曾英坚　王希平

[摘要] 流式细胞术是一种集多种先进技术于一体的较为实用的检测手段，近年来广泛应用于医学研究的各个领域。本文中笔者结合临床工作中的具体病例，探讨流式细胞术在白血病诊断中的应用价值。

[关键词] 流式细胞术；白血病；诊断；价值

[中图分类号]R733 [文献标识码] B[文章编号] 1673-7210（2009）06（b）-137-01

流式细胞术是20世纪70年代发展起来的，以流式细胞仪为工具对细胞等生物粒子进行定性及定量分析研究的一种新技术，近年越来越多地应用于医学临床，特别是随着细胞单克隆抗体标记技术的发展，应用流式细胞仪研究、分析恶性血液病细胞的异常免疫表型，已经成为现代医学研究血液病的可靠方法[1-2]。现结合我科具体病例，探讨流式细胞术在白血病诊断中的应用价值。

1 临床病例

病例1，女，25岁，因“反复四肢关节肿痛三年余，伴全身浅表淋巴结肿大、肾功能损害3个月”于2008年9月28日来诊，曾在外院诊断为“①慢性肾功能不全；②系统性红斑狼疮？”来诊时疲倦乏力明显，四肢关节轻度肿胀，疼痛有热感，全身浅表淋巴结肿大，以颈部淋巴结明显，血肌酐、尿素氮轻度升高，血常规示为WBC 6.39×109/L，HGB 65 g/L，PLT 194×109/L，并可见一定数量幼稚细胞。入院后即行骨髓穿刺及骨髓活检术，作骨髓细胞形态学及病理学检查，并以血常规管抽取静脉血3 ml作流式细胞术分析。当日骨髓细胞形态学报告提示：淋巴瘤白血病。2 d后流式细胞检查结果回复：幼稚细胞占61.8%，其表型为CD34＋，CD117-，TDT＋，CD79a＋，CD33＋，CD13＋，HLA-DR＋，CD19＋，CD56-，CD38-，CD10-， CD14-，CD64-， CD2-，CD3-，CD5-，CD7-，结果符合前驱B急性淋巴细胞白血病/淋巴母细胞淋巴瘤。回顾临床资料，该患者起病以来血小板计数一直正常，并主要以淋巴结肿大、四肢关节肿胀疼痛为表现，符合淋巴母细胞淋巴瘤外周血和骨髓的受累很少导致血小板减少，以及该病主要以淋巴结和骨及骨关节易受侵的特点。以相应方案化疗后，患者病情较快缓解。骨髓病理检查结果于送标本后第10日回复，亦证实为B淋巴母细胞淋巴瘤白血病。

病例2，男，40岁。因“肢倦乏力、牙龈出血肿痛伴发热1个月”于2008年10月29日来诊，曾在外院经骨髓细胞形态学检查诊断为“急性髓性白血病-M5b”。来我院后即复查骨髓细胞形态学，并同时作骨髓活检及抽取3 ml骨髓液作流式细胞术分析。观察骨髓片发现其原始细胞虽然核型似M5，但胞浆颗粒相对增粗增多，不符合幼稚单核细胞特征，综合考虑M2可能性较大。2 d后流式免疫分型结果回复：其髓母细胞占总细胞的36%，表型为CD34＋，CD117＋，CD13＋，HLA-DR＋，CD19＋，CD56＋，CD38＋，CD64＋，CD4＋，CD2-，CD3-，CD5-，CD7-，结果符合急性髓性白血病-M2。数天后病理结果回复：符合急性非淋巴细胞白血病病理改变。以相应方案化疗后，第20天复查骨髓示CR。

病例3，男，22岁。因“诊断为急性淋巴细胞白血病1年”于2008年12月24日来诊。患者1年前因血红蛋白降低、血小板减少在外院经骨髓细胞形态学检查诊断为“急性淋巴细胞白血病”，其后在该院以急性淋巴细胞白血病化疗方案先后化疗8次，均未缓解，转诊我院拟行第9次化疗。翻阅其病历所记载化疗方案，均为正规急性淋巴细胞白血病化疗方案，且用药正确得当，那么患者化疗效果差的原因为何？是否白血病分型诊断有误？入院后即复查骨髓，细胞形态学仍考虑为急性淋巴细胞白血病，同时取标本作流式细胞术分析，2 d后结果回复示：CD34＋，CD117-，CD79a＋，cMPO＋，TDT＋，HLA-DR＋，CD19＋，CD10-，CD33＋，CD13＋，CD2-，CD7-， CD20-， CD56-，CD38＋， CD14-， CD64-，CD3-，CD5-，CD7-， CD15-，CD16-，结果符合急性双表型白血病，即予NA方案（米托蒽醌联合中剂量阿糖胞苷方案，对双表型有效）化疗，化疗后半个月复查骨髓示原始细胞比例小于5%。

2 讨论

白血病的诊断贵在快速、准确，以便临床上能及时以相应方案对患者进行正确救治。从以上三个病例可以看出，流式细胞术在白血病的诊断和分型中具有重要的应用价值，其基本原理是利用荧光素标记的单克隆抗体作分子探针，多参数分析白血病细胞的细胞膜和细胞浆或细胞核的免疫表型，从而深入地了解白血病的异质性，准确判断细胞的来源和所处的分化阶段[3]。由于它借鉴了荧光显微技术与血细胞计数原理，同时利用了荧光染料、激光技术、单抗技术以及计算机技术的发展，故其检测结果具备了精确、客观以及快速的优点[4]，在很大程度上弥补了骨髓细胞形态学带有较大主观性和骨髓病理学检查费时相对较长的缺点，从而为白血病的快速准确诊断提供了一个强有力的检测手段，值得临床大力推广应用。

[参考文献]

[1]黄晓军,刘开彦.白血病内科临床常见疑难问题及对策[M].北京:清华大学出版社,2007:17.

[2]邱阳,刘越坚,郭慧淑,等.流式细胞术在159例急性白血病免疫分型中的应用[J].中国实验诊断学,2009,13(1):103-105.

[3]中美联合上海市白血病协作组.急性髓细胞白血病微分化型流式细胞术免疫分型分析[J].白血病·淋巴瘤,2008,17(6):430-432.

[4]马军,张伯龙.白血病[M].北京:北京大学医学出版社,2007:108.

（收稿日期：2009-04-14）