graves病患者治疗前后血清白介素（IL）-3、IL-2及白介素2受体（sIL-2R）的表达研究。方法

白介素；Graves病；白介素2受体

并且与甲状腺疾病发病及病情控制密切相关[1]。本研究旨在了解甲状腺疾病患者免疫功能状态与IL-3等细胞因子的关联及其临床意义，为GD患者诊断与治疗中临床应用IL-3等细胞因子指标提供理论依据。现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料初诊GD患者均为浙江省湖州市中医院2008年10月至2009年6月内科门诊和住院散发的无亲缘关系的患者，共37例纳入观察组，其中男14例，女23例；年龄15～63岁，平均（39.2±14.0）岁。另设健康对照组37例，均为随机选取在本院体检的健康查体者，心、肝、肾功能正常，无甲状腺疾病及甲状腺疾病家族史，甲状腺功能正常，甲状腺自身抗体阴性。其中男15例，女22例；年龄25～57岁，平均（37.6±12.9）岁。两组一般资料差异无统计学意义（＞0.05），具有可比性。

根据临床表现及检测血清总甲状腺素（TT4）、总甲状腺三碘原氨酸（TT3）、游离甲状腺素（FT4）、游离甲状腺三碘原氨酸（FT3）、超敏促甲状腺素（sTSH）而确诊GD。其诊断符合下列标准：（1）有典型的甲状腺功能亢进的症状和体征；（2）FT3、FT4均高于正常，TSH低于正常；（3）甲状腺自身抗体不同程度的阳性。排除标准：（1）其他原因引起的甲状腺功能异常者；（2）合并浸润性突眼或合并其他自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮（SLE）、类风湿性关节炎（RA）、银屑病、多发性硬化（MS）及重症肌无力（MG）等；（3）严重心、肝、肾疾病。（4）其他免疫性或感染性疾病及妊娠妇女。

1.2 研究方法观察组于治疗前早晨8:00空腹采静脉血5 ml，以3 000 r/min离心，分离血清后分装，一部分血清在－20℃以下冻存待测外，余送作TT4、TT3、FT4、FT3、sTSH、甲状腺球蛋白抗体（TGA）、甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）检查。药物治疗后数月，病情相对稳定，甲状腺功能恢复正常后再次采血标本。正常对照组在查体时留取血样，处理同上。IL-3、IL-2、白介素2受体（sIL-2R）试剂盒（生产批号20090325）为美国Gengyme公司产品，由深圳晶美公司提供。

1.3 统计方法采用SPSS13.0统计软件进行统计学分析，正态分布数据采用均数±标准差表示，组间比较采用配对资料检验；率的比较采用2检验。＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者治疗前后甲状腺功能水平的比较治疗前观察组患者TT4、TT3、FT4、FT3、sTSH、TPOAb及TGAb均显著高于对照组（均＜0.01）。观察组患者经治疗后TT4、TT3、FT4、FT3及sTSH均恢复正常，治疗前后差异均有统计学意义（均＜0.01）；TPOAb与TGAb治疗前后均在正常范围内，经治疗后TPOAb显著下降（＜0.01），TGAb前后差异无统计学意义（=0.54，＞0.05）。见表1。

表1 两组治疗前后甲状腺功能水平的比较

2.2 对照组及GD患者治疗前后IL-3、IL-2、sIL-2R表达水平的比较观察组患者IL-3、IL-2、sIL-2R水平与对照组差异有统计学意义（均＜0.01）；观察组患者经治疗后IL-3、IL-2表达水平较治疗前显著升高，而sIL-2R的表达水平较治疗前降低，治疗前后差异有统计学意义（均＜0.05）。见表2。

2.3 观察组治疗前IL-3、IL-2、sIL-2R表达水平与甲状腺激素相关性观察组治疗前患者外周血IL-3、IL-2水平与T T4、TT3、FT4、FT3水平均呈负相关（=－0.504、－0.603、－0.624、－0.589、－0.762、－0.654、－0.587、－0.609，均＜0.05），而sIL-2R水平与TT4、TT3、FT4、FT3水平均呈正相关（=0.532、0.487、0.614、0.578，均＜0.05）。

表2 两组治疗前后IL-3、IL-2、sIL-2R的表达

3 讨论

甲状腺细胞能产生肿瘤坏死因子（TNF-）、干扰素（IFN-）、IL-1及IL-3等细胞因子[2]。IL-3具有显著的免疫调节作用，已有研究表明IL-3能促进外周血T细胞的增殖。在IL-2存在的条件下，它还能促进B细胞的增殖及分化，并能诱导、激活B细胞分泌免疫球蛋白，IL-3的这些作用是通过诱导B细胞表达IL-2R来实现的。

IL-2是免疫调控因子，具有促进T淋巴细胞增殖分化，增强Ts细胞活性作用[3-4]。因此，IL-2减少会影响Ts细胞的分化，成熟和增殖，体内免疫自稳机制不能有效发挥监视作用。而目前认为Ts细胞下降不能抑制“禁株”细胞是GD发病的关键环节之一，故IL-2减少可能与GD发病有关系。研究发现IL-2受体有二种形式，膜IL-2R（mIL-2R）及sIL-2R。sIL-2R是mIL-2R的主要廓清形式，二者都参与了对II-2的调节。sIL-2R可消耗IL-2，抑制IL-2依赖的免疫反应，并加重体内IL-2的不足，使免疫功能紊乱。因此，IL-2在GD发病中，还明显受到受体等多方面的调节。IL-2对甲状腺细胞的合成、分泌及分化功能有着重要的影响。有学者对甲状腺功能异常伴有IL-2水平降低的高甲状腺素血症患者，给予外源性的IL-2补充治疗，使患者的甲状腺激素水平降至正常，并避免部分患者复发[5]。直接测量血清IL-2的水平，可以帮助进一步证实由GD引起的甲状腺机能亢进。

IL-2/IL-2R与甲状腺疾病的相关研究已有报道[6-7]，甲状腺机能亢进症未经治疗组及甲亢未治疗合并有突眼的患者血清slL-2R明显升高，IL-2明显降低。患者经过抗甲状腺药物治疗后sIL-2R明显降低；Graves病患者血清slL-2R均与FT3呈正相关。高水平的sIL-2R是淋巴细胞激活的产物，并且可控制这一免疫功能失常。T细胞释放受体，同时降低可利用的IL-2水平。在体外细胞培养中，也发现GDsIL-2R增加而IL-2水平下降。这种降调节可能为GD发病过程中免疫调控失衡时迅速建立反馈性相互制约。本研究中GD患者sIL-2R值增高，IL-2水平降低，与大量国内外研究一致[7]，表明细胞大量活化，增高的sIL-2R与IL-2结合，可阻碍IL-2与膜IL-2R结合，从而避免Th细胞的进一步增殖，有助于减轻免疫反应强度，这也是机体自我保护的一种机制。研究还表明，GD患者sIL-2R水平与甲状腺激素包括TT4、TT3、FT4、FT3均呈显著正相关，并且随着甲状腺激素水平的升高或降低，sIL-2R水平亦呈相应的变化趋势；但是有研究证明，不仅GD患者血清sIL-2R水平升高，其他原因所致的甲亢如毒性多结节性甲状腺肿、毒性甲状腺瘤、桥本氏甲状腺炎伴甲状腺功能亢进患者血清sIL-2R水平均明显升高。因此认为sIL-2R与自身免疫性有关，sIL-2R可能作为体内淋巴细胞激活的一项独立指标，而不只是继发于高甲状腺素血症的改变，并且其与疾病的活动性密切相关，定期随访sIL-2R水平对于GD的病情监测可能有重要意义。

本研究发现，GD患者初发时较健康对照组研究对象其血清sIL-2R水平显著增高，而IL-2及IL-3水平显著降低，随着甲状腺功能的恢复，IL-2及IL-3水平逐渐升高，sIL-2R水平降低。IL-3、IL-2水平与TT4、TT3、FT4、FT3水平均呈负相关，而sIL-2R含量与TT4、TT3、FT4、FT3水平均呈正相关。说明GD初发时高甲状腺素血症与血清中IL-2、IL-3水平降低有关。治疗后IL-3水平上升非常明显，组间较治疗前比较差异有统计学意义，这一现象不仅能反映自体免疫反应的动态，同时也能反映甲状腺细胞的功能状态，因此认为IL-3有可能作为了解GD病情的检测指标，同时提示动态观察血清IL-3水平或许对判断GD的转归具有一定的临床价值。当然，该研究样本量少，细胞因子在GD发生发展中的确切作用仍需进一步研究。

[1]Anvari M,Khalilzadeh O,Esteghamati A, et al.Graves'disease and gene polymorphism of TNF-,IL-2,IL-6,IL-12,and IFN-[J].Endocrine,2010,37(2):344-348.

[2]张金华,冯玉欣,赵艳艳,等.Th1/Th2型细胞因子失衡与Graves病相关性研究[J].临床合理用药,2010,3(9):39-40.

[3]Eller T,Vasar V,Shlik J,et al.The role of IL-2 and soluble IL-2R in depression and antidepressant response[J].Curr Opin Investig Drugs,2009,10(7):638-643.

[4]Wang J,Wicker LS,Santamaria P.IL-2 and its high-affinityreceptor:geneticcontrol of immunoregulation and autoimmunity[J].SeminImmunol,2009,21(6):363-371.

[5]Hoyer KK,Dooms H,Barron L,et al.Interleukin-2 in the development and control of inflammatorydisease[J].Immunol Rev, 2008,226:19-28.

[6]刘静,田利民,李茂欣.毒性弥漫性甲状腺肿患者血清IL-1、IL-2、IL-6水平变化的分析[J].华中医学杂志,2001,25(3):117-118.

[7]Topliss DJ,Eastman CJ.Diagnosis and management of hyperthyroidism and hypothyroidism[J].Med J Aust,2004,180 (4):186-193.

10.3969/j.issn.1671-0800.2014.04.029

R581

A

1671-0800(2014)04-0423-03 Graves病（简称GD）又称毒性弥漫性甲状腺肿或Basedow病，是一种伴甲状腺激素（TH）分泌增多的器官特异性自身免疫病。已有研究提示，细胞因子对于甲状腺细胞具有重要的免疫调节和免疫稳定作用。细胞因子的不平衡能够直接或间接地导致甲状腺滤泡上皮细胞（TEC）生长、分化的异常和免疫功能的紊乱，从而导致甲状腺疾病，特别是自身免疫性甲状腺病（ATID）的发生和发展，

浙江省卫生厅资助项目（2009B058）

313000浙江省湖州，湖州市中医院(章步文)；浙江大学医学院附属第一医院（冯云飞）

章步文，Email：1046993395@qq.com

37例初诊Graves病的甲状腺机能亢进症患者，在甲亢治疗前后分别抽血检测IL-3、IL-2及sIL-2R，余送作总甲状腺素（TT4）、总甲状腺三碘原氨酸（TT3）、游离甲状腺素（FT4）、游离甲状腺三碘原氨酸（FT3）、超敏促甲状腺素（sTSH）、甲状腺球蛋白抗体（TGA）及甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb），比较治疗前后IL-3、IL-2及sIL-2R的表达水平。健康对照组37例，进入研究时抽血检测IL-3、IL-2及sIL-2R，余送作TT4、TT3、FT4、FT3、sTSH、TGA及TPOAb水平。结果治疗前甲状腺机能亢进患者血清TT4、TT3、FT4、FT3、sTSH、TPOAb、TGAb以及IL-2、IL-3、sIL-2R水平与健康对照组差异均有统计学意义（均＜0.05）。甲状腺功能亢进症患者经治疗后IL-3、IL-2表达显著升高，sIL-2R的表达水平降低，治疗前后IL-3、IL-2、sIL-2R的表达水平有差异有统计学意义（均＜0.01）。IL-3、IL-2表达与甲状腺激素水平呈负相关，sIL-2R与甲状腺激素水平呈正相关（＜0.05）。结论甲状腺功能亢进症患者经治疗后IL-3、IL-2表达显著升高，sIL-2R的表达水平降低。口服抗甲状腺药物有免疫调节作用，可能与IL-3的免疫调节相关。