赵 稷

(佳木斯大学药学院,黑龙江 佳木斯 154007)

小建中汤来源于张仲景所著《伤寒论》一书,是温中补虚、缓急止痛之方剂。全方由白芍 (炒 )、大枣、桂枝、甘草 (蜜炙)、生姜以及饴糖组成。用于治疗中焦虚寒,气血不足之证而兼伤寒表证,以及治脾虚腹痛者。本方既有双补阴阳、调节脾胃的作用,又有调和营卫兼以解表功能。由于小建中汤疗效确切,故应用极为广泛,临床主要用于治疗脾胃虚寒所致的脘腹挛痛、喜温喜按或虚劳发热等症。现代小建中汤的临床应用愈加广泛,用小建中汤本身及根据不同病症加味其它中药不仅能够治疗消化道系统疾病[1～3],而且根据异病同治理论,对治疗妇科疾病、男性不育、儿科病等多种病症均有确切的疗效[4]。本文欲揭示小建中汤治疗疾病的物质基础,分别提取其中不同的成分针对脾虚症状小鼠进行初步分析。

1 试验材料

试验动物:昆明种小鼠由佳木斯大学试验动物中心提供,试剂:乙醇为分析纯,药材:白芍(炒 )、桂枝、甘草 (蜜炙 )世一堂中药饮片厂生产。

2 实验方法

2.1 小建中汤水提液及乙醇提取液制备

将各药材粉碎成粗粉,按白芍(炒):桂枝:生姜:大枣:甘草 (蜜炙 )为 2：1：1：1：0.6的比例 ,精密称定 50g药材粗粉 ,加10倍量蒸馏水提取2h,过滤,滤渣再加 8倍量水提取一次,合并滤液,浓缩,加蜂蜜18g,混合均匀,得小建中汤水提取液,备用。取50g药材粗粉,加10倍量70%乙醇回流提取2h,过滤,再加8倍量70%乙醇回流提取1次 ,合并滤液,减压回收乙醇,得浸膏,加18g蜂蜜混匀,得小建中汤乙醇提取液,备用。取50g药材粗粉加10倍量水,用水蒸气蒸馏法提取挥发油5h,备用。

2.2 实验动物分组、造模及给药

小鼠 112只,雌 雄各半 ,体 重 22～26g,随机分为 7组,分别为:正常对照组16只、模型组16只、小建中汤水提取液高剂量组16只、中剂量组 16只、醇提取液高剂量组16只、中剂量组16只,挥发油高剂量组 16只。除正常对照组外,其它各组均造饮食失节型脾虚模型(灌胃100%精炼猪脂0.4mL/10g,每日1次,连续9d),观察精神状态、运动状况、皮毛色泽、饮食、排便和体重等方面的变化。

造脾虚模型成功后,正常对照组、模型组给予等体积的蒸馏水,其余各组分别给予对应的药物,每日灌胃1次,连续7d。其间密切观察小鼠的外观体征,并每日称量体重。

2.3 小建中汤不同提取物对脾虚小鼠胃排空、小肠推进、脾及胸腺指数的影响[5,6]

每组各取小鼠8只,末次给药后禁食24h,每只小鼠灌胃0.2mL 0.1%甲基橙水溶液,于 20min后处死,摘取胃,剪开,充分洗于10mL蒸馏水中,用5%的 NaHCO3溶液调 pH至6～6.5,以 3000r/min离心 30min,取上清液 ,于 420nm处测定吸光度,计算小鼠胃中甲基橙残留率。胃残留率(%)=胃甲基橙光密度 /基数甲基橙光密度×100%。

每组取小鼠8只 ,于次日末次给药(所有药物均含50%碳素墨汁)后30min,脱颈椎处死,解剖 ,测量幽门至色素最前端的距离及幽门至回盲部的距离,按下式计算小肠推进率:小肠推进率=色素推进长度 /小肠全长×100%。

脱颈椎处死后,摘取脾脏、胸腺 ,生理盐水洗涤,晾干 ,称重,按以下公式计算脏器指数:脏器指数=脏器重量(mg)/体重 (g)。

3 结果

3.1 小建中汤水提液及醇提液提取

按 2.1方法进行提取,水提液提取率为 14.15%,醇提液提取率为32.14%,挥发油提取率为0.30%。

3.2 小鼠一般状况

除正常对照组外,其它各组小鼠大多均在第4、5天即开始出现粪便松软膨大、不成形,甚至便溏,毛发枯槁、疏散、畏寒,成群蜷缩;第6天后出现消瘦,体重减轻,肛周污秽,部分动物出现脱肛,四肢无力,成匍匐状,动作、反应迟钝,有的甚至行动歪斜 ,拱背,第7天 ,小鼠体重已经明显下降,且逐天降低,提示造模成功。给予药物后(除挥发油组外 ),各给药组小鼠自第5天起,状况逐渐恢复 ,表现为脱肛情况明显改善,活动增多,反应敏捷,皮毛渐渐恢复正常光泽,很少出现成群蜷缩;而模型组及挥发油组症状未见明显改善。

3.3 小建中汤不同提取物对脾虚证小鼠体重的影响

各给药组 (除挥发油组外)小鼠体重明显恢复,与模型组比较有显著差异,小建中汤醇提液高、中剂量组小鼠体重稍较水提取液高、中剂量组明显,挥发油组没影响,结果见表1。

3.4 小建中汤不同提取物对脾虚小鼠胃排空、肠推进率、脾及胸腺指数的影响

小建中汤水提液高、中剂量组及醇提液高、中剂量组均可明显降低脾虚证小鼠胃内色素残留率,促进胃排空,与模型组相比较 ,差异显著;水提液较醇提液效果明显,挥发油组未见改善。水提液高、中剂量组及醇提液高、中剂量组均可明显增加小肠推进运动,与模型组比较,差异显著,醇提液高、中剂量组较水提液组效果明显;挥发油效果较差。水提液高、中剂量组及醇提液高、中剂量组均可明显增加脾虚证小鼠胸腺、脾的重量,提高胸腺指数及脾指数,且汤醇提液高剂量组效果最好,挥发油组对胸腺指数有提高,结果见表2。

表1 小建中汤不同提取物对脾虚证小鼠体重的影响(±s)

表1 小建中汤不同提取物对脾虚证小鼠体重的影响(±s)

与正常对照组比较:#P＜0.05,##P＜0.01;与模型组比较:*P＜0.05,**P＜0.01。

组 别体 重造模前(g) 造模后(g) 给药后(g)正常对照组 24.67± 6.33 27.25± 0.52 29.26± 0.71**模型对照 25.37± 1.58 21.13± 0.36## 20.25± 1.08##水提液 (高 ) 25.00± 1.01 22.60± 0.89## 24.78± 0.45**水提液 (中 ) 24.87± 0.88 22.19± 0.64 24.57± 0.76**醇提液 (高 ) 25.80± 1.81 21.84± 0.66## 24.22± 0.11**醇提液 (中 ) 25.03± 1.06 21.63± 0.15## 25.99± 1.01**挥发油组 24.92± 0.33 21.00± 0.77 20.80± 0.95

表2 小建中汤不同提取物对脾虚小鼠的胃排空功能、胸腺及脾指数的影响(±s)

表2 小建中汤不同提取物对脾虚小鼠的胃排空功能、胸腺及脾指数的影响(±s)

与正常对照组比较:#P＜0.05,##P＜0.01;与模型组比较:*P＜0.05,**P＜0.01。

组 别 甲基橙残留率% 肠推进率% 脾指数(mg/g) 胸腺指数(mg/g)空白对照组 24.18± 4.64 85.34± 12.65 0.1460± 0.0164 0.0133± 0.0030模型对照组 33.97± 2.15## 52.91± 16.56## 0.1356± 0.0031## 0.0103± 0.0041##水提液 (高 ) 27.69± 1.05* 73.41± 9.731** 0.1488± 0.0240* 0.0122± 0.0023**水提液 (中 ) 26.13± 2.14** 70.16± 8.23** 0.1481± 0.0138** 0.0120± 0.0032*醇提液 (高 ) 31.35± 3.54** 82.43± 2.59** 0.1643± 0.0218** 0.0124± 0.0019**醇提液 (中 ) 30.18± 2.56** 79.57± 8.92** 0.1517± 0.0193* 0.0117± 0.0037*挥发油组 33.90± 3.19 54.99± 13.71 0.1399± 0.0426 0.0115± 0.0028*

4 讨论

小建中汤挥发油成分单独使用对脾虚小鼠作用不明显,但目前市面上的小建中组方都是挥发油成分与水提成分共同应用的,不能说明挥发油成分没有疗效。从本实验结果显示,除对小鼠胃排空方面醇提成分较水提成分稍差意外,其他方面醇提成分都优于水提成分,说明醇提成分对治疗饮食失节型脾虚模型小鼠效果更好。

蜂蜜具有滋润滑肠的作用,常作为缓泻剂,其功能主治为补中、润燥、止痛、解毒。常用于脘腹虚痛、肠燥便秘、治疗习惯性便秘、老年人和孕妇便秘,以及结肠炎、胃和十二指肠溃疡、儿童痢疾等疾病。而饴糖有甘温补中,调养脾胃,缓急止痛作用。又根据《药征》认为蜂蜜在功能主治方面与饴糖相似,都能够缓解诸多症状,由于无法购买到饴糖,所以用蜂蜜代替饴糖。

脾虚证会出现胃脘痛、腹痛、泄泻、呕吐、反胃、痰饮、水肿、便血等症状,其中胃脘痛、呕吐、反胃、便血属于胃功能异常;腹痛、泄泻、便血属于肠功能异常。所以本实验选择测定胃肠功能的指标作为脾虚证的指标,并同时选择一般症状及粪便、体重变化等指标进行考察。

脾虚模型建立的方法有:大黄型脾虚造型法、番泻叶型脾虚造型法、利舍平型脾虚造型法、饮食失节型脾虚证造型法、四氯化碳致肝郁型脾虚造型法。其中应用大黄型脾虚造型法和番泻叶型脾虚造型法建造模型不单是脾虚也会造成肾虚;应用利舍平型脾虚造型法建造模型出现脾虚的同时也会影响神经系统的功能;应用四氯化碳致肝郁型脾虚造型法建造脾虚模型,不仅仅是脾虚也会造成肝的损伤,影响造血功能;所以应用饮食调节建造模型是最佳方案。

[1]韩淑华,林晓波.小建中汤的临床应用 [J].中医中药,2007,12(4):97

[2]张苗海.小建中汤在日本的临床应用 [J].国外医学中医中药分册,2004,26(1):13

[3]徐文进.中西医结合治疗脾虚型慢性溃疡性结肠炎98例的临床疗效观察 [J].中国中医结合脾胃杂志,1994,2(2):69

[6]崔瑞柏.小建中汤新用[J].山西中医,2004,20(2):44-45

[5]陶玲,史琴,沈祥春.小建中汤有无饴糖对实验性小鼠脾虚模型的作用研究 [J].中医药理与临床,2008,24(6):12-14

[6]廖志航,郑凯,李春林,等.胃康颗粒对实验性脾虚动物胃肠功能的作用 [J].成都中医药大学学报,2004,27(3):44-51