陈晓珍

(广州市质量监督检测研究院 国家加工食品质量监督检验中心，广东 广州 510110）

随着食品种类的增多和食品添加剂的大量使用,食品检验的分析任务越来越大。大多数糕点因货架期较短，而容易腐败、发霉。苯甲酸、山梨酸等防腐剂由于价格低廉防腐效果好，常作为食品添加剂用于糕点等食品的防腐。富马酸二甲酯（Dimethyl Fumarate，DMF）作为美国20世纪80年代开发出来的一种防霉剂，由于其能抑制多种霉菌、酵母菌及细菌的生长和繁殖，近年来作为防腐剂在食品及饲料工业上得到广泛的应用。安赛蜜（乙酰磺胺酸钾）和糖精钠作为人工合成甜味剂也是糕点中常用的食品添加剂。由于上述添加剂都对人体健康有不同程度的危害，国家对这些食品添加剂的使用量有严格的规定，为保证食品质量安全，建立快速有效的检测方法具有重要的意义。

1.色谱条件的选择和优化

(1)检测波长的选择

将5种物质标准混合溶液进行色谱分离并用二极管阵列检测器在波长190nm～350nm范围内进行紫外扫描。结果表明5种物质的紫外吸收波长分别为：安赛蜜226nm，糖精钠218nm，苯甲酸216nm，富马酸二甲酯218nm，而山梨酸在252nm和212nm2个波长下具有吸收峰。实验选用波长220nm作为糖精钠、苯甲酸、富马酸二甲酯的检测波长，230nm作为安赛蜜和山梨酸的检测波长。

(2)流动相的选择

试验分别用乙腈-水、甲醇-水、乙腈-甲酸水溶液、乙腈-硫酸铵水溶液和甲醇-硫酸铵水溶液作为流动相作等度洗脱，均不能将5种物质完全分离；用甲醇-硫酸钠水溶液能将目标物质分离，但是富马酸二甲酯的色谱峰拖尾严重。通过筛选验证，最后采用甲醇和含2.84g/L硫酸钠+2.60g/L溴化四丁基铵的水溶液（用冰乙酸调节pH至6）为流动相，5种被测组分可以很好的分离，这可能是由于在流动相中加入了带正电荷的四丁基溴化铵，可以促进带有弱负电的富马酸二甲酯分离，改善出峰效果。

2.样品前处理优化

(1)分散基质的选择

糕点中常常含大量的油脂和蛋白，利用传统的溶剂和超声波辅助提取时会由于蛋白质变形后与油脂一起作用，将目标物质包裹起来，无法有效分散样品，影响提取效果，回收率较低，且油脂的存在不但会形成干扰、影响结果的准确性，而且还会污染色谱柱，损害仪器的性能。实验采用改良的基质固相分散技术，分别考察了无水硫酸钠、中性氧化铝、无水硫酸镁作为样品分散基质对糕点中5种食品添加剂测定的影响。结果表明，用中性氧化铝作为分散基质不但提取效果好，回收率高，且由于氧化铝对油脂和蛋白质的吸附作用，样品中杂质净化完全，干扰较少，有利于目标物质的定性和定量。

(2)提取溶剂的选择

分别考察了水、甲醇、乙腈、甲醇-水作为提取溶剂对样品回收率的影响。当用纯水作提取溶剂时，糖精钠和安赛蜜的提取效果最好，平均回收率接近100%，富马酸二甲酯由于极性较弱，用水提取效果较差。如果用甲醇和乙腈作为提取溶剂，则富马酸二甲酯的回收率高，苯甲酸和山梨酸的提取效果比较差。最后选择甲醇-水作为提取液，并研究其体积比与pH对5种物质提取效果的影响。结果表明当甲醇和水体积比为为7:3，pH为7.5时，5种物质的回收率均可达90%以上。

3.方法的线性范围、检出限和定量限

以质量浓度-峰面积作校正曲线，得到线性回归方程，5种食品添加剂在 1μg/mL～200.00μg/mL范围内线性关系良好，相关系数均大于0.9995，线性方程见表1。

表1 5种食品添加剂的标准曲线、检测限(LOD)和定量限(LOQ)

以3倍信噪比为检出限（LOD），计算得出5种食品添加剂的检出限分别为0.016mg/kg～0.039mg/kg。以10倍信噪比为定量限(LOQ)，计算出5种食品添加剂的定量限分别为 0.050mg/kg～0.120mg/kg。

4.方法的回收率和精密度

采用在空白样品中添加标准溶液的方法，对常见的4种糕点：月饼、蛋糕、面包和饼干进行不同浓度的加标回收实验，每个品种4次重复结果见表2。

由表2可见，5种食品添加剂在添加浓度为20.0mg/kg～120.0mg/kg范围内平均回收率为89.5%～101.6%，相对标准偏差为0.98%～3.07%，完全满足食品添加剂分析的要求。

表2 5种食品添加剂样品加标回收率和RSD（n＝4）

结束语

高效液相色谱法简便、快速、定量准确、回收率高且精密度好,可以用于含脂糕点中3种防腐剂：苯甲酸、山梨酸和富马酸二甲酯，2种甜味剂：安赛蜜、糖精钠的同时测定。样品运用固相分散萃取技术进行提取净化，以中性氧化铝为分散剂以提高回收率并除去样品中的脂肪等杂质，所得的色谱图干扰少，峰形尖锐对称，5种食品添加剂在 1μg/mL～200.00μg/mL范围内线关系良好。

[1]王春荣.张济.刘岚铮；食品中多种合成色素的反相高效液相色谱法测[J].中国公共卫生，2005.03.