于瑞丰

（哈尔滨卓普科技有限公司，黑龙江哈尔滨150001）

0 引言

隔离器是防御微生物污染的屏障系统，是隔离实验动物饲养和实验的有效屏障，其主要分为2种，一种是正压隔离器，另一种是正/负压隔离器。实验动物的生产繁殖主要采用正压隔离器，正/负压隔离器则可以正压使用，也可以负压使用，然而进行感染动物实验均必须使用负压。

SPF隔离器是培育和饲养高标准和高质量无菌禽类的重要设施，也是临床医学、实验医学以及工业科学等领域研究中不可缺少的设备之一。其中，SPF不锈钢鸡隔离器是一种正/负压隔离器，因其空间小，每个隔离器只能做1组动物实验，彼此之间互不干扰，所以在兽用生物制品染毒动物实验过程中得到了广泛应用。

1 隔离器的工作原理

隔离器分为用于维持无菌性的无菌隔离器和用于密封危害物质的密封隔离器，但是二者的结构基本是相同的。无菌隔离器多用于正压管理，密封隔离器多用于负压管理。对于无菌隔离器，在生产过程中需要利用手套箱进行必要的操作，使用时不允许开启隔离器的小门。由于内部是正压管理，所以一旦内部进行灭菌，因外部环境微生物而引起污染的风险是极低的。在内部正压的管理下，可长时间维持无菌性。目前，无菌隔离器大部分采用过氧化氢气体灭菌的方式来实现无菌性，而过氧化氢灭菌分为干式灭菌和湿式灭菌2种。

隔离器技术应用先进的完全屏蔽双门快速传递技术和密封舱自动灭菌技术，从而保持了一个持续高效的无菌空间，无菌实验环境的高洁净度要求得以保证。隔离器利用隔离器技术有2个目的：一是它可以保护产品免遭来自环境的污染，包括来自操作人员在过滤和密封时带来的污染；二是保护操作人员免遭在生产过程中有害物质和有毒物质带来的伤害。

隔离器技术的原理：把无菌的物品（动植物、容器、产品等）放入一个无菌的环境中，由于没有操作人员进入隔离器，也没有非无菌物品带入隔离器，这些物品在整个加工过程中能够始终保持无菌性。隔离器屏障是一个绝对屏障，它不允许在受到保护的物品和未受到保护的环境之间进行交换。隔离器既可以用物理密封阻隔外部污染物的进入，也可以用保持内部正压的方法达到有效密封的目的。操作人员通过穿戴手套、防护服对物品进行熟练的操作。所有进入隔离器的空气通过高效微粒空气过滤器或UPLA过滤。排出空气的典型出口是通过一个HEPA级过滤器过滤，通常使用过氧化氢蒸汽对隔离器组件的内部环境进行表面灭菌。隔离器内部和所有物品的无菌化程度通常要进行验证，确保无菌度达到10-6级。

2 SPF隔离器的结构

SPF隔离器的结构如图1所示。

2.1 上箱体

图1 SPF隔离器的结构

上箱体前后两侧装有有机玻璃操作观察窗，每一面观察窗下方均设有3只长臂手套，便于2个人面对面协同操作。侧面安装了进风和排风过滤器，隔离器上安装风机，左侧有一个传递窗和电源控制板。

2.2 下箱体

下箱体左面的下垂部分设有一对长袖手套，主要是用于清理粪便。另外，还设有开启/关闭的传递口，用于传递废弃物和粪便。在此部分的底部设有1个阀门，用于排放因操作失误或饮水器泄露的积水。下箱体的右面突起装有支架，主要用于安装薄膜（每周清粪2次）。

在上、下箱体之间根据需要可放置动物行走的底网。

2.3 活动支架

活动支架带有4个方向胶轮（其中2个带刹车），便于在室内移动隔离器或将隔离器置于适合的操作位置。

2.4 传递窗门

隔离器通过传输通道杀菌器可以直接将无菌的培养基、无菌的装备、无菌的动物等传递进隔离系统。传递窗门可以把2个隔离器彼此相连，无菌的物品就能够从一个隔离器传递到另一个隔离器。通过密封固件，将传递仓的非无菌表面连接。通过压紧橡胶密封条来保证气密性，避免微生物进入。

3 SPF隔离器的使用方法

3.1 使用前准备

隔离器在使用前应按下列程序进行熏蒸消毒：（1）将已安装好的隔离器风机取下，隔离器进出口均用塑料膜封好；（2）将需要熏蒸的备用物品、饮水管、饮水器、甲醛溶液等通过传递窗放入隔离器内；（3）投入使用前24h打开风机，使隔离器内环境保持洁净度A级。

3.2 安装

将所有部件组装在一起，并用胶带密封。长袖手套的套袖要用胶带固定在手套套桶上。在下箱体废弃物传递窗的套筒上，应套上一个特制的塑料袋，并用胶带密封固定。在固定出粪口下底板前，应将塑料薄膜卷拉伸到出粪口附近，并检查出废水的阀门是否漏水。进排风高效过滤器在出厂前已检测，只需将其平稳地放在高效过滤器盒内，将箱体四面的搭扣扣好即可使用。上箱体右侧为进风口，左侧为排风口。在排风过滤器盒的下面还需安装活动初效过滤板，并在使用过滤中视隔离器内的粉尘情况，随时更换保护高效过滤器。

风机的安装要按照正压饲养或负压饲养选择安装的方向。如用正压饲养，则将风机的出口安在进风过滤器盒上；如进行负压饲养，则将风机的吸风口安在排风过滤器盒上。风机安好后，均需要用胶带固定封闭。如该设备采用管道送风或排风，则将该设备的进/排风口与进/排风管连接。

电源控制板安装就位后，打开风机、照明和采暖灯具开关，测试风机和灯光是否完好。本隔离器还设有控温仪，可任意调节所需温度。

将饮水盒装满酸化水后放到顶部固定位置上，将输水胶管与隔离器内的饮水器连接，打开出水龙头，检查漏水与否。

3.3 物品传递

进出隔离器的物品均应通过物品传递窗，并严格实行无菌操作。

3.3.1 物品进入

打开传递窗外门，放入带外包装的已消毒物品，关闭外门。打开传递窗上的消毒液口，往里喷入消毒液后关闭该喷口，静置20min。打开传递窗内门，通过上箱体的操作手套将物品放入隔离器内，再关闭内门。对于无外包装，但能耐受消毒液的物品，在进入前，对物品进行清洁处理后置入传递窗内，喷射消毒液后方可传入。

3.3.2 物品传出

先打开内门，将需传出物品放入传递窗后，关闭内门。打开传递窗消毒液喷口，喷入消毒液后关闭喷入口，静置20min。再打开外门，取出物品。物品取出后，将传递窗进行清洁处理，处理后关闭外门，通过消毒液喷口喷射消毒液。

3.4 清粪

先在出粪口处套上塑料袋，用专用胶带封严。打开消毒口喷入消毒液，将消毒孔旋紧封严，静置20min。然后打开粪便出口密封门，将粪卷推入出口的塑料袋内，关闭密封门，经消毒孔喷入消毒液，闭合20min，而后可以取下。

3.5 隔离器消毒

可直接在玻璃器皿内加入高锰酸钾、甲醛溶液放在隔离器内，使二者混合产生气体进行消毒。消毒时一般密闭静置24h以上。消毒完毕后打开风机，排风24h再切断电源稳妥地取下风机、隔离器两端的高效滤器和其他材料。然后，将隔离器送入清洗间，摘下袖套和粪便托盘以及粪便塑料薄膜卷，用高压清洗机清洗。拆下高效过滤器，用洗涤剂等水浴液浸泡数小时后，用清水洗涤晾干待用。取下的滤器、风机、粪便塑料薄膜，切忌用水清洗或沾染其他液体，以免受损。一般情况下高效过滤器连续使用约1年需更换1次。

4 使用SPF隔离器的注意事项

隔离器的使用环境要求SPF设施可分为屏障系统内和屏障系统外。屏障系统内的空气处理洁净度为A级，一切进入屏障内的动物和物品均应达到微生物控制标准。隔离器的外部环境对动物试验以及隔离器的使用寿命都有一定影响，要保持隔离器的使用环境，需做到以下几点：

（1）非工作人员不准随便进出隔离器房舍，工作人员进出时必须更换工作服、工作帽等，工作服应定期进行消毒。

（2）房舍内禁止一切带有灰尘的东西，房舍内地面、墙壁、隔离器外表面及必备物品保持清洁、无灰尘，隔离器及房舍内物品摆放整齐。

（3）房舍内应定期或不定期进行消毒，同时保持房舍内空气新鲜。

在使用隔离器时还需要注意以下几点：

（1）有机玻璃隔离操作观察避免在紫外线下长时间照射，有机玻璃表面不得使用腐蚀性清洁剂，不得用丙酮、三氯甲烷等有机溶剂擦洗其表面，不得用钢丝球之类坚硬粗糙物质擦拭其表面，可以使用氨类专用消毒液或洗涤灵等。

（2）隔离器高效过滤器有一定的使用期限，一般可使用1年左右，如果粉尘少，使用期限可稍长。高效过滤器应防火、防水、防潮，不用时密闭放置干燥处，更换高效过滤器时应关闭前后风门。

（3）应定期清洗自动饮水器。SPF鸡引用的是酸化水，酸化水可以抑制细菌生长，但不能杀灭细菌。所以，自动饮水器要经常清洗，以免引起饮水管的堵塞，造成漏水，长期使用容易引起细菌生长。

（4）视通风情况，定期更换排风口过滤器的初效滤板。内部加热灯及消毒加热器使用时不得离两侧窗及其他非耐热物品太近。

（5）隔离器有风门拉板太紧的现象，旋出限位螺钉，拔出拉板，在其表面涂抹硅油即可解决问题，千万不要涂抹机油！

（6）隔离器上下主体的接口是靠胶带连接并密封的，除粘接时要特别仔细外，在使用中还要经常检查。重要实验或专门管理隔离器时可在外门栓右侧孔上加锁。

5 结语

SPF不锈钢鸡隔离器同传统的隔离器相比，具有更实用、更易控制、更经济、更安全等优点。在使用过程中，该隔离器能够对物体完全实现屏蔽，密封性能好，使得灭菌性能得到提高。上位机能动态显示工作流程及工作过程中的温度、压力、时间等参数，下位机采用可编程序控制器进行程序控制，使得操作更加方便、直观，使用更加灵活。因此，SPF不锈钢鸡隔离器的应用越来越广泛。

［1］范向阳.SPF隔离器的使用和保养［J］.科技信息（科学教研），2007（19）

［2］余敏，郑金旺.关于无菌隔离器技术［J］.机电信息，2011（26）