卢北燕,孙瑞擎,郭 昕

(佳木斯大学附属第一医院妇产科,黑龙江 佳木斯 154003)

宫颈癌是女性最常见的生殖道恶性肿瘤,是引起世界患癌症妇女患者死亡的重要原因,严重危害着妇女的生命和健康。众所周知,子宫颈病变从良性病变发展为上皮内瘤样变(CIN)、原位癌、浸润癌是一个连续的过程。流行病学调查显示,在这一过程中,人乳头状瘤病毒(HPV)的感染、细胞癌基因的激活、抑癌基因的失活和细胞凋亡的抑制,均参与了宫颈癌的发生和发展。几年来的研究发现,人类恶性肿瘤的发生、发展及预后与细胞凋亡相关基因的改变密切相关。基因水平上诱导凋亡相关基因的失活,以及抑制凋亡基因的过度表达,是恶性肿瘤发生的一种重要的原因。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取佳木斯大学附属第一医院 2009— 06～ 2009— 10间手术切除宫颈组织及门诊活检宫颈组织50例,经临床和病理确诊的患者,临床资料齐全。其中 CINⅠ 10例,CINⅡ 10例,CINⅢ 10例,10例宫颈浸润癌组织 ,及10例正常宫颈组织作对照。宫颈癌患者术前均未进行过放疗、化疗。标本登记编号后置于-80℃保存,用于 RT-PCR。

1.2 实验方法

应用 RT-PCR方法研究人宫颈癌组织中的 PDCD5、Survivin的表达。

1.3 统计学分析

2 结果

2.1 PDCD5 mRN A在正常宫颈组织、CIN、宫颈癌组织的表达

见表1。

表1 PDCD5mRN A在不同宫颈组织的表达强度 ±s)

表1 PDCD5mRN A在不同宫颈组织的表达强度 ±s)

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在正常宫颈及 CINⅠ级组织中,PDCD5表达呈强阳性,CINⅡ级以上及宫颈癌组织表达较低。统计学分析表明,各组间 PDCD5阳性率的表达具有显著性差异 (P＜0.05)。各组间 PDCD5阳性率的差别,正常宫颈与 CINⅠ级之间无显著性差异,CINⅡ与 CINⅢ级之间无显著性差异,其余各组间比较阳性率差异均有显著性 (P＜0.05)。提示随着宫颈上皮细胞的恶性转化,宫颈 PDCD5的表达逐渐降低。

2.2 Survivin mRN A在正常宫颈组织、CIN、宫颈癌组织的表达

见表2。

表2 Survivin mRN A在不同宫颈组织的表达强度 (±s)

表2 Survivin mRN A在不同宫颈组织的表达强度 (±s)

宫颈组织 Survivin

Survivin在正常组织中无表达,但随着 CIN级别的升高,Survivin的阳性表达率逐渐升高。统计学分析表明,各组间 Survivin阳性率的表达具有显著性差异 (P＜0.05)。各组间 Survivin阳性率的差别,正常宫颈组织与 CINⅠ级之间无显著性差异,CINⅢ与宫颈癌之间无显著性差异,其余各组间比较阳性率差异均有显著性 (P＜0.05)。提示随着宫颈上皮细胞的恶性转化 ,宫颈 Survivin的表达逐渐升高。

3 讨论

本研究结果显示,PDCD5蛋白和 mRNA在正常宫颈组织及 CINⅠ级中呈高表达,在 CINⅡ级以上及宫颈癌组织中阳性表达率降低。这一实验结果提示,PDCD5可能在不同程度上参与了宫颈癌前病变到宫颈癌这一进程中的调控。说明各种因素所致 DN A损伤的细胞演变为肿瘤细胞后,其抗凋亡能力增强,抗凋亡蛋白的表达也随之增强,而凋亡相关蛋白的表达则下降,且随着肿瘤的演变,凋亡相关蛋白的表达呈进行性下降。PDCD5表达率的降低可能是宫颈癌发生的早期信号,对宫颈癌在早期诊断有重要意义。PDCD5是北京大学医学部医学免疫学重点实验室在国际上首先报道的一个人类新基因,在人体50多种组织中均有表达,参与调控细胞凋亡过程[1,2]。PDCD5是一个早期参与细胞凋亡和抑制细胞生长的重要调控因子,因此在生长发育和肿瘤细胞凋亡中起着重要的作用。本研究结果显示,Survivin蛋白和 mRNA在宫颈癌组织中呈高表达,在正常宫颈组织中呈低表达。并在正常宫颈组织,CIN及宫颈癌中差别有显著意义。提示Survivin基因的表达发生在宫颈癌恶性转化的早期,在宫颈癌组织中的表达可能抑制了突变的细胞凋亡,扰乱了细胞生长和凋亡途径,促进细胞逃离生长监控,导致肿瘤的发生。Survivin基因是于1997年 Altier[3]利用效应细胞蛋白酶受体1(effecter cell protease receotor-1,EPR)cDN A在人基因组库种筛选克隆出 Survivin基因,近研究发现,Survivin在胚胎发育期间表达,在终末分化组织中不表达,但在很多转化细胞和人的肿瘤中有所表达。在大肠癌,神经母细胞瘤、乳腺癌、肾癌、膀胱癌、胃癌、肝癌、卵巢癌、宫颈癌、非小细胞肺癌和成人 T细胞性白血病等人类恶性肿瘤中均高表达,而且其表达与肿瘤的发生、发展和预后关系密切[4]。现研究认为,肿瘤的发生与基因密切相关,基因突变或基因表达失常是肿瘤发生的关键。其中凋亡调节基因表达异常使细胞凋亡过程失去控制在肿瘤形成过程中起十分重要的作用。因此对凋亡相关基因及其表达产物与肿瘤关系的深入研究,在揭示肿瘤的发病机制,从而早期诊断、预防及治疗肿瘤方面均具有重要意义。宫颈癌是严重威胁女性健康的恶性肿瘤,发病率为发展中国家妇女的第一位。研究凋亡基因在宫颈 CIN级、宫颈癌组织中的表达,有助于我们了解凋亡基因在 CIN级的转归中所起的作用,有利于我们探讨细胞凋亡在 CIN及宫颈癌治疗中的可能性。

[1]马大龙.新细胞因子及细胞凋亡基因的发现与功能研究[J].北京大学学报(医学版),2002,34：488-492

[2]Liu HT,Wang YG,Zhang YM,et al.PDCD5,a nov el apoptosis-relat-ed gene cloned from human leukemia cell line T F-1,could enhance apoptosis of some tumor cells induced by g rowth factor factor withdrawal[J].Biochem Biophy Res Comm,1999,254：203-210

[3]Ambrosini G,Adida C,Altieri Dc,et al.A novel-apotosis gene,Surviving,ex press in cancer and Iymphoma[J].Nature Med,1997,(8)：917-921

[4]Dario C,Altieri.The molecular basis and potential role of surviving in cancer diagnosis and therapy[J].Trends in Moleculor Medicine,2001,7：542-547