陈 光，丁晓飞，吴英良

生脉散出自《内外伤辨惑论·卷之中暑伤胃气论》，含人参、麦冬、五味子［1］。现代药理学研究表明，生脉具有改善心脏泵血功能、抗凝血、抗炎和提高免疫力等作用。临床主要用于治疗冠心病心绞痛、感染性休克和心源性休克等疾病［2-3］。注射用生脉是由红参、麦冬和五味子的有效成分制成的中药注射用冻干粉，有效成分主要为皂苷类物质。本实验旨在探讨注射用生脉对感染性休克大鼠血压、心肌酶谱和血浆一氧化氮含量的影响。

1 材料与方法

1.1 材料 RM-6240 B型生理实验系统(成都仪器厂)，CL-770自动生化分析仪(日本岛津公司)。注射用生脉［Shengmai for injection(SM)，批号:20021022，沈阳药科大学药剂教研室］，参附注射液［Shenfu Injection(SF)，批号:030718，雅安三九药业有限公司］，戊巴比妥钠(批号:020919，北京化学试剂公司)，乳酸(LD)、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)及超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒(南京建成生物工程研究所)。Wistar大鼠，体质量200～300 g，雌雄兼用，由沈阳药科大学动物中心提供，合格证号:SCXK(辽)2003-0008。

1.2 方法 按盲肠结扎穿孔术(Cecal ligationpuncture，CLP)复制大鼠感染性休克模型［4］:大鼠术前禁食12 h，自由饮水;乙醚轻度麻醉，常规消毒腹部，下行腹正中切口，轻轻拉出盲肠，结扎其根部并保持肠道通畅，用20号针头在盲肠肠壁上穿刺2次，两个针孔相距约3 mm，第一针孔距盲端约3 mm，挤出少量内容物，然后将盲肠送回腹腔，逐层缝合腹壁。术毕大鼠经背部皮下注射生理盐水30 mL/kg以补充手术过程中体液的损失。术后20 h对模型复制成功的大鼠进行随机分组，每组8只，雌雄各半，分别为假模型组，模型组，注射用生脉高、中、低剂量组(相当于红参生药量1.10、0.54、0.27 g/kg)和参附注射液组(相当于红参生药量0.54 g/kg)。大鼠戊巴比妥钠40 mg/kg麻醉，常规消毒颈部，分离左侧颈总动脉，插管并连接RM-6240 B型生理信号记录分析系统记录大鼠动脉血压。待血压稳定后，记录给药前血压值。大鼠尾静脉给予受试物或等容量生理盐水(给药容量:0.2 mL/kg，给药速度:控制在10 min内给完)，分别记录给药后 10、15、20、30、45、60、90、120 min时的血压。给药120 min后从颈动脉抽血2 mL，参照试剂盒说明，测定LD、NO、MDA含量和SOD活力。最后处死大鼠，迅速取出心脏置入10%福尔马林中固定;石蜡包埋，切片，HE染色，显微镜观察感染性休克大鼠心脏的病理改变。

2 结果

2.1 注射用生脉对感染性休克大鼠血压的影响

由表1可见，感染性休克模型大鼠的血压较假手术组大鼠血压有明显下降，模型组动物平均动脉压小于 11 kPa;注射用生脉 1.10、0.54、0.27 g/kg可显著提高感染性休克大鼠的平均动脉压，与模型组相比差异有统计学意义(P＜0.05，P＜0.01);其中注射用生脉 1.10 g/kg给药30 min，血压较给药前升高约21%左右，之后血压上升幅度有所下降，但与模型组相比差异有统计学意义。且注射用生脉提升感染性休克大鼠血压的效应呈一定的剂量依赖性。

表1 注射用生脉对感染性休克大鼠血压的影响(±s，n=8，kPa)

表1 注射用生脉对感染性休克大鼠血压的影响(±s，n=8，kPa)

注:与模型组比较，*P＜0.05，＊＊P＜0.01;与假手术组比较，#P＜0.01

组别 剂量g/kg 0 min 20 min 30 min 45 min 60 min 90 min 120 min假手术 － 15.0±1.5 14.5±1.1(－2.62±6.57)14.6±1.2(－2.04±6.61)14.7±1.5(－1.40±7.01)15.1±1.8(0.71±7.68)15.0±1.6(0.28±8.99)14.6±1.2(－1.74±10.60)模型 － 10.8±2.3# 10.5±2.5#(－3.59±9.51)9.6±3.6#(－11.93±9.22)生脉 1.10 11.1±3.2# 12.5±2.9*(19.88±29.68)10.3±2.7#(－5.54±10.25)10.3±2.9#(－5.74±12.90)10.0±2.8#(－8.26±7.60)9.83±3.6#(－9.81±7.22)12.0 ±3.5＊＊(8.31±8.60)0.54 11.8±1.4# 12.6±1.4*(7.43±9.41)12.8 ±3.0＊＊(20.92±21.94)12.2±3.2*(12.68±15.06)11.9±3.2*(9.23±10.82)12.1±3.6*(9.10±10.54)10.9±2.0(－2.02±13.26)参附 0.54 9.6±2.5# 10.9±2.4*(17.50±24.70)13.3 ±1.3＊＊(13.15±10.09)0.27 11.2±1.6# 12.1±1.9*(8.82±12.71)13.1 ±1.5＊＊(11.56±10.89)13.2 ±1.4＊＊(11.93±9.84)13.4 ±1.2＊＊(14.77±15.18)13.3±1.2*(13.33±12.64)12.1±2.2*(8.60±15.87)11.6±2.2(3.66±14.45)11.7±2.0*(4.54±12.78)11.6±2.0(4.22±11.94)11.3 ±2.3＊＊(21.27±22.55)10.7±2.5*(13.97±18.67)10.4 ±2.4＊＊(10.32±14.12)10.2±3.0*(6.65±13.51)10.4±2.7(5.38±40.44)

2.2 生化指标的测定 表2结果表明，感染性休克模型大鼠血中LD、NO、MDA含量与假手术组比较明显升高，而SOD活力显著下降。注射用生脉1.10、0.54和0.27 g/kg均能明显降低全血LD、血浆NO和MDA含量，同时提高血浆的SOD活力，与模型组相比差异有统计学意义(P＜0.05或0.01)。

表2 注射用生脉对感染性休克大鼠血中LD、NO、MD及SOD活力的影响(±s，n=8)

表2 注射用生脉对感染性休克大鼠血中LD、NO、MD及SOD活力的影响(±s，n=8)

注:与模型组比较，*P＜0.05，＊＊P＜0.01;与假手术组比较，#P＜0.01

组别 剂量(g/kg) cLD(mmol/L) cNO(μmol/L) cMDA(nmol/mL) aSOD(U/mL)假手术1.11±0.59 10.1±3.8 6.78±1.28 185.81±20.66模型 － 7.81±1.75# 142.2±45.2# 15.55±3.42# 74.81±13.94#生脉 1.10 5.09±1.84＊＊ 78.5±45.1* 11.02±1.94＊＊ 131.62±21.10＊＊0.54 6.02±1.25* 89.3±40.7* 12.01±1.95* 120.27±21.07＊＊0.27 6.18±1.34 90.5±29.0* 12.40±1.48* 117.05±22.98＊＊参附 0.54 5.96±1.10* 82.2±27.8＊＊ 11.88±1.40* 121.68±13.31－＊＊

2.3 病理组织学检查 如图1所示，假手术对照组大鼠心肌组织无异常改变，心肌横纹清晰，细胞核居中，间质未见血管扩张及炎性细胞浸润。感染性休克模型组大鼠心肌组织可见大范围的炎性细胞浸润，也可见毛细血管扩张、出血，有不同程度的细胞坏死和组织纤维化，心肌结构紊乱。在给予不同剂量的注射用生脉治疗后，与模型组比较，治疗组大鼠心肌组织损伤有不同程度的减轻，表现为心肌结构趋于正常，水肿及变性、坏死等改变明显减轻;注射用生脉高剂量组效果最为明显，但仍有少量的炎性细胞浸润等改变。

3 讨论

感染性休克是以持续性低血压、低血氧、代谢性酸中毒、多器官功能障碍及死亡为特征的一种危重疾病，其病死率高达46% ～82%。本实验参照Wichman等方法采用CLP复制了大鼠感染性休克模型。CLP组动物术后逐渐出现萎靡、躁动、寒战、竖毛、腹泻、脓性尿及眼角分泌物增多等现象。术后20 h监测血压，与假手术组动物相比，模型组动物血压明显降低。实验结束后，对处死动物进行大体尸解，可见大鼠腹腔内有血性渗出液，带恶臭，盲肠肿胀变黑，发生坏疽及粘连，空肠肠管胀气，肝、肺充血水肿，尚有瘀点及瘀斑。同时，血液学检查发现，CLP组动物全血LD含量较假手术组动物显著升高。上述症状与文献报道的大鼠感染性休克模型一致［4-5］。

图1 注射用生脉对感染性休克大鼠心肌损伤的影响

静脉给予注射用生脉可显著升高感染性休克大鼠的血压，减少全血中LD的含量，与假手术组相比差异有统计学意义。表明注射用生脉可以改善感染性休克大鼠的血流动力学，提升血压;改善感染性休克时的细胞代谢障碍。

另有研究报道，大量释放NO可能是引起感染性休克血液动力学改变的原因之一［6］。感染性休克时，在脂多糖或多种细胞因子的刺激下，巨噬细胞内的iNOS过度表达，产生大量的NO。NO合成的过量增加一方面可结合超氧阴离子生成过氧亚硝基阴离子，造成心肌细胞氧化损伤，降低心肌收缩力;另一方面，NO含量升高可刺激环鸟苷酸(cGMP)产生，使心肌细胞内钙离子浓度降低，心肌收缩力显著下降，心功能降低，最终导致急性心功能衰竭。本实验中给药组大鼠血清NO含量明显低于模型组，SOD活力则有显著增加，说明注射用生脉可能减轻心肌细胞的氧化损伤而发挥心肌细胞保护作用。

大鼠心脏的病理组织学检查结果同样证实了注射用生脉的心肌细胞保护作用，模型组大鼠心肌组织有大量炎性细胞浸润，心肌纤维排列紊乱，心肌细胞有不同程度的变性、坏死，给药组动物心肌细胞的损伤明显轻于模型组。

［1］ 徐琰.生脉散对慢性心力衰竭大鼠模型心室重构的影响［J］.南京中医药大学学报，2012，28(3):241-244.

［2］ 范秀风，姬雪梅.生脉注射液治疗急性心肌梗死45例［J］.陕西中医，2010，31(10):1299-1300.

［3］ 黄道永，陈矛，林凯旋.生脉注射液治疗脓毒性休克的疗效观察与体会［J］.吉林医学，2011，32(17):3436-3438.

［4］ 谷长平，张岩，张成明，等.盐酸戊乙奎醚对感染性休克大鼠心肌核因子-κB 的影响［J］.中国现代医学杂志，2011，21(5):567-571.

［5］ 张敏，吴玉斌，于姝杨.水通道蛋白2在脓毒症大鼠肾脏的表达及意义［J］.中国小儿急救医学，2009，16(4):365-368.

［6］ 孙晓霞，王健春，唐笑迪，等.人参二醇组皂苷对感染性休克大鼠血清一氧化氮合酶及一氧化氮的影响［J］.中国现代医学杂志，2006，16(15):2298-2300.