项 荣,白马肃,史嵩海,张红燕

（1.西藏民族学院附属医院 内一科,陕西 咸阳 712082;2.陕西中医学院,陕西 咸阳 712083）

肝纤维化为诸多慢性肝病发展至肝硬化过程中所共有的病理组织学变化,肝纤维化的发生是由于ECM合成增多,降解减少而在肝内过度沉积所致[1]。活化的肝星状细胞（hepatic stellate cell,HSC）是ECM的主要来源[2],HSC的激活是肝纤维化发生、发展的关键环节。

1 对象与方法

1.1 本实验研究采用四氯化碳（CC14） 肝纤维化大鼠模型为研究对象,探讨肝纤维化大鼠血MMP-2和PDGF-BB表达的影响,从分子水平探讨其机理。CC14是诱导实验动物产生肝纤维化和肝硬化最广泛使用的化学性肝毒物[3]。

1.2 实验动物及试剂 ①实验动物:清洁级大鼠22只,雄性,体重200 g±20 g,由第四军医大学实验动物中心购进。动物合格证号:医动字第007-009号。②MMP-2和PDGF-BB抗体及免疫组化试剂盒:美国ADL公司生产。③100%CCL4分析纯,西安化学试剂厂生产,批号:0501240

1.3 肝纤维化模型制备及分组 将实验大鼠在实验室喂养1周后开始实验,随机抽取10只作为A组正常对照组,其余大鼠实验第一天每只动物皮下注射40%四氯化碳植物油溶液（100%CCL4用植物油稀释为40%）0.5m l/100 g,以后每隔3天皮下注射40%四氯化碳植物油溶液0.3ml/100 g,至第8周末从造模动物中随机处死2只大鼠作肝纤维化病理学检查,如有2期以上纤维化形成,即确定肝纤维化模型复制成功。

1.4 肝纤维化血清指标检测 MMP-2和PDGF-BB;检测方法:酶联免疫法。

2 结果

见表1。

表1 大鼠血清MMP-2、PDGF-BB检测结果（±s±s）组别 N MMP-2（ng/ml） PDGF-BB（pg/ml）空白组 10 0.472±0.308* 293.63±2.15*模型组 8 3.910±0.287 458.76±1.72注:与模型组比较,*P＜0.01

3 讨论

在肝纤维化的早期,MMP-2活化即增多,降解正常肝脏基质内的Ⅳ型胶原,导致细胞一基质间的联系破坏,进一步促进HSC的活化和增殖并向肌成纤维细胞（myofibrob last,M F）转化,而MF已被证实在肝纤维化形成中起主要作用。较多研究认为MMP-2在肝纤维化进展阶段升高,而在肝硬化和肝纤维化恢复期则逐渐降低,本实验通过测定肝组织MMP-2含量,发现模型组与空白组作比较,MMP-2含量有较显著的升高（P＜0.O1）;PDGF-BB在肝纤维化中的主要作用是使H SC增殖,促进胶原合成和抑制胶原降解,在肝纤维化发生、发展过程中发挥十分重要的作用,PDGF-BB是目前已知的体外HSC最强的丝裂原[5],PDGF-BB在肝组织的表达与肝纤维化程度、炎症活动度及病理组织学分度呈正相关。PDGF-BB可促进ECM沉积在肝脏,形成肝纤维化,研究中发现,模型组与空白组作比较,PDGF-BB含量有较显著的升高（P＜0.01）。

[1]Vizzutti F,A rena U,R an anelliRC,et al.L iver stiffnessm easu rement predicts severe ortal hypertension in patients withHCV-related cirrhosis[J].Hepatologx,2007,45（5）:1290.

[2]贾继东,王惠吉.肝纤维化.见漆德芳主编肝硬化[M].第1版.北京:科学技术出版社,2000.85-112.

[3]Okazaki I,Watanabe T,Hozawa S,et al.Reversibility of hepatic fibrosis:from the first report of collagenase in the liver to the possibilityof gene therapy for recovery[J].Keio JMed,2001,50（2）:58.

[4]展玉清,李定国.肝星状细胞活化的功能改变[J].国外医学消化系统疾病分册,1999,19（1）:27.