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我校屏障系统动物实验设施的综合管理

2010-02-12黄文革郭芬芬陈凤英刘慰华张健黄河清

中国比较医学杂志 2010年1期
关键词:屏障无菌物品

黄文革,郭芬芬,陈凤英,刘慰华,张健,黄河清

(中山大学实验动物中心,广州 510080)

我校实验动物中心北校区屏障系统动物实验设施于2007年5月投入使用,为了确保屏障系统正常规范的运行、以利于科研工作的顺利开展,结合本中心屏障系统动物实验设施的实际情况,我们初步摸索、积累了一些科学、行之有效的运营管理经验,总结如下。

1 建立完整的管理体系

1.1 建立完整的文件体系

建立各级各类人员的岗位职责,包括实验室负责人员、实验管理与操作人员,动物饲养人员、设施维护与消毒灭菌人员等岗位职责,这些体系一旦完善建立,应严格执行。

1.2 建立标准的屏障环境操作规程

包括人员、物品、动物进出屏障系统的标准操作规程;双扉真空高压蒸汽灭菌器使用与维护的标准操作规程;使用屏障系统动物实验室的标准操作规程;系统内实验动物购买的标准操作规程;系统内实验动物接收和检疫的标准操作规程;系统内实验动物的饲料、垫料、饮水管理的标准操作规程;中央空调维护操作规程;系统内大、小鼠饲养室的标准操作规程;系统内实验室清洁消毒方法的标准操作规程;系统内实验室日常工作记录的操作规程及各种动物实验操作技术标准规程。各项操作规程一旦建立必须严格地执行[1]。

2 人员队伍的建设和管理

2.1 系统内工作人员的管理

从事屏障系统工作的管理人员、实验操作人员、饲养人员、设施设备维护人员必须经过特定的技术培训,且要持有实验动物权威机构颁发的资格上岗证,方可进入屏障系统工作。管理人员要熟悉掌握屏障系统动物实验室的设施设备的基本性能和使用方法、保证系统正常运行的各种程序,实验操作人员全面负责协助各学科实验研究人员对动物实验的操作和观察。要求这些人员对屏障系统动物实验室具有高度的责任心,随时关注系统的安全和正常运转,及时发现和解决问题,为此,我们采取管理人员值班制。定期对工作人员进行培训,树立无菌操作观念。

2.2 外来研究人员的管理

进入系统的实验研究人员必须经过标准化屏障系统运行管理的技术培训,且在工作中要接受管理员的技术指导。本中心由于面向全校及附属医院的科研人员开放,协及面较广,且流动性大,因此在管理上就有其特殊性;本着保证科研人员能及时进行动物实验,在每一个需要进入屏障系统实验室实验的实验研究人员进入屏障系统前,我们采取由专职的管理人员每周定点定时对其进行培训,其主要内容为屏障系统动物实验室的标准操作规程以及人员、物品和动物进出屏障系统动物实验室的流程、路线和注意事项等,获得本部屏障系统实验准入证,方可进入系统进行动物实验。对研究生开设《实验动物学》课程,也可定期举办一些讲座。

3 实验动物环境设施的管理

实验动物环境设施是培育不同级别实验动物和进行相应级别动物实验的基本条件,是实验动物科学发展的“硬件”,其管理就是“软件”了,为了充分发挥硬件的作用,就必须做好实验动物环境设施的管理。

3.1 系统内环境的设施指标管理

主要指标包括温度、湿度、噪音、光照、室内风速、氨浓度、室内换气次数、空气洁净度、各区域压力差等。每天定时观察并记录系统内各动物实验室的温度、湿度以及各区域压力差;本单位在更换中效或高效过滤时对各区域压力差进行自测,根据它们的变化,对空调系统的风速、温度、湿度进行调整,对风阀进行更换处理。其余各项环境指标一般一个季度检测一次[1-2]。

3.2 系统内环境的消毒管理

每天工作结束后,对系统内的台面、地面用无菌水清洁后用0.1%过氧乙酸消毒液擦拭消毒,每周定期进行二次喷雾消毒,每一季度对内环境进行一次无菌检查,指标为空气落菌数。为了避免细菌的耐药性,我们采用两种消毒液轮换使用;同时,每天在确认系统内无人时,对无动物区域定点进行一次紫外线照射30min加强空气消毒;经过两年多的运作管理,证明此方法是可行、有效的。

4 系统内环境物品的管理

参照国家有关实验动物标准,结合动物设施及生产实际对动物所需的饮水、饲料、垫料、笼具等建立了检测方法和检测制度,将检测动物质量为主转变为检测动物生存环境为主,以便能及时发现并控制病原微生物对动物的污染[3]。

4.1 物品的消毒

一切物品都需要经过灭菌、消毒后才可传进屏障系统。每种物品都有不同的特性,其灭菌的方法也有所不同。(1)能耐高温高压物品,如笼具、水瓶、无菌隔离服、饲料、木屑等,均可经高压灭菌器灭菌或121℃、30min高温处理,可达灭菌目的,同时,其消毒效果的检测可通过设备微型打印机打印的数据作参考,通过观察这些数据与要求是否相符可判断灭菌效果的好坏;也可在用121℃化学指示剂检测消毒效果,或者定期对灭菌器做B-D实验,检测高压灭菌器灭菌的消毒效果。为了保证饲料的营养元素,本部采用经钴60辐射灭菌的全价饲料,同时,定期进行无菌抽查,分别接种肉汤和硫乙醇酸钠培养基,37℃下培养48h。垫料,我们外购新鲜木刨花,先经过筛子去除小的粉末,再将垫料装入已洗净的盒子或装入口袋里进行高压消毒,其目的是减少内环境的尘埃颗粒。(2)可经消毒液浸泡消毒、灭菌,又不耐高温高压的物品,如塑料箱等,可经渡槽消毒液浸泡一定时间,在系统内把物品从渡槽取出来后,需要用无菌水进行冲洗以去除消毒后遗留的消毒药物,放在系统内的洁净储物间晾干备用。(3)不能高压,又不能浸泡的物品,或者已经灭菌的商品化的实验消耗品,如一次性注射器(未开封外包装的)等,先把物品表面进行75%酒精喷雾,再放在物品传递窗经过紫外线照射消毒20min后,传递到系统内的洁净储物间存放备用。

4.2 无菌水的检测

动物饮用水经过这两年多的检测观察,我们根据自身条件和情况制定了一套饲养及检测方法。每周一、四更换所有饮水瓶,而后将消毒好的水瓶重新灌装无菌水,同时,我们每半个月对纯水机进行反冲洗及消毒,每个月进行无菌检测,随时监控,以保证屏障内的动物饮水质量。

4.3 动物尸体及废弃物的处理

动物尸体采取集中处理。平时将动物尸体储藏于尸体房的冰柜中,由有关机构定期回收进行无害化处理。

5 小结

中山大学实验动物中心动物实验屏障系统自2007年启用以来,就建立了一套科学的、合理的屏障系统运行管理规范。实施2年以来,经省实验动物检测所多次检测,屏障系统内各环境指标都符合国家标准。由于系统的人员进出、空气过滤、设施老化及其它难以预计的因素,其不可能无限期保持洁净环境状态。在现有条件下,只有建立一套合理管理规章制度,加强系统的日常维护,才能保证屏障系统内的实验动物免受微生物的污染。总之,屏障系统的管理是一项高标准、严要求,在其运行过程中,必须严格按照规程操作,才能保证动物实验屏障环境系统的各项指标符合要求,保证系统正常运行。

[1]俞利平,吴培林,亢晓冬.高校实验动物屏障系统运行中的体会[J].杭州师范学院学报(医学版),2008,28(2):91-92.

[2]王永金,雷培琪,曾哓岚.SPF级动物屏障系统的运营管理[J].四川生理科学杂志,2008,30(3):122-123.

[3]练有文,莫梅英.我院SPF屏障系统设施概况及动物质量管理初探[J].实验动物科学与管理,2004,21:34-36.

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