刘宝芹,邵雪斋,方艳秋

（1.承德医学院附属医院血液科,河北承德 067000;2.吉林省人民医院医学实验诊治中心,吉林长春 130021）

尿激酶（urokinase or urokinase-type plasm inogen activate,uPA）是由纤维细胞、单核细胞、中性粒细胞、上皮细胞等合成和分泌的一种丝氨酸蛋白水解酶,通过与细胞表面特异受体uPAR（CD87）结合而活化。uPA和uPAR的相互作用共同参与机体纤溶酶系统的调节作用。业已证明uPA-uPAR与实体瘤的浸润及转移密切相关[1,2],尿激酶型纤溶激活系统在急性髓系白血病引起纤溶亢进导致出血方面的研究较多,其作用得到公认[3]。而尿激酶型纤溶酶原激活系统在急性白血病中及良性血液病的表达及意义研究较少,值得我们去研究及探索。

1 材料及方法

1.1 病例选择

急性髓性白血病22例,均系本院确诊的初治患者。男14例,女8例,年龄在19-74岁,按2001WHO髓系肿瘤分类法分型,AML-M 2占13例,AML-M 3占5例,AML-M 4占1例,AML-M 5占3例。良性血液病组34人,其中缺铁性贫血8人,巨幼细胞性贫血8人,混合性贫血6人,溶血性贫血6人,纯红再障2人,药物性血小板减少症患者2人,传染性单核细胞增多症患者2人。其中男18例,女16例,抨龄在15-70岁。

1.2 试剂与方法

uPAR（CD87）单克隆抗体购于美国BD公司,流式细胞仪测定骨髓单个核细胞中粒单细胞uPAR（CD87）水平。ELISA试剂盒购于美国ADI公司,严格按照说明书操作要求检测血浆uPA水平。

1.3 统计学处理

2 结果

2.1 血浆uPA水平结果

急性髓系白血病组血浆uPA水平为（0.655 5±0.098 4）ng/ml,高于良性血液病组（0.302 4±0.123 7）ng/ml,差异具有统计学意义（P＜0.05）。

2.2 uPAR在骨髓单个核细胞的表达

流式细胞术检测急性髓系白血病组骨髓单个核细胞uPAR阳性表达率为（54.326 4±7.600 5）%,高于良性血液病组（16.181 8±11.725 9）%,差异具有统计学意义（P＜0.05）。

2.3 uPA与uPAR的相关性

分析血浆uPA水平与骨髓单个核细胞uPAR水平的相关性结果显示,两者呈明显的正相关,血浆uPA水平表达高时,骨髓单个核细胞uPAR水平也有增高的趋势,见表1。

表1 uPA水平与 uPAR表达相关分析（±s±s）组别 n uPA（ng/ml） uPAR（阳性率%） r P急性髓系白血病组 22 0.655 5±0.098 4 54.326 4±7.600 5 0.614 ＜0.05良性血液病组 34 0.302 4±0.123 7 16.181 8±11.725 9 0.921 ＜0.05

3 讨论

急性白血病常并发严重出血,除与血小板少、凝血因子异常外,也与白血病细胞产生的uPA激活纤溶酶系统引起原发性纤溶密切相关[4]。我们临床观察结果证实急性髓系白血病组血浆uPA水平显著高于良性血液病组,检测血浆uPA水平对于指导临床预判急性髓系白血病的出血倾向具有重要意义。

急性白血病复发尤其骨髓外复发仍是治疗失败的重要原因。研究报道表明,高表达uPAR的急性髓系白血病患者常出现髓外组织浸润,提示uPAR在白血病细胞游离骨髓腔,进入髓外组织的过程中发挥重要作用[5-9]。本实验应用流式细胞学技术测定骨髓单个核细胞uPAR水平,uPAR在急性髓系白血病高表达,与文献相符。同时本研究显示在急性髓系白血病中患者除高表达uPAR外,血浆uPA也在急性髓系白血病患者中呈高水平表达,uPA与uPAR表达在急性髓系白血病中呈正相关性。我们推测uPA和uPAR的相互作用一方面可以激活基质金属蛋白酶降解细胞外基质和层粘连蛋白、纤维连接蛋白、纤维蛋白聚糖胶原等基膜成分,从而使肿瘤细胞穿透正常的骨髓组织屏障,引起白血病细胞的浸润及转移;另一方面uPA和uPAR的相互作用可能促进白血病细胞进一步分泌uPA,在进一步增强白血病细胞向髓外侵袭的同时,大量活化的uPA进入外周血中。综上,uPA和uPAR的水平检测可以为急性白血病的病情监控、预后判断和探索实验性uPA-uPAR靶向治疗急性白血病提供更多的科学依据。

[1]潘其壮,覃展偶.uPA系统与肿瘤的研究进展[J].医学综述,2010,16（14）:2140.

[2]PlougM.Structure-function relationships in the interaction between the urokinase-tye plasm inogen activator and its receptor[J].Curr Pham Des,2003,9（19）:1499.

[3]谢 燕,王兆钺,张 威,等.白血病细胞纤溶活性及机制的研究[J].中国病理生理杂志,2007;23（2）:250.

[4]陈 怡,俞 康,江松福.纤溶酶相关蛋白在急性髓系白血病血浆和骨髓中的表达[J].临床血液学杂志,2000,13（1）:26.

[5]Scherrer A,Wohlwend A,Kruithof Ek,etal.Plasm inogen activation in human acute leukaem ias[J].Br JHaematol,1999,105（4）:920.

[6]BlasiF,CamelietP uPAR a versatile signaling orchestrator[J].Nat Rev Mol Cell Biol,2002,3（12）:932.

[7]王津媛,白 霞,王爱青,等.急性髓系白血病细胞CD87表达及其意义[J].中华儿科杂志,1999;37（6）:2.

[8]王 静,汪洪毅,王 伟.急性白血病患者血浆中可溶性尿激酶型纤溶酶原激活剂受体水平的检测[J].白血病.淋巴瘤,2006,15（1）:44.

[9]白 霞,傅建新,奚晓东,等.尿激酶受体基因反义RNA转移体系的建立及其在白血病研究中的应用[J].中国实验血液学杂志,2003,11（6）:591.