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(青岛大学医学院第二附属医院普外科,山东 青岛 266042)

胃癌是发病率最高的的胃肠道恶性肿瘤之一，其死亡率高达9.7%[1]。胃癌的预后与胃癌的浸润、淋巴结转移及肿瘤的分化程度密切相关。细胞分化抑制因子-1(ID-1)的表达与多种肿瘤相关，在胃癌的表达率亦很高[2]；表皮生长因子受体(EGFR)及人类表皮生长因子受体-2(HER2)都是酪氨酸激酶Ⅰ家族HER家族中的成员，两者的过表达与许多肿瘤的发生发展及预后密切相关[3]；血管内皮生长因子(VEGF)是目前发现的促血管生成活性最强的因子，可促进血管内皮细胞增殖，同时可通过增加血管通透性使血管内皮细胞迁移，诱导肿瘤血管生成，维持肿瘤的生长[4]。ID-1、VEGF、EGFR和HER2都是目前研究较多的且与胃癌的发生发展及预后密切相关的因子，是目前胃癌药物治疗研究的重要作用靶点。但目前对4种因子综合研究的报道较少，本研究采用免疫组织化学方法，研究它们在胃癌组织的表达情况，旨在探讨其表达的特点及相互关系，从而为预测胃癌临床分期及预后提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料

随机取我院病理科2008-2012年胃癌组织标本55例，其中男34例，女21例；年龄≤60岁23例，>60岁32例。TNM分期Ⅰ、Ⅱ期24例，Ⅲ、Ⅳ期31例；浆膜以内22例，浆膜及外层33例；高、中分化腺癌27例，低分化腺癌、印戒细胞癌28例；淋巴结转移36例，未转移19例。

1.2 主要试剂

即用型兔抗人EGFR单克隆抗体、即用型兔抗人VEGF单克隆抗体、即用型兔抗人HER2单克隆抗体、即用型S-P超敏试剂盒及DAB显色液，均购自北京中杉金桥生物技术有限公司，浓缩型兔抗人ID-1单克隆抗体购自武汉博士德公司。

1.3 方法

1.3.1免疫组化检测 采用常规SP法，严格按照说明书操作。

1.3.2结果判定 在高倍镜下取10个视野，观察阳性细胞数，取其平均值。HER2表达定位于细胞膜，VEGF、ID-1及EGFR表达均定为于细胞浆。评分方法：阳性细胞数所占比例≤5%为1分，6%～25% 为2分，26%～50%为3分，51%～75% 为4分， >75% 为5分；细胞膜或细胞浆呈蓝色为1分，棕黄色为2分，棕色为3分，棕褐色为4分；将两项评分相加，≤3分者为阴性表达，≥4分者为阳性表达，其中以2～3分计为(-)，4～5分为(+)，6～7分为()，8～9分为()。

1.3.3统计学处理 应用SPSS 17.0统计软件包进行统计分析。计数资料比较采用样本率比较的χ2检验，相关性分析采用Spearman等级相关分析。以P<0.05为差异有显著性。

2 结 果

2.1 各指标表达情况

ID-1、VEGF、EGFR和HER2阳性表达率分别为65.5%(36/55)、67.3%(37/55)、58.2%(32/55)、61.8%(34/55)，均呈高表达。见表1。

表1 胃癌组织ID-1、VEGF、EGFR和HER2表达(例)

2.2 各指标表达与临床病理特征之间的关系

ID-1、VEGF、EGFR和HER2的阳性表达率与肿瘤浸润深度、分化程度及淋巴结转移有关(χ2=7.04～24.85,P<0.01)；而与病人性别及年龄无关(P>0.05)。见表2。

2.3 表达的相关性

ID-1、VEGF、EGFR和HER2在胃癌组织表达均呈正相关(r=0.221～0.297，P<0.05)。见表1。

表2 胃癌组织中各指标表达与临床病理特征的关系(例(χ/%))

3 讨 论

EGFR是酪氨酸激酶Ⅰ型受体家族成员之一，可与胞浆过表达的表皮生长因子结合，使EGFR的酪氨酸残基磷酸化，通过胞浆内的信号通路，促进细胞的分化、血管形成，从而抑制细胞的凋亡，导致细胞恶化[5]。研究结果显示，肿瘤病人的发病年龄、细胞分化程度、浸润深度及临床分期均与EGFR的过表达相关，中低分化腺癌中EGFR的表达率明显高于高分化腺癌，表明其与低分化腺癌的发生密切相关[6]。本研究结果显示，胃癌组织中EGFR的阳性表达率高达58.2%(32/55)，随着分化程度的降低、浸润深度的增加及淋巴结转移的出现，阳性表达率明显升高。这进一步证实了EGFR在胃癌发生发展中的促进作用。

HER2与EGFR同属于酪氨酸激酶Ⅰ型受体家族，正常情况下，HER2处于非激活状态，当受到致癌因素作用时，就会被激活，与其配体结合，促进细胞的增殖、分化，促进新生血管形成，从而使正常细胞发生癌变[7]。大量研究显示，HER2的过表达与很多恶性肿瘤的发生相关，已经成为预测乳癌预后的独立因素。胃癌组织中HER2的过表达，与胃癌的发病年龄、细胞分化程度、临床分期及预后明显相关[8]。本研究结果进一步证实了上述结论。

VEGF可与血管内皮细胞特异结合，促进血管内皮成活，发挥促血管生成作用[9]。其被认为是目前对血管生成作用最强，特异性最高的因子。本研究结果显示，胃癌组织VEGF阳性表达率为67.3%(35/55)，且随着肿瘤分化程度的降低、浸润深度的增加及淋巴结转移的出现，其表达率显著增高。SU等[10]的研究显示，VEGF在多数人类恶性肿瘤中呈现高表达，对胃癌的生长和侵袭同样具有促进作用。

ID-1是DNA结合抑制因子家族中的一员，通过抑制转录因子碱性HLH与NDA的结合，抑制细胞分化，调节细胞周期，具有永生化基因的特性[11]。研究显示，ID-1在乳癌、结肠癌、肝癌及胃腺癌等多种恶性肿瘤组织均呈高表达[2]。HAN等[12]研究显示，ID-1在胃癌组织高表达，且与胃癌的分化程度、浸润深度及转移率呈正相关。这也与本文结果相一致，进一步证实了ID-1在胃癌发生发展的促进作用。

本文的研究结果还显示，ID-1、VEGF、EGFR和HER2在胃癌组织中的表达呈显著的正相关，说明其作用机制之间有着紧密的联系。国外有研究显示，ID-1在VEGF参与血管生成过程中起着关键作用[13]。IBRAHIM等[14]的研究结果显示，ID-1对胃肠道肿瘤中VEGF与EGFR的表达起着校准器的作用。另外，AOYAGI等[15]的研究结果也显示，HER2与EGFR在促进胃癌发生发展的过程中可能起着协同作用。这说明ID-1、VEGF、EGFR和HER2具有协同作用。其作用过程可能为：ID-1通过调控HER2与EGFR的表达，进一步调节VEGF的血管生成作用；ID-1直接调控VGFR的表达进而控制其血管生成作用。其具体的作用机制有待进一步研究。

总之，通过对ID-1、VEGF、EGFR和HER2联合检测，可为胃癌的临床分期提供新的依据，并更好地判断病人的预后情况。

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