张海宁 牛玲 傅鸣郁 田静 安新江

慢性充血性心力衰竭(chronic heart failure，CHF)是绝大多数心脏病发展的终末阶段，已经严重危害人们的健康。有资料显示，我国的住院儿童中各种原因导致的慢性心力衰竭的患儿有逐年增多趋势。与成人不同，导致儿童慢性心衰的主要疾病不是缺血性心脏病而是以先天性心脏病、慢性心肌炎、原发性心肌病为主。而病情演变过程和预后也与成人期不同，有效的治疗可使预后明显改观。探索、评价新的治疗方法一直是研究的热点。黄芪是临床常用的补气中药，黄芪注射液是黄芪提取物，其主要成分为黄芪皂苷。本研究通过阿霉素造大鼠慢性心衰模型来观察黄芪注射液对心功能的保护作用及对血清的IL-6和TNF-α水平的影响。

1 资料与方法

1.1 慢性心衰大鼠模型的建立 雄性wistar大鼠以1.5 mg/kg体重剂量腹腔注射阿霉素，每周2次，共7周，累积总量21 mg/kg，体重进行造模;正常组则注射相同体积的生理盐水。

1.2 动物分组及给药方法 随机分成三组:对照组，模型组和黄芪组(4 ml/kg)，每组8只。从第8周开始，即停止注射阿霉素后，每天灌胃给药1次，连续给予灌胃四周。黄芪注射液(20 g/10 m l/支)，正大青春宝有限公司，批号:0901073。

1.3 血液动力学检测 大鼠称重，腹腔注射0.4%戊巴比妥钠40 mg/kg麻醉，仰卧位固定，颈部备皮消毒。颈部正中切口，钝性分离右侧颈总动脉，结扎远心端，将充满1%肝素的导管自右颈总动脉徐缓进入，同时密切观察压力曲线，待导管进入左心室，即示波显示为左心室压力曲线后，稳定5 min，记录所需血液动力学参数。测量指标包括心率(Heart rate，HR)、左室收缩压(Lleft ventricular systolic pressure，LVSP)、左室舒张末压(Left ventricular end diastolic pressure，LVEDP)，左室内压最大上升速率(Left ventricular maximal rates of pressure rise，+dp/dtmax)，左室内压最大下降速率(Left ventricularmaximal rates of pressurefall，-dp/dtmax)。连续测取5次数据，每次隔3 min，每一数据由3次较稳定数据求平均值作为结果。

1.4 血样的采集及处理方法 断头取血后置于采血管中，自然凝固，取血清，4℃，3000 rpm离心，放入-20℃冰箱保存待检。采用放射免疫方法测定IL-6与TNF-α的含量。

1.5 左室质量指数的测定 动物采血后，用颈椎脱臼法处死大鼠，剖胸取出心脏，用冰生理盐水洗净残血，迅速分离左心室(包括室间隔在内)，用滤纸吸干，称取质量(单位为mg)，并计算左室质量指数。左室质量指数=左室质量/体重。

2 结果

2.1 黄芪对心衰大鼠血流动力学影响 阿霉素给药后，模型组与对照组比较，心率值无差异(P＞0.05)，LVSP显著下降(P＜0.01)，LVEDP显著升高(P＜0.01)，+dp/dtmax显著下降(P＜0.01)，-dp/dtmax显著下降(P＜0.01)。黄芪组与模型组比较，心率值差异无统计学意义，LVSP显著上升(P＜0.01)，LVEDP显著降低(P＜0.01)+dp/dtmax显著升高(P＜0.01)，-dp/dtmax显著升高(P ＜0.01)。

表1 黄芪对阿霉素诱导心衰大鼠血流动力学的影响(±s)

表1 黄芪对阿霉素诱导心衰大鼠血流动力学的影响(±s)

注:＊＊P＜0.01，与对照组比;##P＜0.01，与模型组比较

组别 例数 HR(次min)LVSP(mm Hg)LVEDP(mm Hg)+dp/dtmax(mm Hg/s)-dp/dtmax(mm Hg/s)对照组 8 423.13±21.70 139.84±5.75 8.3±0.83 3813.75±354.97 3755.13±553.05模型组 8 409.13±15.63 103.25±9.08＊＊ 15.35±1.71＊＊ 2139.75±126.07＊＊ 2522.5±338.78＊＊黄芪组 8 401.13±15.10 124.04±11.83## 11.54±2.14## 3078.75±299.62## 3265.75±245.97##

2.2 左室质量指数 与对照组比较，模型组左室质量指数显著升高(P＜0.01)，与模型组比较，黄芪组左室质量指数降低(P ＜0.05)，见表2。

表2 黄芪对阿霉素诱导心衰大鼠左心室质量指数的影响(±s)

表2 黄芪对阿霉素诱导心衰大鼠左心室质量指数的影响(±s)

注:*P＜0.01，与对照组比;#P＜0.05，与模型组比较

组别(n)左心室指数对照组(8)8.3±0.83模型组(8) 15.35±1.71＊＊黄芪组(8) 11.54±2.14#

2.3 IL-6与TNF-α含量的测定 与对照组比较，模型组IL-6含量及TNF-α含量均显著升高(P＜0.01);与模型组比较，黄芪组IL-6含量及TNF含量均显著降低(P＜0.01)，见表3。

表3 黄芪对阿霉素诱导心衰大鼠血清TNF-α、IL-6含量的影响 (±s，n=8)

表3 黄芪对阿霉素诱导心衰大鼠血清TNF-α、IL-6含量的影响 (±s，n=8)

注:＊＊P＜0.01，与对照组比;##P＜0.01，与模型组比较

组别 TNF-α(ng/ml) IL-6(ng/L)对照组0.58±0.08 107.24±12.68模型组 2.54±0.18＊＊ 234.32±32.91＊＊黄芪组 1.44±0.22## 159.71±22.65##

3 讨论

近年来随着对心衰的发生、发展机制研究不断深入，心衰治疗策略也有了根本性转变。即从短期血液动力学和药理学措施转变为长期的修复性策略。阻断神经内分泌系统的激活，阻断心肌重塑成为心衰治疗的关键环节。目前的治疗包括应用β受体阻滞剂、血管紧张素转换酶抑制剂、洋地黄类及非洋地黄类正性肌力药、利尿剂、醛固酮拮抗剂和血管紧张素受体拮抗剂等，但效果仍不理想。临床上，可以观察到黄芪注射液对心力衰竭症状有改善作用，但深入的作用机制和应用后相关指标的变化仍需深入研究和探讨。

本实验采用阿霉素诱导建立的是毒物致心力衰竭模型［1，2］，阿霉素可以诱导产生大量自由基引起心肌能量代谢损害［3］。血流动力学的结果表明，阿霉素建立的心衰模型是成功的。已有研究表明应用黄芪注射液治疗后可增加左心室射血分数［4］，改善心功能。黄芪还具有很强的正性肌力作用［5，6］。本实验结果表明，应用黄芪注射液治疗后，心衰模型大鼠的血流动力学指标，包括LVSP、LVEDP、+dp/dtmax，-dp/dtmax等都得到了显著改善。而黄芪注射液改善血流动力学指标，保护心脏作用的机理，可能是通过维持心肌损伤小鼠的SOD活性，减少脂质过氧化物MDA的生成，调控机体自由基的平衡实现的［7］。实验还发现［8］，黄芪注射液对阿霉素诱导小鼠心肌细胞凋亡具有拮抗作用，这也是黄芪产生这种作用的机制之一。

心室重构是心功能不全发展的必然过程，也是影响预后最主要的指标之一。本研究对左室质量的测定显示，应用黄芪注射液后，左室质量指数降低，说明黄芪可抑制心室重构。其机理可能与心肌局部血管紧张素Ⅱ含量明显降低有关［9］。同时黄芪还可以抑制心肌纤维化，降低凋亡基因［10］。

研究证实，慢性心力衰竭患者血清细胞因子IL-6、TNF-α显著高于正常对照组，且随着心功能的恶化而逐渐升高，细胞炎性因子TNF-α、IL-6水平与心功能分级正相关［11］，血清IL-6和TNF-α水平是CHF严重程度有用预测指标。神经内分泌细胞因子系统的持续激活是导致心室重塑和心衰恶化的重要原因［12-14］。IL-6调节免疫和炎症反应，还能通过直接损伤心肌细胞和促进心肌细胞肥大和加重心室重构。TNF-a可以诱导诱导型一氧化氮合酶(iNOs)表达，从而刺激心肌组织产生大量NO，直接促发心肌细胞凋亡;还可以降低心肌细胞内环磷酸腺苷水平，使三磷酸腺苷(ATP)合成不足，引起心肌收缩性减退;促进心肌蛋白质分解加速，导致心肌细胞凋亡而进一步损害心功能［15］，造成心衰恶化。本实验中模型组大鼠的TNF-α、IL-6明显高于对照组，与上述研究结果一致，说明IL-6和TNF-α参与了心衰的发生和发展，应用黄芪注射液后IL-6和TNF-α指标较心衰模型组有显著降低，提示黄芪可降低心衰发展中的炎性因子水平，阻断参与心衰发展的炎性反应。

本研究从血流动力学、心室重量指数，炎性因子水平等角度证实，黄芪对阿霉素诱导的心衰有保护作用，能够改善心衰小鼠血液动力学指标，逆转心室的重构，抑制炎症反应。为心衰治疗方法和临床用药提供了客观依据，也丰富了中医药治疗充血性心力衰竭的理论。

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