古丽巴哈尔·阿巴拜克力

(新疆师范大学生命科学学院，新疆 乌鲁木齐 830054)

新疆准噶尔铁线莲不同部位提取液抑菌活性初步研究

古丽巴哈尔·阿巴拜克力

(新疆师范大学生命科学学院，新疆 乌鲁木齐 830054)

用水和70%乙醇从准噶尔铁线莲不同部位中提取其活性成分，探讨其抑菌作用。结果表明：叶水提物的MIC值分别为大肠杆菌5g/100mL，金黄色葡萄球菌、短小芽孢杆菌为3g/100mL、枯草杆菌为1g/100mL；叶醇提物的MIC值分别为大肠杆菌3g/100mL，金黄色葡萄球菌、枯草杆菌为0.5g/100mL、短小芽孢杆菌1g/100mL。茎水提物的MIC值分别为大肠杆菌10g/100mL，金黄色葡萄球菌7g/100mL、短小芽孢杆菌、枯草杆菌为5g/100mL。茎醇提物的MIC值分别为大肠杆菌7g/100mL，金黄色葡萄球菌5g/100mL，枯草杆菌、短小芽孢杆菌为3g/100mL。花水提物的MIC值分别为大肠杆菌5g/100mL，金黄色葡萄球菌、枯草杆菌为3g/100mL，短小芽孢杆菌1g/100mL。花醇提物的MIC值分别为大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、短小芽孢杆菌为1g/100mL，枯草杆菌为0.5g/100mL。果实水提物的MIC值分别为大肠杆菌、短小芽孢杆菌为5g/100mL，金黄色葡萄球菌、枯草杆菌为3g/100mL；果实醇提物的MIC值分别为大肠杆菌为3g/100mL，金黄色葡萄球菌、短小芽孢杆菌、枯草杆菌为1g/100mL。

准噶尔铁线莲；不同部位；提取物；抑菌活性

准噶尔铁线莲(Clematis songarica Bge.)毛茛科铁线莲属，主要产于我国新疆、内蒙古西部，国外在蒙古、中亚荒漠地区也有分布。生长于荒漠低山麓前洪积扇，石砾质冲积堆以及荒漠河岸。直立小灌木，高4 0～120cm。单叶对生或簇生；花序为聚伞花序或圆锥状聚伞花序，顶生；白色或淡黄色，花期6～7月，果期7～8月[1]。

迄今国内外对准噶尔铁线莲植物化学成分的研究比较少，有关其水提液和醇提液抑菌效果的比较研究则尚未见报道。因此，采用不同提取方法从准噶尔铁线莲

不同部位中提取有效抗菌成分做抑菌实验，不仅有望筛选到具有抗菌成分的药材新资源，也可获知有效的提取方法。这对评价准噶尔铁线莲的药用价值，开发利用这一自然资源具有实际意义[2]。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

准噶尔铁线莲，于2008 年8月采自新疆乌鲁木齐县永丰乡农田田埂。将不同部位晾干、粉碎， 备用。

蛋白胨、琼脂、 牛肉膏、蔗糖、葡萄糖、乙醇、NaCl、NaOH、HCl。

1.2 菌种与培养基

大肠肝菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草杆菌(Bacillus subtilis)、短小芽孢杆菌(Bacillus pum ilus)、以下分别简称 E.c、S.a、B.s、B.p。以上菌种均由新疆大学提供。

牛肉膏蛋白胨培养基[3]。

1.3 方法

1.3.1 不同部位水提取液的制备[4]

分别称取准噶尔铁线莲叶、茎、花以及果实各5g，分别加10倍样量的蒸馏水50mL，90℃浸提3h，然后将样品趁热过滤收集滤液，滤渣中加入25mL蒸馏水同条件提取2.5h，再次过滤并合并两次滤液，将滤液置入旋转蒸发仪中旋转蒸发浓缩至黏稠状，然后用水溶解并定容至10mL制成水悬浊液，分别获得0.5g/mL的水提取液。

1.3.2 不同部位醇提取液的制备

分别称取准噶尔铁线莲叶、茎、花以及果实各5g，分别按照各自的最佳提取工艺进行浸提，然后将样品趁热过滤收集滤液，将滤液置入旋转蒸发仪中旋转蒸发浓缩至黏稠状，然后用水溶解并定容至10mL制成水悬浊液，分别获得0.5g/mL的乙醇提取液。

1.3.3 菌悬液的制备[5]

将各供试菌菌种接种于普通营养琼脂斜面培养基上，37℃培养20～22h活化，然后将斜面活化好的各供试菌体置于装有9mL无菌生理盐水的试管中，振荡摇匀，再分别稀释制成含菌量为106～108CFU/mL的菌悬液。

1.3.4 抑菌实验

1.3.4.1 抑菌效力的测定[6]

将灭菌过的培养基制成平板，吸取0.2mL菌悬液均匀涂抹到平板上。将各浸渍过准噶尔铁线莲叶、茎、花、果实水提液和醇提液中的滤纸圆片(6mm)风干，放到每个涂有菌液的平板上，等距离放3片，每个实验平行3次，并用无菌水作空白对照，确定抑菌效果。在37℃条件下培养24h后测定抑菌圈直径大小，取平均值。

1.3.4.2 最低抑菌浓度(MIC)的测定

配制足够量的牛肉膏蛋白胨液体培养基参照文献[7]进行测定。以上操作均在无菌条件下进行。

3.4.3 最低杀菌浓度(MBC)的测定

将提取物浓度高于MIC(包括MIC)的各试管或培养皿继续培养24h，观察生长情况。以仍无菌生长的添加量为该提取液的最低杀菌浓度。

2 结果与分析

2.1 准噶尔铁线莲水提取液和醇提取液对各供试菌的影响

表 1 准噶尔铁线莲水提取液的抑菌作用Table 1 Antibacterial activity of PWE

由表1可知，准噶尔铁线莲茎、叶、花以及果实部位水提取液对4种供试菌株具有不同的抑菌效果。抑菌效果依次为：叶＞花＞果实＞茎。茎、叶水提取液对4种菌株的抑菌效果依次为：枯草杆菌 ＞短小芽孢杆菌＞金黄色葡萄球菌＞大肠肝菌。花、果实水提取液对4种菌株的抑菌效果依次为：金黄色葡萄球菌＞枯草杆菌＞短小芽孢杆菌＞大肠肝菌。

表 2 准噶尔铁线莲醇提取液的抑菌作用Table 2 Antibacterial activity of PAE

由表2可知，准噶尔铁线莲不同部位醇提取液对4种供试菌株的抑菌效果依次为：叶＞花＞果实＞茎。茎、叶、花、果实等部位醇提取液对4种供试菌株的抑菌效果依次为：枯草杆菌＞金黄色葡萄球菌＞短小芽孢杆菌＞大肠肝菌。

2. 2水提取液与醇提取液对各供试菌的最低抑菌浓度

由表3可知，准噶尔铁线莲叶水提取液对4种供试细菌的最低抑菌浓度分别为大肠杆菌为5g/100mL，短小芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌3g/100mL，枯草杆菌为1g/100mL。醇提取液抑菌效果较水提取液好，醇提取

液对4种供试细菌的最低抑菌浓度分别为大肠杆菌为3g/100mL，金黄色葡萄球菌、枯草杆菌为0.5g/100mL，短小芽孢杆菌为1g/100mL。

表3 准噶尔铁线莲叶水提液、醇提液对各供试菌的最低抑菌浓度Table 3 MICs of PWE and PAE from leaves on different bacteria

表4 准噶尔铁线莲茎水提取液、醇提取液对各供试菌的最低抑菌浓度Table 4 MICs of PWE and PAE from stems on different bacteria

由表4可知，准噶尔铁线莲茎水提取液对4种供试细菌的最低抑菌浓度分别为：大肠杆菌为10g/100mL，对枯草杆菌、短小芽孢杆菌的最低抑菌浓度为5g/100mL，对金黄色葡萄球菌为7g/100mL。

醇提取液对4种供试细菌的最低抑菌浓度分别为大肠杆菌7g/100mL，金黄色葡萄球菌5g/100mL，枯草杆菌、短小芽孢杆菌为3g/100mL。

表5 准噶尔铁线莲花水提取液、醇提取液对各供试菌的最低抑菌浓度(MIC)Table 5 MICs of PWE and PAE from flowers on different bacteria

由表5可知，准噶尔铁线莲花醇提取液抑菌效果较水提取液好。水提取液对4种供试细菌的最低抑菌浓度分别为大肠杆菌5g/100mL，枯草杆菌、金黄色葡萄球菌为3g/100mL，短小芽孢杆菌为1g/100mL。醇提液对4种供试细菌的最低抑菌浓度分别为大肠杆菌1g/100mL、金黄色葡萄球菌1g/100mL、短小芽孢杆菌为1g/100mL，枯草杆菌为0.5g/100mL。

表6 准噶尔铁线莲果实水提取液、醇提取液对各供试菌的最低抑菌浓度Table 6 MICs of PWE and PAE from fruits on different bacteria

由表6可知，准噶尔铁线莲果实水提取物对4种供试细菌的最低抑菌浓度分别为大肠杆菌5g/100mL、短小芽孢杆菌5g/100mL、金黄色葡萄球菌5g/100mL、枯草杆菌3g/100mL。醇提取物对各供试细菌的最低抑菌浓度分别为：大肠杆菌为3g/100mL，金黄色葡萄球1g/100mL、枯草杆菌、短小芽孢杆菌为1g/100mL。

3 结 论

准噶尔铁线莲水提取液和醇提取液都具有不同程度的抑菌活性，其中醇提取液的抑菌效力强，对球菌和杆菌、革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌都有抑菌活性。醇提取液比水提取液具有更明显的抑菌效果，这说明乙醇更容易将植物体内有效抑菌物质提取出来。此实验证明准噶尔铁线莲提取液对造成食品腐败的几种微生物具有一定的抗性，为其有效成分提取及开发利用提供了参考。对于其抗菌活性物质还有待进一步的研究。

[1]新疆植物志编辑委员会. 新疆植物志∶ 2卷[M]. 乌鲁木齐∶ 新疆科技卫生出版社, 1994.

[2]黄文武. 铁线莲属植物的研究进展[J]. 中草药, 2002, 33(3)∶ 285-288.

[3]沈萍, 范秀容, 李广武. 微生物学实验[M]. 3版. 北京∶ 高等教育出版社, 1999∶ 214-215.

[4]霍光华, 高荫榆, 陈明辉. 乌柏叶抑菌活性功能成分的研究[J]. 食品与发酵工业, 2005, 31(3)∶ 52-56.

[5]严赞开. 生姜提取物的抑菌试验[J]. 中国食品添加剂, 2005(1)∶ 74-76.

[6]赵东亮, 郁建平, 周晓秋, 等. 博落回生物碱的抑菌作用研究[J]. 食品科学, 2005, 26(1)∶ 45-47.

[7]买合布白·阿不都热依木, 古丽斯玛依·艾拜都拉, 艾克白尔·买买提, 等. 心草水提液和醇提液抑菌作用研究[J]. 食品科学, 2006, 27(12)∶ 198-200.

Antibacterial Activities of PWE and PAE from Clematis songarica Bge. in Xinjiang

Gulibahaer·ABABAIKELI
(College of Life Science, Xinjiang Normal University, Urumqi 830054, China)

Antibacterial activities of water extract (PWE) a nd alcohol extract (PAE, 70g/100mL ethanol) from Clematis songarica Bge. were evaluated. Results indicated that minimum inhibition concentrations (MICs) of PWE from leaves were 5g/100mL for Echerichia coli, 3g/100mL for Staphylococcus aureus and Bacillus pumilus, and 1g/100mL for Bacillus subtilis. MICs of PAE from leaves were 3g/100mL for Echerichia coli, 0.5 g/100mL for Staphylococcus aureus and Bacillus subtilis, and 1 g/100mL for Bacillus pumilus. MICs of PWE from stems were 10 g/100mL for Echerichia coli, and 7 g/100mL for Staphylococcus aureus, and 5 g/ 100mL for Bacillus pumilus and Bacillus subtilis. MICs of PAE from stems were 7g/100mL for Echerichia coli, 5 g/100mL for Staphylococcus aureus, and 3 g/100mL for Bacillus subtilis and Bacillus pumilus. MICs of PWE from flowers were 5 g/100mL for Echerichia coli, 3 g/100mL for Staphylococcus aureus and Bacillus subtilis, and 1g/100mL for Bacillus pumilus. MICs of PAE from flowers were 1 g/100mL for Echerichia coli, Staphylococcus aureus and Bacillus pumilus, and 0.5 g/100mL for Bacillus subtilis. MICs of PWE from fruits were 5 g/100mL for Echerichia coli and Bacillus pumilus, and 3 g/100mL for Staphylococcus aureus and Bacillus subtilis. MICs of PAE from fruits were 3 g/100mL for Echerichia coli, and 1g/100mL for Staphylococcus aureus, Bacillus pumilus and Bacillus subtilis.

Clematis songarica Bge.；different parts；extract；antimicrobial activity

TS201.3

A

1002-6630(2010)09-0117-03

2009-10-29

古丽巴哈尔·阿巴拜克力(1969—)，女，副教授，研究方向为植物有效成分分析。E-mail：gvlbahar.a@163.com